重组1型单纯疱疹病毒及制备方法和应用

    公开(公告)号:CN1844376A

    公开(公告)日:2006-10-11

    申请号:CN200610018400.0

    申请日:2006-02-23

    Applicant: 武汉大学

    Abstract: 本发明公开了一种重组1型单纯疱疹病毒及制备方法,重组1型单纯疱疹病毒为rHSVΔrr-34.5/lac,CCTCC-V200601。步骤是:重组质粒pAEB构建,穿梭质粒pSV1-AEB构建,RecA依赖的共整和体的形成,同源重组产生rr基因失活的重组质粒pHSV1-Δrr;β-半乳糖苷酶表达盒的获得与纯化,中间载体I pFL构建,中间载体II pBL构建,转移载体pIL构建,重组1型单纯疱疹病毒rHSVΔrr-34.5/lac的获得。本发明中凋亡抑制基因icp34.5也是神经毒基因被报导基因lacZ插入失活,核糖核苷还原酶基因rr被EGFP插入失活,重组1型单纯疱疹病毒仅在肿瘤细胞中复制,同时作为抗肿瘤药物在治疗或预防肿瘤中的应用,对正常细胞安全,具有很好的靶向性和选择性。

    一种提纯活病毒的方法
    2.
    发明公开

    公开(公告)号:CN1556205A

    公开(公告)日:2004-12-22

    申请号:CN200410012605.9

    申请日:2004-01-02

    Applicant: 武汉大学

    Abstract: 本发明公开了一种提纯活病毒的方法。该方法包括制备抗宿主细胞的抗体,并用带有葡萄球菌蛋白A的琼脂糖珠对其纯化;再将该抗体与增殖病毒的细胞破碎体系混合,去沉淀即为初步纯化的活病毒;再用带有葡萄球菌蛋白A的琼脂糖珠与初步纯化后的活病毒悬液混合,去沉淀即为高度纯化的活病毒。该方法与传统纯化病毒的方法相比,具有分离产物纯度高、分离病毒活性高、操作简单、成本低廉、能有效放大等优点,可用于工业化生产和实验室研究。

    蓝舌病毒的检测方法及试剂盒

    公开(公告)号:CN1556216A

    公开(公告)日:2004-12-22

    申请号:CN200410012604.4

    申请日:2004-01-02

    Applicant: 武汉大学

    Abstract: 本发明公开了一种蓝舌病毒的检测方法及试剂盒,首先是细胞的培养及病毒的增殖;其次是通过在反应试管中加入样品处理液,制备待测样品和阴阳性对照物PCR模板;第三是通过在反应试管中分别加入待检病毒样品模板和逆转录反应溶液,以逆转录合成待检样品dsRNA的cDNA;第四是通过在反应试管中加入PCR反应体系,进行聚合酶链反应,扩增合成靶标序列。本发明检测准确、敏感、廉价、安全,操作方便,易于推广。

    一种提纯活病毒的方法
    4.
    发明授权

    公开(公告)号:CN1260354C

    公开(公告)日:2006-06-21

    申请号:CN200410012605.9

    申请日:2004-01-02

    Applicant: 武汉大学

    Abstract: 本发明公开了一种提纯活病毒的方法。该方法包括制备抗宿主细胞的抗体,并用带有葡萄球菌蛋白A的琼脂糖珠对其纯化;再将该抗体与增殖病毒的细胞破碎体系混合,去沉淀即为初步纯化的活病毒;再用带有葡萄球菌蛋白A的琼脂糖珠与初步纯化后的活病毒悬液混合,去沉淀即为高度纯化的活病毒。该方法与传统纯化病毒的方法相比,具有分离产物纯度高、分离病毒活性高、操作简单、成本低廉、能有效放大等优点,可用于工业化生产和实验室研究。

    一种异源蓝舌病毒双链RNA内源性干扰素诱导剂的制备方法

    公开(公告)号:CN102350001A

    公开(公告)日:2012-02-15

    申请号:CN201110325180.7

    申请日:2011-10-24

    Applicant: 武汉大学

    Abstract: 本发明公开了一种异源蓝舌病毒双链RNA内源性干扰素诱导剂的制备方法。该诱导剂是从动物蓝舌病毒中提取裸露的dsRNA分子制备而成的,直接用于人体,诱导人体产生内源性干扰素,赋予人体抗病毒、抗肿瘤以及广泛的防病、治病和增强体质的功能。主要优点:A)直接诱导人体产生种类齐全的ENI、体内浓度高、抗病毒和抗肿瘤活性最强、没有异源蛋白的免疫原性、没有依赖性、无须提纯、造价低廉。B)没有感染性;系dsRNA病毒,没有肿瘤源性;为天然病毒,不会影响生态平衡。C)是一种全新的对人安全的天然的绿色生物材料,用之不竭、可无限再生,便于离体增殖和纯化制备。D)高度符合种属特异性,在人体内的药理作用最强。

    重组1型单纯疱疹病毒及制备方法和应用

    公开(公告)号:CN100451109C

    公开(公告)日:2009-01-14

    申请号:CN200610018400.0

    申请日:2006-02-23

    Applicant: 武汉大学

    Abstract: 本发明公开了一种重组1型单纯疱疹病毒及制备方法,重组1型单纯疱疹病毒为rHSVΔrr-34.5/lac,CCTCC-V200601。步骤是:重组质粒pAEB构建,穿梭质粒pSV1-AEB构建,RecA依赖的共整和体的形成,同源重组产生rr基因失活的重组质粒pHSV1-Δrr;β-半乳糖苷酶表达盒的获得与纯化,中间载体I pFL构建,中间载体I1pBL构建,转移载体pIL构建,重组1型单纯疱疹病毒rHSVΔrr-34.5/lac的获得。本发明中凋亡抑制基因icp34.5也是神经毒基因被报导基因lacZ插入失活,核糖核苷还原酶基因rr被EGFP插入失活,重组1型单纯疱疹病毒仅在肿瘤细胞中复制,同时作为抗肿瘤药物在治疗或预防肿瘤中的应用,对正常细胞安全,具有很好的靶向性和选择性。

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