公开(公告)号：CN116019063B

公开(公告)日：2025-04-29

申请号：CN202211296862.4

申请日：2022-10-21

Applicant: 江南大学

Inventor： 庞庆丰 ,  吴亚先 ,  高智琦 ,  陈丹 ,  张艳丽 ,  李胜朋 ,  满凌云

IPC: C12N15/90 ,  C12N15/12 ,  C12N15/85 ,  C12N15/113 ,  A61K49/00 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明公开了一种小鼠条件性诱导Hmox1基因敲除模型的构建方法及应用，属于生物技术领域。本发明提供的小鼠条件性诱导Hmox1基因敲除模型由以下步骤构建：构建同源重组DNA载体；通过体外转录获得Cas9mRNA和针对Hmox1基因的gRNA；将同源重组DNA载体、Cas9mRNA和gRNA注射到小鼠的受精卵中；培育获得条件性基因敲除小鼠；通过测序和核酸胶电泳鉴定基因型；得到的条件性敲除小鼠与其他组织特异性表达Cre的小鼠杂交获得相应组织或细胞条件性敲除小鼠，从而实现特定组织或细胞类型的精准研究；并且证明Hmox1诱导性条件性敲除明显加重急性肺损伤。本发明能够克服现有技术中Hmox1全身基因敲除小鼠胚胎致死，无法构建小鼠模型的困难，辅助Hmox1在疾病中的研究。

公开(公告)号：CN116019063A

公开(公告)日：2023-04-28

申请号：CN202211296862.4

申请日：2022-10-21

Applicant: 江南大学

Inventor： 庞庆丰 ,  吴亚先 ,  高智琦 ,  陈丹 ,  张艳丽 ,  李胜朋 ,  满凌云

IPC: A01K67/027 ,  C12N15/12 ,  C12N15/85 ,  C12N15/90 ,  C12N15/113 ,  A61K49/00

Abstract: 本发明公开了一种小鼠条件性诱导Hmox1基因敲除模型的构建方法及应用，属于生物技术领域。本发明提供的小鼠条件性诱导Hmox1基因敲除模型由以下步骤构建：构建同源重组DNA载体；通过体外转录获得Cas9mRNA和针对Hmox1基因的gRNA；将同源重组DNA载体、Cas9mRNA和gRNA注射到小鼠的受精卵中；培育获得条件性基因敲除小鼠；通过测序和核酸胶电泳鉴定基因型；得到的条件性敲除小鼠与其他组织特异性表达Cre的小鼠杂交获得相应组织或细胞条件性敲除小鼠，从而实现特定组织或细胞类型的精准研究；并且证明Hmox1诱导性条件性敲除明显加重急性肺损伤。本发明能够克服现有技术中Hmox1全身基因敲除小鼠胚胎致死，无法构建小鼠模型的困难，辅助Hmox1在疾病中的研究。