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公开(公告)号:CN102936618A
公开(公告)日:2013-02-20
申请号:CN201210401583.X
申请日:2012-10-19
Applicant: 江苏大学
Abstract: 本发明涉及生物化学与分子生物学领域。具体而言,特指一种从人体细胞众多E3中查找出特异性识别靶蛋白泛素连接酶E3和调控靶蛋白泛素化反应的E2/E3系统的方法。该方法是先建立体外泛素化分析系统,通过已知的泛素活化酶E1和以HelaS100馏分作为E3源,筛选出介导靶蛋白泛素反应的结合酶E2;再采用多重层析柱组合,结合质谱分析,从人体细胞中查找特异性识别靶蛋白的泛素连接酶E3和调控靶蛋白泛素化修饰的E2/E3系统。通过这种方法,可以方便、准确地查找出识别靶蛋白的底物识别因子-泛素连接酶E3;建立介导靶蛋白泛素化修饰的E2/E3调控系统。
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公开(公告)号:CN103777014A
公开(公告)日:2014-05-07
申请号:CN201410051062.5
申请日:2014-02-14
Applicant: 江苏大学
IPC: G01N33/574
CPC classification number: G01N33/5008 , G01N33/94 , G01N2500/10
Abstract: 本发明涉及一种以DNA聚合酶δ为靶标筛选化疗药物的方法,属于生物化学与细胞分子生物学领域。方法为:确定出由Calpain激活途径介导的肿瘤细胞凋亡,以DNA聚合酶δ/p12为靶标,快速评价某种化疗药物对特定肿瘤细胞的杀伤效率。优点为:结合市场可购买的检测细胞凋亡、Calpain和Caspase-3活性的常规试剂盒,通过检测DNA聚合酶δ各个亚基在不同细胞凋亡途径中不同时间的变化,以DNA聚合酶δ作为细胞凋亡的一个新靶标,方便准确地判断某种肿瘤化疗药物的药效,本发明特别适用于Calpain激活途径介导癌细胞凋亡的化疗药物筛选。
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公开(公告)号:CN103777014B
公开(公告)日:2016-01-27
申请号:CN201410051062.5
申请日:2014-02-14
Applicant: 江苏大学
IPC: G01N33/574
Abstract: 本发明涉及一种以DNA聚合酶δ为靶标筛选化疗药物的方法,属于生物化学与细胞分子生物学领域。方法为:确定出由Calpain激活途径介导的肿瘤细胞凋亡,以DNA聚合酶δ/p12为靶标,快速评价某种化疗药物对特定肿瘤细胞的杀伤效率。优点为:结合市场可购买的检测细胞凋亡、Calpain和Caspase-3活性的常规试剂盒,通过检测DNA聚合酶δ各个亚基在不同细胞凋亡途径中不同时间的变化,以DNA聚合酶δ作为细胞凋亡的一个新靶标,方便准确地判断某种肿瘤化疗药物的药效,本发明特别适用于Calpain激活途径介导癌细胞凋亡的化疗药物筛选。
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公开(公告)号:CN102936618B
公开(公告)日:2014-04-09
申请号:CN201210401583.X
申请日:2012-10-19
Applicant: 江苏大学
Abstract: 本发明涉及生物化学与分子生物学领域。具体而言,特指一种从人体细胞众多E3中查找出特异性识别靶蛋白泛素连接酶E3和调控靶蛋白泛素化反应的E2/E3系统的方法。该方法是先建立体外泛素化分析系统,通过已知的泛素活化酶E1和以HelaS100馏分作为E3源,筛选出介导靶蛋白泛素反应的结合酶E2;再采用多重层析柱组合,结合质谱分析,从人体细胞中查找特异性识别靶蛋白的泛素连接酶E3和调控靶蛋白泛素化修饰的E2/E3系统。通过这种方法,可以方便、准确地查找出识别靶蛋白的底物识别因子-泛素连接酶E3;建立介导靶蛋白泛素化修饰的E2/E3调控系统。
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