公开(公告)号：CN102191203B

公开(公告)日：2012-09-05

申请号：CN201110091892.7

申请日：2011-04-13

Applicant: 江南大学

Inventor： 丁重阳 ,  王博达 ,  丁明亮 ,  王迎娜 ,  王望斐 ,  肖思维 ,  欧阳安然 ,  顾正华 ,  张梁 ,  石贵阳

IPC: C12N1/20 ,  C12N9/54 ,  C12R1/07

Abstract: 一株解淀粉芽孢杆菌及用该菌株发酵生产凝乳酶的方法，属于微生物发酵技术领域。本发明公开了一株产凝乳酶的菌株，命名为解淀粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliquefacines）JNU002，已在中国典型培养物保藏中心保藏，保藏编号为CCTCCNO：M2011045。应用该菌株通过液体发酵生产凝乳酶，步骤为（1）斜面培养；（2）种子培养；（3）液体发酵培养：将培养好的种子接入发酵培养基中，接种量为0.1%~0.2%，在32~36℃培养60~72h。本发明的有益效果：利用解淀粉芽孢杆菌CCTCCNO：M2011045液体发酵生产凝乳酶具有产酶水平高，发酵时间短，易于控制生长条件等诸多优点，完全适合工业化生产的应用。

公开(公告)号：CN103211035B

公开(公告)日：2014-11-05

申请号：CN201310125662.7

申请日：2013-04-12

Applicant: 江南大学

Inventor： 丁明亮 ,  王博达 ,  王楠 ,  王清伟 ,  丁重阳 ,  顾正华 ,  张梁 ,  石贵阳

IPC: A23C19/032

Abstract: 本发明公开一种液态型凝乳酶制剂的制备方法。包括以下步骤：（1）以解淀粉芽孢杆菌CCTCCNO：M2011045或枯草芽孢杆菌CCTCCNO：M2010259为发酵菌株制备发酵液；（2）板框压滤，固液分离；（3）蒙脱石吸附；（4）微滤；（5）超滤浓缩；（6）向浓缩酶液中添加终浓度20~40%（w/v）的蔗糖或海藻糖，终浓度10~30%（w/v）的甘油或山梨醇以及终浓度0.01~0.05%（w/v）的氯化钙，混匀，制得成品。本发明方法凝乳酶活力回收率高，同时能有效去除酶液中的蛋白酶等杂质和残留菌体，所制酶制剂具有良好的品质和稳定性，酶专一性强，保存期长，安全无毒。

公开(公告)号：CN102517269B

公开(公告)日：2014-02-19

申请号：CN201110420007.5

申请日：2011-12-15

Applicant: 江南大学

Inventor： 丁重阳 ,  丁明亮 ,  王博达 ,  顾正华 ,  张梁 ,  石贵阳

IPC: C12N9/64 ,  C12R1/07

Abstract: 一种基于两阶段溶氧控制策略生产凝乳酶的方法，属于微生物发酵技术领域。本发明采用解淀粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliquefacines）CCTCCNO：M2011045为生产菌株，所用发酵培养基以克/升计为：葡萄糖5-20，麸皮10-30，氯化钠6，七水硫酸镁4.5，磷酸二氢钾1，碳酸钙3，用自来水配制，pH值自然，121℃灭菌30min；在发酵第一阶段（0-16h）将氧体积传质系数（KLa）控制在72.2h-1，发酵第二阶段（16h以后），将氧体积传质系数（KLa）控制在33.9h-1。采用本发明提供的方法，可以有效的提高解淀粉芽孢杆菌发酵产酶水平，缩短发酵时间18小时以上，同时也为在实际的工业放大过程中提供了一种更为有效的方法。

公开(公告)号：CN102517269A

公开(公告)日：2012-06-27

申请号：CN201110420007.5

申请日：2011-12-15

Applicant: 江南大学

Inventor： 丁重阳 ,  丁明亮 ,  王博达 ,  顾正华 ,  张梁 ,  石贵阳

IPC: C12N9/64 ,  C12R1/07

Abstract: 一种基于两阶段溶氧控制策略生产凝乳酶的方法，属于微生物发酵技术领域。本发明采用解淀粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliquefacines）CCTCCNO：M2011045为生产菌株，所用发酵培养基以克/升计为：葡萄糖5-20，麸皮10-30，氯化钠6，七水硫酸镁4.5，磷酸二氢钾1，碳酸钙3，用自来水配制，pH值自然，121℃灭菌30min；在发酵第一阶段（0-16h）将氧体积传质系数（KLa）控制在72.2h-1，发酵第二阶段（16h以后），将氧体积传质系数（KLa）控制在33.9h-1。采用本发明提供的方法，可以有效的提高解淀粉芽孢杆菌发酵产酶水平，缩短发酵时间18小时以上，同时也为在实际的工业放大过程中提供了一种更为有效的方法。

公开(公告)号：CN103211035A

公开(公告)日：2013-07-24

申请号：CN201310125662.7

申请日：2013-04-12

Applicant: 江南大学

Inventor： 丁明亮 ,  王博达 ,  王楠 ,  王清伟 ,  丁重阳 ,  顾正华 ,  张梁 ,  石贵阳

IPC: A23C19/032

Abstract: 本发明公开一种液态型凝乳酶制剂的制备方法。包括以下步骤：（1）以解淀粉芽孢杆菌CCTCC NO：M2011045或枯草芽孢杆菌CCTCC NO：M2010259为发酵菌株制备发酵液；（2）板框压滤，固液分离；（3）蒙脱石吸附；（4）微滤；（5）超滤浓缩；（6）向浓缩酶液中添加终浓度20～40%（w/v）的蔗糖或海藻糖，终浓度10～30%（w/v）的甘油或山梨醇以及终浓度0.01～0.05%（w/v）的氯化钙，混匀，制得成品。本发明方法凝乳酶活力回收率高，同时能有效去除酶液中的蛋白酶等杂质和残留菌体，所制酶制剂具有良好的品质和稳定性，酶专一性强，保存期长，安全无毒。

公开(公告)号：CN102191203A

公开(公告)日：2011-09-21

申请号：CN201110091892.7

申请日：2011-04-13

Applicant: 江南大学

Inventor： 丁重阳 ,  王博达 ,  丁明亮 ,  王迎娜 ,  王望斐 ,  肖思维 ,  欧阳安然 ,  顾正华 ,  张梁 ,  石贵阳

IPC: C12N1/20 ,  C12N9/54 ,  C12R1/07

Abstract: 一株解淀粉芽孢杆菌及用该菌株发酵生产凝乳酶的方法，属于微生物发酵技术领域。本发明公开了一株产凝乳酶的菌株，命名为解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefacines）JNU002，已在中国典型培养物保藏中心保藏，保藏编号为CCTCC NO：M2011045。应用该菌株通过液体发酵生产凝乳酶，步骤为（1）斜面培养；（2）种子培养；（3）液体发酵培养：将培养好的种子接入发酵培养基中，接种量为0.1%~0.2%，在32~36℃培养60~72h。本发明的有益效果：利用解淀粉芽孢杆菌CCTCC NO：M2011045液体发酵生产凝乳酶具有产酶水平高，发酵时间短，易于控制生长条件等诸多优点，完全适合工业化生产的应用。