公开(公告)号：CN104109658B

公开(公告)日：2016-06-29

申请号：CN201410359141.2

申请日：2014-07-25

Applicant: 江南大学

Inventor： 陈坚 ,  堵国成 ,  康振 ,  钱俊佳 ,  戴俊

IPC: C12N9/14 ,  C12N15/55 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种肌酸水解酶及其编码基因和应用，属于生物医疗诊断技术领域。本发明提供的肌酸水解酶基因核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，通过构建重组质粒pET20b-cre，该基因工程菌为将重组质粒转化入大肠杆菌E.coliBL21，得到高效表达肌酸水解酶的基因工程菌，应用该菌种可实现肌酸水解酶的高效生产。本发明中工程菌的成功构建为降低肌酸水解酶的生产成本和扩大应用范围奠定基础。

公开(公告)号：CN104109658A

公开(公告)日：2014-10-22

申请号：CN201410359141.2

申请日：2014-07-25

Applicant: 江南大学

Inventor： 陈坚 ,  堵国成 ,  康振 ,  钱俊佳 ,  戴俊

IPC: C12N9/14 ,  C12N15/55 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

CPC classification number: C12N9/78 ,  C12N15/70 ,  C12Y305/03003

Abstract: 本发明公开了一种肌酸水解酶及其编码基因和应用，属于生物医疗诊断技术领域。本发明提供的肌酸水解酶基因核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，通过构建重组质粒pET20b-cre，该基因工程菌为将重组质粒转化入大肠杆菌E.coliBL21，得到高效表达肌酸水解酶的基因工程菌，应用该菌种可实现肌酸水解酶的高效生产。本发明中工程菌的成功构建为降低肌酸水解酶的生产成本和扩大应用范围奠定基础。

公开(公告)号：CN104004671A

公开(公告)日：2014-08-27

申请号：CN201410202050.8

申请日：2014-05-13

Applicant: 江南大学 ,  希森美康生物科技(无锡)有限公司

Inventor： 陈坚 ,  堵国成 ,  康振 ,  钱俊佳 ,  邱玲

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/81 ,  C12P21/02 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明公开了一种表达乙肝表面抗原的酿酒酵母工程菌及其构建方法和应用，属于基因工程技术领域。本发明采用重组DNA技术将乙肝表面抗原编码基因HBsAg及酿酒酵母的蛋白二硫键异构酶基因pdi克隆到酿酒酵母表达载体pTEF1，分别构建共表达重组质粒及融合表达重组质粒，并转化Saccharomyces cerevisiae INVscI，共表达及融合表达PDI均能有效促进HBsAg的表达，且融合表达方式优于共表达。所获得融合表达PDI的重组酵母菌INVscI/p-pdiLsAg表达的HBsAg活性达84.50IU/g干重，较初始菌INVscI/p-sAg(9.66IU/g干重)提高了7.75倍。这为后续重组酵母乙肝表面抗原的表达及优化研究奠定了一定的理论基础。