公开(公告)号：CN110106231A

公开(公告)日：2019-08-09

申请号：CN201910325530.6

申请日：2019-04-22

Applicant: 武汉大学

Inventor： 赵轩 ,  田沺 ,  王少儒 ,  宋燕燕 ,  王天洋 ,  蒋尚文 ,  万泽中 ,  李惠 ,  范若晨 ,  张楠

IPC: C12Q1/6809

Abstract: 本发明公开了一种利用dUTP或dTTP检测核酸中腺嘌呤N6或N1位发生甲基化修饰的方法。该检测方法主要由两部分组成：第一部分是通过延伸反应将三磷酸尿嘧啶脱氧核苷酸（dUTP）或三磷酸胸腺嘧啶脱氧核苷酸（dTTP）掺入DNA序列。第二部分是通过变性聚丙烯酰胺凝胶分析得到含有不同位点的链的延伸百分比，处理后可判断含有不同位点的链的延伸速率从而达到识别检测N6-甲基腺嘌呤和N1-甲基腺嘌呤的目的。该方法克服了现有检测方法设备需求高、原料昂贵、操作繁琐等不足，灵敏度高、适应范围广。

公开(公告)号：CN110093399A

公开(公告)日：2019-08-06

申请号：CN201910325528.9

申请日：2019-04-22

Applicant: 武汉大学

Inventor： 赵轩 ,  田沺 ,  王少儒 ,  宋燕燕 ,  李惠 ,  蒋尚文 ,  王天洋 ,  万泽中 ,  张楠 ,  范若晨

IPC: C12Q1/6844

Abstract: 本发明公开了一种利用二磷酸尿嘧啶脱氧核苷酸检测核酸中腺嘌呤N6位发生甲基化修饰的方法。该检测方法主要由两部分组成。第一部分是对被测核酸或对照核酸通过延伸反应将二磷酸尿嘧啶脱氧核苷酸（dUDP）掺入基因组序列。第二部分是使用变性聚丙烯酰胺凝胶分析延伸反应结果，经数据处理后得到被测核酸或对照核酸的延伸百分比，进行比较从而实现识别检测N6-甲基腺嘌呤和N1-甲基腺嘌呤。该方法克服了现有检测方法设备需求高、操作繁琐等不足，灵敏度高、适应范围广，所用原料简单易得，操作简便。

公开(公告)号：CN110106231B

公开(公告)日：2021-08-17

申请号：CN201910325530.6

申请日：2019-04-22

Applicant: 武汉大学

Inventor： 赵轩 ,  田沺 ,  王少儒 ,  宋燕燕 ,  王天洋 ,  蒋尚文 ,  万泽中 ,  李惠 ,  范若晨 ,  张楠

IPC: C12Q1/6809

Abstract: 本发明公开了一种利用dUTP或dTTP检测核酸中腺嘌呤N6或N1位发生甲基化修饰的方法。该检测方法主要由两部分组成：第一部分是通过延伸反应将三磷酸尿嘧啶脱氧核苷酸（dUTP）或三磷酸胸腺嘧啶脱氧核苷酸（dTTP）掺入DNA序列。第二部分是通过变性聚丙烯酰胺凝胶分析得到含有不同位点的链的延伸百分比，处理后可判断含有不同位点的链的延伸速率从而达到识别检测N6‑甲基腺嘌呤和N1‑甲基腺嘌呤的目的。该方法克服了现有检测方法设备需求高、原料昂贵、操作繁琐等不足，灵敏度高、适应范围广。

公开(公告)号：CN109913530A

公开(公告)日：2019-06-21

申请号：CN201910179984.7

申请日：2019-03-11

Applicant: 武汉大学

Inventor： 赵轩 ,  王少儒 ,  刘奕侬 ,  万泽中 ,  王天洋 ,  李惠 ,  蒋尚文 ,  范若晨 ,  张楠

IPC: C12Q1/6809

Abstract: 本发明公开了一种识别检测DNA中5-羟甲基胞嘧啶和5-甲酰胞嘧啶的方法，属于分子生物学、核酸化学和表观遗传学领域。本发明方法包括如下步骤：将待检DNA加到含高钌酸钾和碱的混合溶液中，冰水浴条件下反应使DNA中的5hmC氧化为5fC；反应后的NDA纯化后加入到热碱溶液中保温反应使DNA裂解，凝胶分析测得DNA中5hmC和5fC的总数目和位点；待检DNA不经高钌酸钾氧化直接加入到热碱溶液中保温反应使DNA裂解，凝胶分析测得DNA中5fC的数目和位点；对比两次结果得到DNA中5hmC和5fC各自的数目和位点。本发明方法克服了现有检测方法设备需求高、操作繁琐等不足，灵敏度高、适应范围广。