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公开(公告)号：CN117535274A
公开(公告)日：2024-02-09
申请号：CN202211317949.5
申请日：2022-10-26
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种精氨酸脱羧酶AdiA突变体及其在丁二胺生产中的应用，属于生物工程领域。将大肠杆菌中的精氨酸脱羧酶编码基因进行定点突变，获得5种有效突变体，具体包括：将第102位的天冬氨酸分别突变为组氨酸或精氨酸或赖氨酸，或将第467位的谷氨酸分别突变为组氨酸或赖氨酸。其中突变体467K在pH7.0时的相对酶活由原来的2.6U·g‑1提高至8.3U·g‑1，在中性pH范围的酶活稳定性显著提高。将精氨酸脱羧酶突变体467K应用于大肠杆菌的丁二胺生产中，丁二胺产量达到57.5g/L，精氨酸摩尔转化率达到0.95mol·mol‑1，相较于对照菌株提高了28％。本发明提高了精氨酸脱羧酶在中性环境中的转化效率，提高了丁二胺在中性环境中的合成速度，为丁二胺的高效合成奠定了基础。
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公开(公告)号：CN117535213A
公开(公告)日：2024-02-09
申请号：CN202211085903.5
申请日：2022-09-06
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高效的丁二胺生物合成方法，属于生物工程领域。本发明的方法利用重组质粒过表达大肠杆菌丁二胺精氨酸脱羧酶途径关键酶基因，提高精氨酸至丁二胺的转化效率。进一步删除丁二胺降解途径相关的基因和丁二胺胞内转运蛋白基因，解决了丁二胺在合成后易被菌体自身利用降解的问题，增加了丁二胺的积累，实现了丁二胺的高效生物合成，最终实现了72h丁二胺的产量达到11.1g·L‑1，摩尔转化率达到1.0mol/mol。本发明提供的方法经济环保，操作简单，极具发展前景。
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公开(公告)号：CN116804168A
公开(公告)日：2023-09-26
申请号：CN202210258248.2
申请日：2022-03-16
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种钝齿棒杆菌与大肠杆菌共发酵生产丁二胺的方法，属于微生物发酵技术领域。本发明提供的方法为：(1)制备钝齿棒杆菌CGMCC NO.0890活化种子液；(2)制备过表达精氨酸脱羧酶和胍基丁胺酶的重组大肠杆菌活化种子液；(3)共发酵：将钝齿棒杆菌种子液按体积比4～10％的接种量接种至共发酵培养基，于温度为25～40℃，转速为100～130r/min的条件下振荡培养72‑120h；再按一定比例转接至含有一定量重组大肠杆菌种子液的5L发酵罐中，于一定条件下继续发酵培养24‑120h，结束发酵，即得含丁二胺的发酵液。本发明共培养液体发酵工艺可显著提高丁二胺的生产效率，降低生产成本，符合产业化发展需求。
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公开(公告)号：CN117660271A
公开(公告)日：2024-03-08
申请号：CN202211085321.7
申请日：2022-09-06
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种己二胺的全细胞生物合成方法，属于生物工程领域。本发明的方法以大肠杆菌为宿主菌株利用羧酸还原酶(CAR)和转氨酶(TA)异源构建了己二酸至己二胺的生物转化途径。通过TA同工酶筛选优化关键酶CAR与TA之间的适配性，实现己二胺的全细胞生物合成；进一步引入CAR‑TA‑TA系统优化己二胺合成途径各步骤之间的协调性，有效提高己二胺的积累。本发明提供了一种通过微生物细胞工厂合成己二胺的方法，具有操作简易、污染少、产品质量高等优点，为未来己二胺合成技术的开发奠定了基础。
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