公开(公告)号：CN112941059A

公开(公告)日：2021-06-11

申请号：CN202110203167.8

申请日：2021-02-23

Applicant: 江南大学

Inventor： 饶志明 ,  张显 ,  朱曼迟 ,  王志 ,  杨套伟 ,  徐美娟 ,  邵明龙

IPC: C12N9/82 ,  C12N15/55 ,  C12N15/70 ,  C12N15/75 ,  C12N1/21 ,  A23L5/20 ,  A23L19/18 ,  C12R1/19 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明公开了一种L‑天冬酰胺酶突变体及其在枯草芽孢杆菌中的表达，属于酶工程和微生物工程技术领域。采用本发明公开的米黑根毛霉来源的L‑天冬酰胺酶突变体A344E在45℃、pH7.0的条件下酶活为786.8U/mg，为野生酶509.1U/mg的1.5倍；并且本发明的L‑天冬酰胺酶突变体可以实现在枯草芽孢杆菌中高效表达，采用本发明提供的方法，可以得到是一种表达的L‑天冬酰胺酶突变体酶活为原始菌株7.1倍的重组枯草芽孢杆菌，拓宽其在食品领域的应用范围，使L‑天冬酰胺酶能大规模应用于生产中。

公开(公告)号：CN110607319B

公开(公告)日：2021-11-23

申请号：CN201911040157.6

申请日：2019-10-29

Applicant: 江南大学

Inventor： 饶志明 ,  李谞 ,  张显 ,  朱曼迟 ,  杨套伟 ,  徐美娟 ,  邵明龙 ,  杜宇轩 ,  贾以泽 ,  王嘉轩

IPC: C12N15/75 ,  C12N1/21 ,  C12N9/82 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明公开了一种适用于枯草芽孢杆菌分泌表达蛋白的表达载体及应用，属于基因工程和生物技术领域。该分泌载体是将编码信号肽SPphoD的基因(核苷酸序列如SEQ ID NO.1)和编码分子伴侣PrsA的基因(核苷酸序列如SEQ ID NO.3)分别连接到pMA5‑P43上构建分泌质粒pMA5‑SPP。以pMA5‑SPP为载体，在枯草芽孢杆菌中表达L‑天冬酰胺酶，其胞外分泌量占总表达量的38％，胞外分泌量是常见信号肽SPpel介导下分泌量的2.95倍。

公开(公告)号：CN112941059B

公开(公告)日：2022-03-15

申请号：CN202110203167.8

申请日：2021-02-23

Applicant: 江南大学

Inventor： 饶志明 ,  张显 ,  朱曼迟 ,  王志 ,  杨套伟 ,  徐美娟 ,  邵明龙

IPC: C12N9/82 ,  C12N15/55 ,  C12N15/70 ,  C12N15/75 ,  C12N1/21 ,  A23L5/20 ,  A23L19/18 ,  C12R1/19 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明公开了一种L‑天冬酰胺酶突变体及其在枯草芽孢杆菌中的表达，属于酶工程和微生物工程技术领域。采用本发明公开的米黑根毛霉来源的L‑天冬酰胺酶突变体A344E在45℃、pH7.0的条件下酶活为786.8U/mg，为野生酶509.1U/mg的1.5倍；并且本发明的L‑天冬酰胺酶突变体可以实现在枯草芽孢杆菌中高效表达，采用本发明提供的方法，可以得到是一种表达的L‑天冬酰胺酶突变体酶活为原始菌株7.1倍的重组枯草芽孢杆菌，拓宽其在食品领域的应用范围，使L‑天冬酰胺酶能大规模应用于生产中。

公开(公告)号：CN110607319A

公开(公告)日：2019-12-24

申请号：CN201911040157.6

申请日：2019-10-29

Applicant: 江南大学

Inventor： 饶志明 ,  李谞 ,  张显 ,  朱曼迟 ,  杨套伟 ,  徐美娟 ,  邵明龙 ,  杜宇轩 ,  贾以泽 ,  王嘉轩

IPC: C12N15/75 ,  C12N1/21 ,  C12N9/82 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明公开了一种适用于枯草芽孢杆菌分泌表达蛋白的表达载体及应用，属于基因工程和生物技术领域。该分泌载体是将编码信号肽SPphoD的基因(核苷酸序列如SEQ ID NO.1)和编码分子伴侣PrsA的基因(核苷酸序列如SEQ ID NO.3)分别连接到pMA5-P43上构建分泌质粒pMA5-SPP。以pMA5-SPP为载体，在枯草芽孢杆菌中表达L-天冬酰胺酶，其胞外分泌量占总表达量的38％，胞外分泌量是常见信号肽SPpel介导下分泌量的2.95倍。