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公开(公告)号：CN118028331A
公开(公告)日：2024-05-14
申请号：CN202410169341.5
申请日：2024-02-06
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一株高产只含四条脂肪酸链的类脂A(lipid IVA)的大肠杆菌，属于基因工程与生物工程技术领域。通过本发明提供的构建菌株的方法快速构建了大肠杆菌W3110△lpxLMP菌株，敲除效率达到95％以上，构建得到的菌株不带抗性标记，可以在37℃下良好生长，并仅合成只含有四条脂肪酸链的类脂A结构，产物单一，有利于分离纯化，并且可用于在大肠杆菌中快速有效地鉴定其他革兰氏阴性菌的类脂A次级酰基转移酶编码基因，并为改造类脂A结构以制备疫苗佐剂提供了底盘菌株。
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公开(公告)号：CN117305337A
公开(公告)日：2023-12-29
申请号：CN202311171027.2
申请日：2023-09-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种生产最短脂多糖分子的大肠杆菌与应用，属于基因工程与生物工程技术领域。本发明在大肠杆菌W3110中敲除了基因组上编码Kdo转移酶的基因waaA，在低温培养下使得该菌株能够存活，此外，通过多次传代培养，丢失敲除质粒，再进行抗性基因的敲除。该菌株能合成最短结构的脂多糖，且无需过表达其他基因，无需添加任何诱导剂或抗生素就能在LB液体培养基中正常生长。本发明还提供了一种利用该重组菌株鉴定其他菌株来源的编码Kdo转移酶基因的方法。
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公开(公告)号：CN118108777A
公开(公告)日：2024-05-31
申请号：CN202410169334.5
申请日：2024-02-06
Applicant: 江南大学
IPC: C07H13/06 , C07H1/06 , C12N1/21 , C12N15/70 , C12N15/54 , C12P19/26 , A61K39/39 , A61P37/04 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种合成以3‑羟基肉豆蔻酸为次级脂肪酸链的类脂A的重组大肠杆菌，属于基因工程与合成生物学领域。本发明采用了非致病菌大肠杆菌W3110，通过敲除基因组上lpxL基因、lpxM基因、lpxM基因和waaA基因，并过表达副溶血弧菌VP_RS12170，制备得到可以直接生产以3‑羟基肉豆蔻酸为次级脂肪酸链的类脂A的大肠杆菌基因工程菌，经过鉴定以3‑羟基肉豆蔻酸为次级脂肪酸链的类脂A为一种新型类脂A，本发明拓宽了类脂A应用范围。
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公开(公告)号：CN117343949A
公开(公告)日：2024-01-05
申请号：CN202311171041.2
申请日：2023-09-12
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/74 , C12N15/54 , C12N1/21 , C12P7/64 , G01N30/02 , G01N30/72 , G01N30/90 , C07H13/04 , C07H1/06 , C12R1/63
Abstract: 本发明公开了一株只合成游离型的类脂A的副溶血弧菌，属于基因工程与生物工程技术领域。本发明通过同源比对，确定了副溶血弧菌ATCC33846的Kdo转移酶基因VP_RS01035，利用同源重组方法，在低温、低抗生素浓度下成功实现对副溶血弧菌染色体上基因VP_RS01035的删除，得到了副溶血弧菌VP_RS01035基因缺失株。该菌株在低温下可以生长，并只合成游离类脂A。本发明还公开了对上述菌株游离类脂A进行提取与分析鉴定的方法。
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公开(公告)号：CN118028330A
公开(公告)日：2024-05-14
申请号：CN202410169337.9
申请日：2024-02-06
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了两株高产含五条脂肪酸链的类脂A的大肠杆菌，属于生物工程与基因工程技术领域。本发明通过敲除lpxL或lpxM基因，提供两株能高效生产五酰化类脂A的基因工程菌，在保持类脂A结构单一准确的同时没有引入任何抗性标记，且菌株能在37℃下具有良好的生长状态，利于大规模工业化生产。此外，还可以用于鉴定其他菌株来源的编码类脂A次级酰基转移酶的基因，也可以作为底盘菌株进行类脂A结构的进一步改造以制备毒性较弱的疫苗佐剂。
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