一种高效合成β-紫罗兰酮的热带假丝酵母工程菌及应用

    公开(公告)号:CN117802056B

    公开(公告)日:2025-03-25

    申请号:CN202311770042.9

    申请日:2023-12-21

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种高效合成β‑紫罗兰酮的热带假丝酵母工程菌及应用,属于酶工程和代谢工程领域。本发明选取来源于植物矮牵牛的类胡萝卜素裂解双加氧酶基因PhCCD1,通过易错PCR对PhCCD1进行随机突变,以热带假丝酵母β‑胡萝卜素生产菌株ANT‑06为底盘细胞,分别在其过氧化物酶体、细胞质中表达了PhCCD1酶突变体,筛选并获得三株能够高效合成β‑紫罗兰酮的热带假丝酵母工程菌株,产量达到173.6±7.0mg/L、136±3.9m/L、177.9±4.3mg/L,并从工程菌中克隆测序获得PhCCD1酶突变体。

    一种高效合成β-紫罗兰酮的热带假丝酵母工程菌及应用

    公开(公告)号:CN117802056A

    公开(公告)日:2024-04-02

    申请号:CN202311770042.9

    申请日:2023-12-21

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种高效合成β‑紫罗兰酮的热带假丝酵母工程菌及应用,属于酶工程和代谢工程领域。本发明选取来源于植物矮牵牛的类胡萝卜素裂解双加氧酶基因PhCCD1,通过易错PCR对PhCCD1进行随机突变,以热带假丝酵母β‑胡萝卜素生产菌株ANT‑06为底盘细胞,分别在其过氧化物酶体、细胞质中表达了PhCCD1酶突变体,筛选并获得三株能够高效合成β‑紫罗兰酮的热带假丝酵母工程菌株,产量达到173.6±7.0mg/L、136±3.9m/L、177.9±4.3mg/L,并从工程菌中克隆测序获得PhCCD1酶突变体。

    一种测定青芥辣中山葵含量的方法

    公开(公告)号:CN108949922B

    公开(公告)日:2019-07-02

    申请号:CN201810919590.6

    申请日:2018-08-14

    Abstract: 本发明公开了一种测定青芥辣中山葵含量的方法,属于分子生物学技术领域。利用液氮研磨使得山葵细胞充分破壁,利用植物基因组提取试剂盒提高基因组浓度、纯度,这两种方法结合有利于最大限度减小破壁不充分、基因组浓度低对山葵基因组得率的影响,从而影响到山葵含量测定准确性。本发明提取到的山葵基因组得率为传统方法的1.45~3倍,测量的准确度更高,测量误差小于10%。且从操作上来说,本方法简单容易实行,所需试剂都比较普通,能够节省实验室经济成本。

    一种产β-紫罗兰酮的热带假丝酵母工程菌的构建方法与应用

    公开(公告)号:CN117821491A

    公开(公告)日:2024-04-05

    申请号:CN202311766840.4

    申请日:2023-12-21

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种产β‑紫罗兰酮的热带假丝酵母工程菌的构建方法与应用,属于基因工程和发酵工程领域。本发明结合了细胞质工程和亚细胞器工程,利用区室化策略提高细胞内酶的局部浓度,通过区室组合策略提高类胡萝卜素裂解双加氧酶的底物可及度、增强代谢通量,从而增加β‑紫罗兰酮产量。本发明所构建的工程菌两相发酵96h,β‑紫罗兰酮产量可达152.4±1.4mg/L(4.6±0.09mg/g DCW)。本发明所构建的热带假丝酵母β‑紫罗兰酮工程菌可以利用简单碳源葡萄糖进行发酵生产β‑紫罗兰酮,发酵过程中无需添加抗生素,具有很大的工业应用前景。

    一种高效筛选魏斯氏菌的标记物及其应用

    公开(公告)号:CN106906296A

    公开(公告)日:2017-06-30

    申请号:CN201710216629.3

    申请日:2017-04-05

    Applicant: 江南大学

    CPC classification number: C12Q1/689

    Abstract: 本发明公开了一种高效筛选魏斯氏菌的标记物及其应用,属于微生物发酵技术领域。本发明提供了一种魏斯氏菌的标记物,其序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还提供了以该标记物是否存在作为筛选条件,高效筛选魏斯氏菌的方法。该方法的筛选周期小于36h,分离、鉴定准确性接近100%,该方法无需镜检、提取基因组等繁琐的步骤,快速且高效,可实现高通量批量处理,极大减少了工作量,降低了成本。

    一种可降解生物胺的多铜氧化酶重组酶

    公开(公告)号:CN108165515B

    公开(公告)日:2020-08-04

    申请号:CN201711443716.9

    申请日:2017-12-27

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种可降解生物胺的多铜氧化酶重组酶,属于发酵技术领域。该方法是在酱油加入适量多铜氧化酶重组酶,该酶由副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)中的多铜氧化酶基因在大肠杆菌中异源表达产生,多铜氧化酶重组酶分解生物胺为醛和氨,从而达到降低生物胺的目的。该酶具有较强的降解生物胺的性能,在24h内能够降解色胺、苯乙胺、腐胺、尸胺、组胺、酪胺,精胺、亚精胺,降解效率最高可达75%。

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