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公开(公告)号:CN110734889B
公开(公告)日:2021-07-27
申请号:CN201911092950.0
申请日:2019-11-11
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/70 , C12N15/90 , C12N15/61 , C12N15/60 , C12N15/54 , C12N15/53 , C12P19/32 , C12R1/19
Abstract: 本发明提供了一种高效生产GDP‑岩藻糖的大肠杆菌生产菌株,属于基因工程、微生物代谢工程技术领域。本发明以葡萄糖为底物,通过组合调控代谢通路中的磷酸甘露糖变位酶(ManB)、GDP‑甘露糖焦磷酸化酶(ManC)、GDP‑甘露糖4,6‑脱水酶(Gmd)和GDP‑岩藻糖合成酶(WcaG)的表达从而缓解GDP‑岩藻糖合成通路的代谢压力。本发明还通过CRISPR/Cas9基因编辑系统敲除大肠杆菌中分解GDP‑岩藻糖的基因UDP‑葡萄糖脂质载体转移酶(WcaJ)以及加强代谢通路中的辅因子的再生进一步提高胞内GDP‑岩藻糖的积累。
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公开(公告)号:CN110804577B
公开(公告)日:2021-05-28
申请号:CN201911188891.7
申请日:2019-11-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种生产2’‑岩藻糖基乳糖的大肠杆菌工程菌株,通过CRISPR/Cas9基因编辑系统,敲除原始菌株2’‑岩藻糖基乳糖合成代谢途径中的相关基因;构建模块化代谢通路,通过不同质粒组合调控代谢途径中的磷酸甘露糖变位酶(ManB),甘露糖‑1‑磷酸鸟嘌呤基转移酶(ManC),GDP‑甘露糖‑6‑脱氢酶(Gmd),GDP‑岩藻糖合成酶(WcaG),L‑岩藻糖1‑激酶/GDP‑岩藻糖焦磷酸化酶(Fkp)以及2’‑岩藻糖基乳糖合成酶(FucT2)的表达水平,使细胞内能积累更高浓度的2’‑岩藻糖基乳糖。本发明还提供了一种高效生产2’‑岩藻糖基乳糖的方法。
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公开(公告)号:CN110804577A
公开(公告)日:2020-02-18
申请号:CN201911188891.7
申请日:2019-11-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种生产2’-岩藻糖基乳糖的大肠杆菌工程菌株,通过CRISPR/Cas9基因编辑系统,敲除原始菌株2’-岩藻糖基乳糖合成代谢途径中的相关基因;构建模块化代谢通路,通过不同质粒组合调控代谢途径中的磷酸甘露糖变位酶(ManB),甘露糖-1-磷酸鸟嘌呤基转移酶(ManC),GDP-甘露糖-6-脱氢酶(Gmd),GDP-岩藻糖合成酶(WcaG),L-岩藻糖1-激酶/GDP-岩藻糖焦磷酸化酶(Fkp)以及2’-岩藻糖基乳糖合成酶(FucT2)的表达水平,使细胞内能积累更高浓度的2’-岩藻糖基乳糖。本发明还提供了一种高效生产2’-岩藻糖基乳糖的方法。
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公开(公告)号:CN110734889A
公开(公告)日:2020-01-31
申请号:CN201911092950.0
申请日:2019-11-11
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/70 , C12N15/90 , C12N15/61 , C12N15/60 , C12N15/54 , C12N15/53 , C12P19/32 , C12R1/19
Abstract: 本发明提供了一种高效生产GDP-岩藻糖的大肠杆菌生产菌株,属于基因工程、微生物代谢工程技术领域。本发明以葡萄糖为底物,通过组合调控代谢通路中的磷酸甘露糖变位酶(ManB)、GDP-甘露糖焦磷酸化酶(ManC)、GDP-甘露糖4,6-脱水酶(Gmd)和GDP-岩藻糖合成酶(WcaG)的表达从而缓解GDP-岩藻糖合成通路的代谢压力。本发明还通过CRISPR/Cas9基因编辑系统敲除大肠杆菌中分解GDP-岩藻糖的基因UDP-葡萄糖脂质载体转移酶(WcaJ)以及加强代谢通路中的辅因子的再生进一步提高胞内GDP-岩藻糖的积累。
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