公开(公告)号：CN104894218B

公开(公告)日：2018-09-28

申请号：CN201510254026.3

申请日：2015-05-18

Applicant: 江南大学

Inventor： 张震宇 ,  王金霞 ,  孙付保 ,  丁灿灿

IPC: C12Q1/10

Abstract: 本发明公开了利用单菌落琼脂块筛选产反式‑4‑羟脯氨酸重组大肠杆菌的方法。该方法采用重组大肠杆菌为出发菌株，经诱变后，涂布到所设计的平板上，培养至有大小合适的菌落长出；用不锈钢打孔器将菌落依次打成圆形的琼脂块，用镊子夹取琼脂块放置于可吸附性材料上，待其干燥；加试剂①不同氨基酸显示不同颜色；点加试剂②后只有L‑羟脯氨酸颜色变为玫红色，其他氨基酸褪色。据显色圈与菌落直径之比，以及显色圈深浅，筛选产反式‑4‑羟脯氨酸的菌株。本发明的优点是提供了一种以固体培养方式，利用单菌落琼脂块法方便快速的筛选出高产菌株，使筛选具有一定的定向性，大大减少了筛选菌株工作量。

公开(公告)号：CN104894218A

公开(公告)日：2015-09-09

申请号：CN201510254026.3

申请日：2015-05-18

Applicant: 江南大学

Inventor： 张震宇 ,  王金霞 ,  孙付保 ,  丁灿灿

IPC: C12Q1/10

Abstract: 本发明公开了利用单菌落琼脂块筛选产反式-4-羟脯氨酸重组大肠杆菌的方法。该方法采用重组大肠杆菌为出发菌株，经诱变后，涂布到所设计的平板上，培养至有大小合适的菌落长出；用不锈钢打孔器将菌落依次打成圆形的琼脂块，用镊子夹取琼脂块放置于可吸附性材料上，待其干燥；加试剂①不同氨基酸显示不同颜色；点加试剂②后只有L-羟脯氨酸颜色变为玫红色，其他氨基酸褪色。据显色圈与菌落直径之比，以及显色圈深浅，筛选产反式-4-羟脯氨酸的菌株。本发明的优点是提供了一种以固体培养方式，利用单菌落琼脂块法方便快速的筛选出高产菌株，使筛选具有一定的定向性，大大减少了筛选菌株工作量。