Imatinib耐药的KIT和PDGFRA野生型GIST细胞株及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN108642016A

    公开(公告)日:2018-10-12

    申请号:CN201810294236.9

    申请日:2018-03-30

    Inventor: 黄朝晖 冯玉阳

    Abstract: 本发明提供的Imatinib耐药的KIT和PDGFRA野生型GIST细胞株命名为GIST-FR,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号CCTC NO:C2017111。同时本发明还提供了这一细胞株的构建方法以及该细胞株作为人胃肠道间质瘤耐药机制的探讨及其相关信号通路研究的细胞模型的用途,采用组织块培养法获取GIST原代细胞,并进行永生化,建立GIST-F细胞系,随后对其进行Imatinib耐药诱导,建立Imatinib耐药的GIST细胞株GIST-FR。GIST-FR细胞已体外传代40余代,较GIST-F细胞生长慢,对Imatinib的IC50显著增高,耐药指数为3.52(P<0.01);全外显子组测序结果显示GIST-FR细胞KIT和PDGFRA均阴性。本发明从人GIST原代组织成功建立GIST细胞系,并进一步诱导获得其Imatinib耐药细胞,为GIST发病机制及耐药相关研究奠定了基础。

    一种具有双细胞靶向性的抗肿瘤牛奶外泌体载药系统及其制备和应用

    公开(公告)号:CN119488496A

    公开(公告)日:2025-02-21

    申请号:CN202411645067.0

    申请日:2024-11-18

    Abstract: 本发明公开了一种具有双细胞靶向性的抗肿瘤牛奶外泌体载药系统及其制备和应用,本发明设计的双细胞靶向载药外泌体系统通过修饰靶向EGFR和PD‑L1的纳米抗体同时向肿瘤细胞和肿瘤相关巨噬细胞递送在两种细胞均能产生促癌作用的关键分子miR‑21‑5p的抑制剂。相对以往针对miR‑21‑5p的临床实验相比,避免了低靶向性和强毒副作用。进行双靶向修饰后针对两种细胞进行治疗展示出比单一靶向治疗更有效的作用。另外,所使用的载体为人日常饮用的鲜牛奶中提取的牛奶外泌体,具备低的免疫原性和毒性。本发明可应用于EGFR+和/或PD‑L1+结直肠癌、胃癌、黑色素瘤等恶性肿瘤的治疗,并且能与放疗和anti‑PD‑1疗效联合使用,提高疗效。

    一种双基因组合及其在胃癌免疫治疗患者个性化候选评估中的应用

    公开(公告)号:CN113957147A

    公开(公告)日:2022-01-21

    申请号:CN202111259387.9

    申请日:2021-10-27

    Inventor: 黄朝晖 崔凯飒

    Abstract: 本发明公开了一种鉴定胃癌高风险免疫过驱动亚群的双基因组合,包括以下步骤:利用公共数据库胃癌患者肿瘤组织转录组和生存数据获取胃癌免疫检查点相关双基因组合;在待测胃癌患者队列中检测双基因的表达;根据双基因的表达和待测胃癌患者队列生存数据,鉴定出双基因各自的最显著生存的分组点;根据双基因各自的最显著生存的分组点,划分出待测胃癌患者队列的高风险免疫过驱动亚群。根据本发明鉴定出的高风险免疫过驱动亚群患者,不仅具有显著地不良预后,而且拥有相对较高的预存免疫活性和免疫检查点丰度。对于胃癌患者队列,本发明可以鉴定出适合免疫治疗的患者类群。

    兼备抗吞噬及肿瘤靶向能力的外泌体载药系统及其制备与应用

    公开(公告)号:CN116271068A

    公开(公告)日:2023-06-23

    申请号:CN202211093429.0

    申请日:2022-09-08

    Abstract: 本发明公开了一种兼备抗吞噬及肿瘤靶向能力的外泌体载药系统及其制备与应用,肿瘤靶向基团通过融合蛋白的接头柔性连接到具有抗吞噬能力跨膜蛋白的细胞膜外侧,设计融合基因序列,插入到表达载体中,形成融合表达载体,再整合到待改造细胞的染色体中获得稳定表达融合蛋白的工程化细胞,用于分泌工程化外泌体。待改造的细胞包括裸细胞(永生化细胞系、原代细胞)、稳定表达治疗性核酸分子或蛋白的工程化细胞,前者细胞产生的外泌体可进一步包装治疗性分子治疗肿瘤,后者细胞产生的外泌体可分离纯化收集后直接用于肿瘤的治疗。本发明生产的工程化外泌体在体内的半衰期显著延长,提高治疗效果,并且在体内外显示出较强肿瘤靶向性和抗肿瘤效果。

    Imatinib耐药的KIT和PDGFRA野生型GIST细胞株及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN108642016B

    公开(公告)日:2022-02-01

    申请号:CN201810294236.9

    申请日:2018-03-30

    Inventor: 黄朝晖 冯玉阳

    Abstract: 本发明提供的Imatinib耐药的KIT和PDGFRA野生型GIST细胞株命名为GIST‑FR,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号CCTC NO:C2017111。同时本发明还提供了这一细胞株的构建方法以及该细胞株作为人胃肠道间质瘤耐药机制的探讨及其相关信号通路研究的细胞模型的用途,采用组织块培养法获取GIST原代细胞,并进行永生化,建立GIST‑F细胞系,随后对其进行Imatinib耐药诱导,建立Imatinib耐药的GIST细胞株GIST‑FR。GIST‑FR细胞已体外传代40余代,较GIST‑F细胞生长慢,对Imatinib的IC50显著增高,耐药指数为3.52(P<0.01);全外显子组测序结果显示GIST‑FR细胞KIT和PDGFRA均阴性。本发明从人GIST原代组织成功建立GIST细胞系,并进一步诱导获得其Imatinib耐药细胞,为GIST发病机制及耐药相关研究奠定了基础。

    包载miRNA-204-5p的外泌体及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN109837306A

    公开(公告)日:2019-06-04

    申请号:CN201910211056.4

    申请日:2019-03-20

    Abstract: 本发明公开了一种包载miRNA-204-5p的外泌体及其制备方法和应用,涉及生物医药技术领域,通过构建稳定过表达抑癌基因miRNA-204-5p的稳转株细胞,分离及富集包载miRNA-204-5p的外泌体,以外泌体作为miRNA-204-5p的药物传递系统,发挥其对肿瘤的治疗作用。本发明提供的包载miRNA-204-5p的外泌体,显著提高与肿瘤细胞的相容性,能够高效将miRNA-204-5p释放进入肿瘤细胞内,增加肿瘤细胞对化疗药物的敏感性,显著抑制肿瘤细胞的增殖。通过模拟体内情况,优选操作过程中使用的试剂种类、质量或者浓度等参数,在细胞内将miRNA-204-5p自然装载到外泌体中,显著提高miRNA-204-5p与外泌体在细胞内的包载效率,降低包载过程中的风险,制备的外泌体更具有稳定性、安全性和高效性。

    复合型人工小血管支架及其制备方法

    公开(公告)号:CN107715179B

    公开(公告)日:2022-08-26

    申请号:CN201711191617.6

    申请日:2017-11-24

    Abstract: 本发明涉及复合型人工小血管支架及其制备方法,包括内层和外层,内层为去细胞心内膜,外层为主动脉弹力层微米颗粒多孔支架,外层和内层间采用胶原连接。制备时首先将心内膜去细胞后采用戊二醛处理,主动脉弹力层组织研磨成颗粒后制成溶液在模具中干燥制成多孔支架,将内层材料连同轴心套入多孔支架中,向内层和外层间的空隙中注入液态胶原粘合。本发明制备方法简单,步骤易于操作,分层仿生构建小口径组织工程血管,制备出具有与正常血管相似的理化、生物力学性能并可与自身血管组织再生相匹配的可降解性小口径血管支架。

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