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公开(公告)号：CN113881611B
公开(公告)日：2022-12-13
申请号：CN202110140365.4
申请日：2021-02-02
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高谷氨酸棒杆菌合成L‑谷氨酸产量的方法，属于生物工程技术领域。本发明成功实现了敲除转录调控因子Ncgl1124和过量表达转录调控因子Ncgl1124的重组谷氨酸棒杆菌的构建。通过纯化出蛋白Ncgl1124，通过体外EMSA试验验证了转录调控因子Ncgl1124能够与启动子PGlnA结合。通过5‑L发酵罐流加发酵培养，重组谷氨酸棒杆菌G01/p19‑Ncgl1124的L‑谷氨酸产量相对于对照菌株谷氨酸棒杆菌G01提高了22％，产量达到了165.3g/L；谷氨酰胺水平为1.6g/L，下降了90％。说明本发明公开的转录调控因子Ncgl1124能够通过与启动子PGlnA结合，进而抑制谷氨酸向谷氨酰胺的分解途径，从而提高L‑谷氨酸的含量。
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公开(公告)号：CN115074304B
公开(公告)日：2023-08-22
申请号：CN202210768607.9
申请日：2022-06-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种谷氨酸棒杆菌高效突变体及重组菌构建方法与应用，属于基因工程和诱变技术领域，基于筛选来源于C.glutamicum自身DNA复制过程中的DNA聚合酶，得到高度保守性的ExoI区域，并通过定点突变解除DNA聚合酶的校对、修复功能，提高突变率。基于筛选得到的DNA聚合酶突变体，逐步串联组装尿嘧啶DNA糖基化酶抑制剂UGI、胞嘧啶脱氨酶pmCDA1和腺嘌呤脱氨酶TadA‑ABE8e，构建一系列突变质粒MPs，该突变体在C.glutamicum中实现高效的突变率以及广泛的突变谱，且突变过程绿色、健康，没有有毒有害的物质参与，本发明构建的谷氨酸棒杆菌高效突变体系，可用于筛选高产谷氨酸底盘细胞，也为应用于其他氨基酸生产提供了重要借鉴。
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公开(公告)号：CN115074304A
公开(公告)日：2022-09-20
申请号：CN202210768607.9
申请日：2022-06-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种谷氨酸棒杆菌高效突变体及重组菌构建方法与应用，属于基因工程和诱变技术领域，基于筛选来源于C.glutamicum自身DNA复制过程中的DNA聚合酶，得到高度保守性的ExoI区域，并通过定点突变解除DNA聚合酶的校对、修复功能，提高突变率。基于筛选得到的DNA聚合酶突变体，逐步串联组装尿嘧啶DNA糖基化酶抑制剂UGI、胞嘧啶脱氨酶pmCDA1和腺嘌呤脱氨酶TadA‑ABE8e，构建一系列突变质粒MPs，该突变体在C.glutamicum中实现高效的突变率以及广泛的突变谱，且突变过程绿色、健康，没有有毒有害的物质参与，本发明构建的谷氨酸棒杆菌高效突变体系，可用于筛选高产谷氨酸底盘细胞，也为应用于其他氨基酸生产提供了重要借鉴。
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公开(公告)号：CN113881611A
公开(公告)日：2022-01-04
申请号：CN202110140365.4
申请日：2021-02-02
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高谷氨酸棒杆菌合成L‑谷氨酸产量的方法，属于生物工程技术领域。本发明成功实现了敲除转录调控因子Ncgl1124和过量表达转录调控因子Ncgl1124的重组谷氨酸棒杆菌的构建。通过纯化出蛋白Ncgl1124，通过体外EMSA试验验证了转录调控因子Ncgl1124能够与启动子PGlnA结合。通过5‑L发酵罐流加发酵培养，重组谷氨酸棒杆菌G01/p19‑Ncgl1124的L‑谷氨酸产量相对于对照菌株谷氨酸棒杆菌G01提高了22％，产量达到了165.3g/L；谷氨酰胺水平为1.6g/L，下降了90％。说明本发明公开的转录调控因子Ncgl1124能够通过与启动子PGlnA结合，进而抑制谷氨酸向谷氨酰胺的分解途径，从而提高L‑谷氨酸的含量。
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