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公开(公告)号:CN116574623A
公开(公告)日:2023-08-11
申请号:CN202210798069.8
申请日:2022-07-06
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/19 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N15/60 , C12N15/61 , C12N15/81 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12P7/22 , C12R1/865 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种利用双菌共培养体系生产羟基酪醇的方法,属于微生物基因工程技术领域。本发明构建酿酒酵母工程菌株与大肠杆菌工程菌株的双菌共培养体系,优化并利用双菌共培养体系从头合成羟基酪醇。所述酿酒酵母工程菌株通过在宿主菌株中消除酪氨酸反馈抑制,引入外源提高产物代谢通量的路径及整合改造的GAL调控系统得到;所述大肠杆菌工程菌株通过在宿主菌株中过表达4‑羟基苯乙酸‑3‑羟化酶和核黄素氧化还原酶得到,由此实现羟基酪醇的制备和高效合成;采用所述酿酒酵母工程菌株和大肠杆菌工程菌双菌共培养体系的羟基酪醇从头合成产量达到435.32mg/L,解决了单一野生菌株不能从头合成羟基酪醇的问题,为微生物高效发酵生产羟基酪醇提供了新思路。
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公开(公告)号:CN119859587A
公开(公告)日:2025-04-22
申请号:CN202510115681.4
申请日:2025-01-24
Applicant: 江南大学 , 江西省百约食品有限责任公司
IPC: C12N1/19 , C12N15/81 , C12N15/60 , C12N15/52 , C12N15/54 , C12N15/61 , C12N15/53 , C12N15/31 , C12N15/11 , C12P7/26 , C12R1/865
Abstract: 本发明公开了一种利用酿酒酵母生产根皮素的方法,属于微生物基因工程技术领域。本发明将植物中天然代谢根皮素路径在酿酒酵母BY4741中成功构建,实现了根皮素在微生物中的合成,并通过强化酵母中酪氨酸和苯丙氨酸的合成途径基因,包括消除酪氨酸反馈抑制和引入外源基因,增强前提物酪氨酸和苯丙氨酸的合成,并通过强化根皮素合成通路中关键基因的表达进一步提高根皮素的产量。本发明构建的工程酵母从头合成根皮素的产量可达246.21mg/L,有效解决糖酶抑制剂根皮素的合成问题,为微生物高效发酵合成根皮素奠定基础。
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公开(公告)号:CN118909815A
公开(公告)日:2024-11-08
申请号:CN202411165753.8
申请日:2024-08-23
Applicant: 江南大学 , 江西省百约食品有限责任公司
Abstract: 本发明公开了一种优化蛋白质翻译延伸过程提高酿酒酵母蛋白产量的方法,属于微生物基因工程技术领域。本发明通过对翻译起始过程中的翻译延伸因子进行调控提高酿酒酵母全局蛋白质合成的能力,使得酿酒酵母蛋白含量从45.63g/100g提高至48.06g/100g,蛋白产量从3.23g/L提高至3.46g/L,为低成本、绿色的单细胞蛋白生产提供技术支撑,在替代蛋白领域具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN117625507B
公开(公告)日:2024-09-17
申请号:CN202311630621.3
申请日:2023-11-30
Applicant: 江南大学 , 江西省百约食品有限责任公司
Abstract: 本发明公开了高产可溶性β‑1,3‑葡聚糖的根瘤菌基因工程改造及双阶段发酵方法,属于微生物基因工程技术领域。本发明基于菌株ZB01,发掘到能够四个可以明显影响β‑1,3‑葡聚糖产量的基因,其中gluA表达与β‑1,3‑葡聚糖产量呈现负相关而gluN表达与β‑1,3‑葡聚糖产量呈现正相关趋势。通过敲除gluA以及过表达gluN,获得基因工程菌株;针对产物粘稠带来的传质阻力以及生长抑制问题,设计双阶段发酵体系(先生长后促进合成),即在菌株进入对数期末期添加诱导剂IPTG,使得β‑1,3‑葡聚糖的产量达到6.62g/L,有效解决了可溶性β‑1,3‑葡聚糖产量低的难题,为其工业化生产奠定了基础。
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公开(公告)号:CN117625507A
公开(公告)日:2024-03-01
申请号:CN202311630621.3
申请日:2023-11-30
Applicant: 江南大学 , 江西省百约食品有限责任公司
Abstract: 本发明公开了高产可溶性β‑1,3‑葡聚糖的根瘤菌基因工程改造及双阶段发酵方法,属于微生物基因工程技术领域。本发明基于菌株ZB01,发掘到能够四个可以明显影响β‑1,3‑葡聚糖产量的基因,其中gluA表达与β‑1,3‑葡聚糖产量呈现负相关而gluN表达与β‑1,3‑葡聚糖产量呈现正相关趋势。通过敲除gluA以及过表达gluN,获得基因工程菌株;针对产物粘稠带来的传质阻力以及生长抑制问题,设计双阶段发酵体系(先生长后促进合成),即在菌株进入对数期末期添加诱导剂IPTG,使得β‑1,3‑葡聚糖的产量达到6.62g/L,有效解决了可溶性β‑1,3‑葡聚糖产量低的难题,为其工业化生产奠定了基础。
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公开(公告)号:CN114015735B
公开(公告)日:2023-11-14
申请号:CN202111413918.5
申请日:2021-11-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种蔗糖磷酸化酶和葡萄糖异构酶级联催化合成黑曲霉二糖的方法,属于酶工程领域。本发明以来源于青春双歧杆菌蔗糖磷酸化酶(BaSP)和葡萄糖异构酶(GI)为研究对象,利用BaSP水解蔗糖产生的葡萄糖启动转糖苷反应,通过GI将副产物果糖转化为转糖苷受体葡萄糖,促进整个反应向转糖苷方向进行,抑制水解作用,最大程度利用副产物,并降低辅底物葡萄糖的添加。在单一底物蔗糖的条件下,级联反应的黑曲霉二糖产量约为BaSP单酶反应的192%,同时果糖产量降低为BaSP单酶反应的80%。本发明构建的酶级联反应对于促进黑曲霉二糖绿色、高效合成具有重要意义。
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公开(公告)号:CN118909816B
公开(公告)日:2025-05-13
申请号:CN202411165754.2
申请日:2024-08-23
Applicant: 江南大学 , 江西省百约食品有限责任公司
Abstract: 本发明公开了一种调控酿酒酵母形态提高酵母蛋白含量的方法,属于微生物基因工程技术领域。本发明通过在基因组上HO位点整合Gic1基因,重塑酿酒酵母形态,提高了酿酒酵母全局蛋白质合成的能力,增加了蛋白质的积累,使酿酒酵母的蛋白含量从46.16g/100g提高至51.04g/100g,为低成本、绿色的单细胞蛋白生产提供技术支撑,在替代蛋白领域具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN119859586A
公开(公告)日:2025-04-22
申请号:CN202510115679.7
申请日:2025-01-24
Applicant: 江南大学 , 江西省百约食品有限责任公司
IPC: C12N1/19 , C12N15/81 , C12N15/54 , C12N15/60 , C12N15/52 , C12N15/53 , C12N15/61 , C12N15/31 , C12N15/11 , C12P19/44 , C12R1/865
Abstract: 本发明公开了酿酒酵母合成葡萄糖转运抑制剂根皮苷或三叶苷的方法,属于微生物基因工程技术领域。本发明将植物中天然代谢根皮苷或三叶苷路径基因在产根皮素的酿酒酵母工程菌中表达,实现了酵母中从头合成根皮苷或三叶苷;进一步强化根皮苷或三叶苷合成通路中关键基因的表达提高根皮苷或三叶苷合的产量。本发明中工程酵母从头合成根皮苷和三叶苷产量分别为340.41ml/mL和269.73ml/mL,有效解决了降糖剂、甜味剂根皮苷和三叶苷的合成问题,为微生物高效发酵合成根皮苷和三叶苷奠定基础。
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公开(公告)号:CN117587000A
公开(公告)日:2024-02-23
申请号:CN202311589249.6
申请日:2023-11-24
Applicant: 江南大学
IPC: C12N9/90 , C12N15/61 , C12N15/56 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12N9/38 , C12P19/12 , A23L33/125 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了通过构建体内CE‑MI酶级联催化体系提高乳糖到乳果糖转化率,属于酶工程领域。本发明以大肠杆菌表达CsCE/Q371E实现乳糖的细胞发酵生产,通过将大肠杆菌的lacZ基因敲除将乳果糖产量达到3.55g/L。为解除依匹乳糖到乳果糖结构异构转化的限速步骤,提高乳糖到乳果糖转化率,挖掘到一款MmMI酶与CsCE酶级联催化,产量达到4.0g/L。通过定点饱和突变获得一款结构异构催化性能提升的突变体MmMI/F242N;在此基础上,通过RBS工程调控优化CsCE与MmMI的表达量,在添加8g/L乳清粉作为底物时摇瓶发酵,乳果糖产量达到6.12g/L,其转化率91.3%,为目前报道最高水平。
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公开(公告)号:CN114015735A
公开(公告)日:2022-02-08
申请号:CN202111413918.5
申请日:2021-11-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种蔗糖磷酸化酶和葡萄糖异构酶级联催化合成黑曲霉二糖的方法,属于酶工程领域。本发明以来源于青春双歧杆菌蔗糖磷酸化酶(BaSP)和葡萄糖异构酶(GI)为研究对象,利用BaSP水解蔗糖产生的葡萄糖启动转糖苷反应,通过GI将副产物果糖转化为转糖苷受体葡萄糖,促进整个反应向转糖苷方向进行,抑制水解作用,最大程度利用副产物,并降低辅底物葡萄糖的添加。在单一底物蔗糖的条件下,级联反应的黑曲霉二糖产量约为BaSP单酶反应的192%,同时果糖产量降低为BaSP单酶反应的80%。本发明构建的酶级联反应对于促进黑曲霉二糖绿色、高效合成具有重要意义。
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