一种植物单拷贝基因的检测方法

    公开(公告)号:CN102191325A

    公开(公告)日:2011-09-21

    申请号:CN201110094969.6

    申请日:2011-04-15

    Applicant: 武汉大学

    Abstract: 本发明涉及一种基于量子点荧光原位杂交的植物单拷贝基因检测方法。通过制备量子点偶联的DNA作为探针,按照传统的荧光原位杂交方法,在间期核、染色体或DNA纤维等上进行植物单拷贝基因的杂交检测。该方法采用直接标记的方法,省去了抗体检测的过程,而且由于量子点荧光强度高、抗光漂,提高了杂交的灵敏度和分辨率,可以快速、有效进行植物单拷贝基因的定位,可广泛应用于物理图谱的绘制,分析基因组的组成、结构、重排以及进化关系等。

    一种基于磁场可控微流控芯片开发SSR标记的方法

    公开(公告)号:CN103627806A

    公开(公告)日:2014-03-12

    申请号:CN201310641796.4

    申请日:2013-12-03

    Applicant: 武汉大学

    CPC classification number: C12Q1/683 C12Q2531/113 C12Q2563/143 C12Q2565/629

    Abstract: 本发明公开了一种基于磁场可控微流控芯片开发SSR标记的方法。本发明方法包括如下步骤:将基因组DNA酶切成200-800bp的片段,加接头进行PCR扩增,扩增产物微卫星探针杂交;制备微流控芯片;使用阀门和Matlab软件控制溶液从微流控芯片中进入和流出,将杂交混合物、与微卫星探针结合的磁珠、洗脱液分别注入微流控芯片中,杂交混合物与磁珠结合,通过外磁场的作用,将杂交混合物与磁珠固定在微流控芯片中,洗脱液将杂质洗脱出来,通过加热使DNA变性,将含有SSR片段的DNA分离出来。本发明节省了大量的试剂和材料,缩短了分离的时间,提高了分离的灵敏度,重复性好,可以快速、高效的进行SSR标记的筛选。

    一种植物中期染色体表观基因组核型的分析方法

    公开(公告)号:CN103614480A

    公开(公告)日:2014-03-05

    申请号:CN201310647518.X

    申请日:2013-12-06

    Applicant: 武汉大学

    CPC classification number: C12Q1/6841 C12Q2543/10

    Abstract: 本发明涉及一种植物中期染色体表观基因组核型的分析方法。通过制备植物中期染色体,进行免疫染色实验,采用三维反卷积图像复原技术得到的三维表观基因组核型。消除了离散的荧光信号,弱化了它们在带间的分布,展示了清晰的表观免疫带纹,可以分析植物不同表观修饰标记的信号模式以及染色质结构和功能,为进一步阐明表观遗传调控在细胞分裂分化和生长发育中的作用奠定基础。

    使用量子点改进聚合酶链式反应的方法

    公开(公告)号:CN101372704B

    公开(公告)日:2012-07-25

    申请号:CN200810048422.0

    申请日:2008-07-17

    Applicant: 武汉大学

    Abstract: 本发明公开了一种使用量子点改进聚合酶链式反应反应的方法,其步骤是:A、量子点的准备:量子点为水溶性;B、PCR体系的优化:将量子点加入PCR反应体系中进行PCR扩增;C、PCR产物的检测:对扩增后的DNA样品进行琼脂糖凝胶电泳,与对照体系进行比较;D、量子点从反应体系中的分离并回收扩增得到的PCR产物:对反应结束体系进行离心,量子点被离心到底部,取上清得到所需PCR产物。本发明方法简便,操作方便,有效地提高了聚合酶链式反应的专一性和产率,消除了非特异性的扩增和假阳性扩增,增加了聚合酶链式反应的专一性,广泛应用于分子诊断、分子标记、法医鉴定、基因克隆等分子生物学的各个领域。

    一种诱导玉米小孢子形成胚状体的方法

    公开(公告)号:CN101874473B

    公开(公告)日:2012-03-28

    申请号:CN201010248490.9

    申请日:2010-08-09

    Applicant: 武汉大学

    Abstract: 本发明涉及一种诱导玉米小孢子形成胚状体的方法,属于植物育种领域。主要步骤是选取合适的雄穗进行消毒,然后在提取液中挤压小穗、过筛、离心收集小孢子,再接种到诱导培养基中,置于32~36℃的烘箱热激处理24~48h,再置于25~28℃的培养室,在摇床上进行暗培养20~25天,形成胚状体。本发明诱导玉米小孢子形成胚状体的方法,具有成胚率高、培养周期短、操作简单等优点。本发明用于玉米遗传育种,将大大加快育种进程,显著地提高选择效果。

    单个量子点偶联单个长链DNA分子的方法

    公开(公告)号:CN102181441A

    公开(公告)日:2011-09-14

    申请号:CN201110095077.8

    申请日:2011-04-15

    Applicant: 武汉大学

    Abstract: 本发明涉及一种单个量子点偶联单个长链DNA分子的方法。用偶联有量子点的寡核苷酸引物代替聚合酶链式反应中的一个引物,通过聚合酶链式反应,得到目的片段的长链DNA(大于100碱基对),并通过电泳分离的方法,进一步得到单个量子点偶联单个长链DNA分子复合物。本发明解决了传统偶联方法中不能在量子点表面偶联长链DNA分子和不能控制偶联DNA分子数量的问题,可以广泛应用于探针制备、纳米结构组装、纳米尺度的生化反应等相关领域。

    使用量子点改进聚合酶链式反应的方法

    公开(公告)号:CN101372704A

    公开(公告)日:2009-02-25

    申请号:CN200810048422.0

    申请日:2008-07-17

    Applicant: 武汉大学

    Abstract: 本发明公开了一种使用量子点改进聚合酶链式反应的方法,其步骤是:A.量子点的准备:量子点为水溶性;B.PCR体系的优化:将量子点加入PCR反应体系中进行PCR扩增;C.PCR产物的检测:对扩增后的DNA样品进行琼脂糖凝胶电泳,与对照体系进行比较;D.量子点从反应体系中的分离并回收扩增得到的PCR产物:对反应结束体系进行离心,量子点被离心到底部,取上清得到所需PCR产物。本发明方法简便,操作方便,有效地提高了聚合酶链式反应的专一性和产率,消除了非特异性的扩增和假阳性扩增,增加了聚合酶链式反应的专一性,广泛应用于分子诊断、分子标记、法医鉴定、基因克隆等分子生物学的各个领域。

    一种诱导玉米小孢子形成胚状体的方法

    公开(公告)号:CN101874473A

    公开(公告)日:2010-11-03

    申请号:CN201010248490.9

    申请日:2010-08-09

    Applicant: 武汉大学

    Abstract: 本发明涉及一种诱导玉米小孢子形成胚状体的方法,属于植物育种领域。主要步骤是选取合适的雄穗进行消毒,然后在提取液中挤压小穗、过筛、离心收集小孢子,再接种到诱导培养基中,置于32~36℃的烘箱热激处理24~48h,再置于25~28℃的培养室,在摇床上进行暗培养20~25天,形成胚状体。本发明诱导玉米小孢子形成胚状体的方法,具有成胚率高、培养周期短、操作简单等优点。本发明用于玉米遗传育种,将大大加快育种进程,显著地提高选择效果。

    一种植物单拷贝基因的检测方法

    公开(公告)号:CN102191325B

    公开(公告)日:2013-01-23

    申请号:CN201110094969.6

    申请日:2011-04-15

    Applicant: 武汉大学

    Abstract: 本发明涉及一种基于量子点荧光原位杂交的植物单拷贝基因检测方法。通过制备量子点偶联的DNA作为探针,按照传统的荧光原位杂交方法,在间期核、染色体或DNA纤维等上进行植物单拷贝基因的杂交检测。该方法采用直接标记的方法,省去了抗体检测的过程,而且由于量子点荧光强度高、抗光漂,提高了杂交的灵敏度和分辨率,可以快速、有效进行植物单拷贝基因的定位,可广泛应用于物理图谱的绘制,分析基因组的组成、结构、重排以及进化关系等。

    单个量子点偶联单个长链DNA分子的方法

    公开(公告)号:CN102181441B

    公开(公告)日:2012-09-26

    申请号:CN201110095077.8

    申请日:2011-04-15

    Applicant: 武汉大学

    Abstract: 本发明涉及一种单个量子点偶联单个长链DNA分子的方法。用偶联有量子点的寡核苷酸引物代替聚合酶链式反应中的一个引物,通过聚合酶链式反应,得到目的片段的长链DNA(大于100碱基对),并通过电泳分离的方法,进一步得到单个量子点偶联单个长链DNA分子复合物。本发明解决了传统偶联方法中不能在量子点表面偶联长链DNA分子和不能控制偶联DNA分子数量的问题,可以广泛应用于探针制备、纳米结构组装、纳米尺度的生化反应等相关领域。

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