公开(公告)号：CN109852650B

公开(公告)日：2020-12-01

申请号：CN201811547731.2

申请日：2018-12-18

Applicant: 江南大学

Inventor： 周哲敏 ,  崔文璟 ,  闫勤 ,  缪胜男 ,  周丽 ,  刘中美 ,  杨婷尧

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/63 ,  C12N1/21 ,  C12N9/24 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明公开了一种由茶碱调控的人工适体酶及应用，属于基因工程技术领域。本发明采用茶碱适体域融合核酶的方式，得到了一种可调控外源蛋白表达的调控元件。该调控元件PAZSDE1‑BG8可以在枯草芽孢杆菌中调控外源基因的表达。当以绿色荧光蛋白基因为目的基因时，可以使荧光强度提高7.23倍；当以普鲁兰酶基因为目的基因时，加入4mM茶碱溶液，可以使普鲁兰酶的酶活从0.30886U/mL提高到6.07431U/mL。该过程中不需要其他蛋白因子的参与，能够有效快速地实现基因调控。

公开(公告)号：CN109852650A

公开(公告)日：2019-06-07

申请号：CN201811547731.2

申请日：2018-12-18

Applicant: 江南大学

Inventor： 周哲敏 ,  崔文璟 ,  缪胜男 ,  周丽 ,  刘中美 ,  杨婷尧

IPC: C12P21/00 ,  C12N15/113 ,  C12N1/21 ,  C12N9/24 ,  C12N15/75 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明公开了一种由茶碱调控的人工适体酶及应用，属于基因工程技术领域。本发明采用茶碱适体域融合核酶的方式，得到了一种可调控外源蛋白表达的调控元件。该调控元件PAZSDE1-BG8可以在枯草芽孢杆菌中调控外源基因的表达。当以绿色荧光蛋白基因为目的基因时，可以使荧光强度提高7.23倍；当以普鲁兰酶基因为目的基因时，加入4mM茶碱溶液，可以使普鲁兰酶的酶活从0.30886U/mL提高到6.07431U/mL。该过程中不需要其他蛋白因子的参与，能够有效快速地实现基因调控。

公开(公告)号：CN107058316A

公开(公告)日：2017-08-18

申请号：CN201611126601.2

申请日：2016-12-09

Applicant: 江南大学

Inventor： 周哲敏 ,  程锦涛 ,  崔文璟 ,  韩来闯 ,  缪胜男 ,  姚远

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/75 ,  C12N1/21 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明公开了一种枯草芽孢杆菌自诱导表达系统及其应用，属于启动子工程领域。本发明通过对启动子srfA的理性设计，将该启动子的核心区‑35区和‑10区突变为保守区，得到了一些比较强的启动子，以绿色荧光蛋白GFP为报告基因，突变后的启动子的最高表达量较原始启动子提高了150％。随后又进行了氨肽酶AP和纳豆激酶NK的表达，其突变体表达量较原始相比，分别提高了360％和50％。本发明方法与随机突变相比，极大减少工作量而且有效，与此同时将此策略运用于其他启动子改造，改造后的启动子表达目的基因的能力也有很大提高。