公开(公告)号：CN108504639A

公开(公告)日：2018-09-07

申请号：CN201810290466.8

申请日：2018-04-03

Applicant: 江南大学

Inventor： 史锋 ,  黄森 ,  李永富

IPC: C12N9/02 ,  C12N15/53 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P13/04 ,  C12P7/46

CPC classification number: C12N9/0071 ,  C12N15/70 ,  C12P7/46 ,  C12P13/04

Abstract: 本发明公开了一种异亮氨酸双加氧酶突变体及其应用，属于分子生物学的技术领域。本发明结合易错PCR技术和DNA定点突变技术，对去掉了N端2-7位六个氨基酸残基的野生型异亮氨酸双加氧酶IdoΔ6编码基因进行分子改造，得到了两个突变酶IdoΔ6N126H和IdoΔ6N126H/T130K，突变体酶与底物的亲和性为野生型的1.6～4.6倍，催化效率是野生型的2.4～2.8倍。利用突变体酶IdoΔ6N126H/T130K合成4-HIL产量提高了2.5倍，解决了在4-HIL合成过程中，酶的催化效率低的问题，为利用该酶及其编码基因来生物合成4-HIL创造好的条件。

公开(公告)号：CN108504639B

公开(公告)日：2020-12-29

申请号：CN201810290466.8

申请日：2018-04-03

Applicant: 江南大学

Inventor： 史锋 ,  黄森 ,  李永富

IPC: C12N9/02 ,  C12N15/53 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P13/04 ,  C12P7/46

Abstract: 本发明公开了一种异亮氨酸双加氧酶突变体及其应用，属于分子生物学的技术领域。本发明结合易错PCR技术和DNA定点突变技术，对去掉了N端2‑7位六个氨基酸残基的野生型异亮氨酸双加氧酶IdoΔ6编码基因进行分子改造，得到了两个突变酶IdoΔ6N126H和IdoΔ6N126H/T130K，突变体酶与底物的亲和性为野生型的1.6～4.6倍，催化效率是野生型的2.4～2.8倍。利用突变体酶IdoΔ6N126H/T130K合成4‑HIL产量提高了2.5倍，解决了在4‑HIL合成过程中，酶的催化效率低的问题，为利用该酶及其编码基因来生物合成4‑HIL创造好的条件。