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公开(公告)号：CN112322514A
公开(公告)日：2021-02-05
申请号：CN202011251954.1
申请日：2020-11-09
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种增强产甘油假丝酵母2‑苯乙醇耐受性及产量的方法，属于基因工程技术领域。本发明通过在产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes)CCTCC M 93018中过表达了来源于自身的磷脂合成途径中的1‑酰基‑sn‑甘油‑3‑磷酸酰基转移酶基因SLC1，获得重组菌株CgSLC1。与空载对照菌株相比，重组菌株在高浓度2‑苯乙醇(3.5g/L)的外界环境下具有较明显的生长优势，其菌体生物量提高了18.3％。且在发酵培养基中，重组菌株的菌体生物量及2‑苯乙醇的产量得到增强，分别提高了18.0％和21.6％，产量达到4.07g/L。
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公开(公告)号：CN112322514B
公开(公告)日：2022-03-25
申请号：CN202011251954.1
申请日：2020-11-09
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种增强产甘油假丝酵母2‑苯乙醇耐受性及产量的方法，属于基因工程技术领域。本发明通过在产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes)CCTCC M 93018中过表达了来源于自身的磷脂合成途径中的1‑酰基‑sn‑甘油‑3‑磷酸酰基转移酶基因SLC1，获得重组菌株CgSLC1。与空载对照菌株相比，重组菌株在高浓度2‑苯乙醇(3.5g/L)的外界环境下具有较明显的生长优势，其菌体生物量提高了18.3％。且在发酵培养基中，重组菌株的菌体生物量及2‑苯乙醇的产量得到增强，分别提高了18.0％和21.6％，产量达到4.07g/L。
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公开(公告)号：CN105713933B
公开(公告)日：2019-03-01
申请号：CN201610256845.6
申请日：2016-04-22
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种2‑苯乙醇的生物制备方法。即选取耐高渗透压的产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes CCTCC M 93018)转化L‑苯丙氨酸发酵生产2‑苯乙醇。该酵母对2‑苯乙醇的耐受性可达4g/L，有效克服了2‑苯乙醇对宿主生产菌的生长抑制，2‑苯乙醇的产量达到5g/L、转化率达到0.71(g/g)。本发明的制备方法具有操作方便、转化效率高、生产成本低、工业化应用前景广等特点。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN107723300A
公开(公告)日：2018-02-23
申请号：CN201711220429.1
申请日：2017-11-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明属于基因工程领域，具体涉及CgGsh1基因的克隆及利用该基因在产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes CCTCC M 93018)中的过表达，获得2-苯乙醇耐受性及产量均提高的产甘油假丝酵母重组菌株。方法是，利用如SEQ ID No.2和3所示的引物扩增产甘油假丝酵母基因组DNA片段，确定该扩增的DNA片段序列与酿酒酵母Gsh1基因为同源性序列，命名为CgGsh1，其核苷酸序列如序列表SEQ ID No.1所示。利用CgGsh1基因与GAP强启动子构建了过表达重组载体pGAPa-CgGsh1，通过化学转化法将该重组载体导入尿嘧啶营养缺陷型产甘油假丝酵母中，获得重组菌株。与空载对照菌株相比，重组菌株在高浓度2-苯乙醇(4g/L)外界环境下具有较明显的生长优势。且在发酵结束时，重组菌株的生长量提高了8.0％，2-苯乙醇的产量提高了9.1％，达到3.6g/L。
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公开(公告)号：CN107723300B
公开(公告)日：2020-08-04
申请号：CN201711220429.1
申请日：2017-11-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明属于基因工程领域，具体涉及CgGsh1基因的克隆及利用该基因在产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes CCTCC M 93018)中的过表达，获得2‑苯乙醇耐受性及产量均提高的产甘油假丝酵母重组菌株。方法是，利用如SEQ ID No.2和3所示的引物扩增产甘油假丝酵母基因组DNA片段，确定该扩增的DNA片段序列与酿酒酵母Gsh1基因为同源性序列，命名为CgGsh1，其核苷酸序列如序列表SEQ ID No.1所示。利用CgGsh1基因与GAP强启动子构建了过表达重组载体pGAPa‑CgGsh1，通过化学转化法将该重组载体导入尿嘧啶营养缺陷型产甘油假丝酵母中，获得重组菌株。与空载对照菌株相比，重组菌株在高浓度2‑苯乙醇(4g/L)外界环境下具有较明显的生长优势。且在发酵结束时，重组菌株的生长量提高了8.0％，2‑苯乙醇的产量提高了9.1％，达到3.6g/L。
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公开(公告)号：CN107365715A
公开(公告)日：2017-11-21
申请号：CN201710702750.7
申请日：2017-08-16
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12P7/22 , C12N9/0008 , C12N15/815 , C12Y102/0101 , C12Y102/99003 , C12Y102/99007
Abstract: 本发明公开了一种高产2-苯乙醇的产甘油假丝酵母工程菌的制备方法及应用，属于基因工程技术领域。产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes CCTCC M 93018)是一株二倍体菌株，与单倍体菌株相比具有生长速度快，生活能力强，遗传稳定，防止致死或有害突变的优势。同时产甘油假丝酵母作为一株优良的2-苯乙醇生产菌株，且拥有耐受高浓度2-苯乙醇(4g/L)的特性为菌株的代谢改造提供了有利的基础。本发明利用基因敲除技术，敲除了二倍体产甘油假丝酵母菌株2-苯乙醇合成竞争途径的乙醛脱氢酶基因ALD3。与原始的产甘油假丝酵母菌株相比，ALD3敲除突变菌株2-苯乙醇产量提高了18.5％，达到3.65g/L。
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公开(公告)号：CN105713933A
公开(公告)日：2016-06-29
申请号：CN201610256845.6
申请日：2016-04-22
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12P7/22
Abstract: 本发明公开了一种2?苯乙醇的生物制备方法。即选取耐高渗透压的产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes CCTCC M 93018)转化L?苯丙氨酸发酵生产2?苯乙醇。该酵母对2?苯乙醇的耐受性可达4g/L，有效克服了2?苯乙醇对宿主生产菌的生长抑制，2?苯乙醇的产量达到5g/L、转化率达到0.71(g/g)。本发明的制备方法具有操作方便、转化效率高、生产成本低、工业化应用前景广等特点。
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公开(公告)号：CN110079468A
公开(公告)日：2019-08-02
申请号：CN201910384299.8
申请日：2019-05-09
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种增强产甘油假丝酵母2-苯乙醇耐受性的方法，属于基因工程技术领域。本发明通过在产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes CCTCC M 93018)中过表达了来源于自身的麦角固醇合成途径中的C-24(28)还原酶基因erg4，获得重组菌株Cgerg4。与空载对照菌株相比，重组菌株在高浓度2-苯乙醇(3.5g/L)的外界环境下具有较明显的生长优势，其菌体干重提高了103％。且在发酵培养基中，重组菌株的菌体干重及2-苯乙醇的产量得到增强，分别提高了12％和16％，2-苯乙醇产量达到3.89g/L。
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