三层密度梯度离心分离纯化单细胞悬液的方法

    公开(公告)号:CN118006542A

    公开(公告)日:2024-05-10

    申请号:CN202410314686.5

    申请日:2024-03-19

    Abstract: 本发明公开了三层密度梯度离心分离纯化单细胞悬液的方法,步骤为样本解离,离心得到的单细胞沉淀用第一浓度的Ficoll重悬,将单细胞悬液缓慢地加入到装有第二浓度的Ficoll离心管中,使单细胞悬液与Ficoll分层;向上层加入PBS溶液,注意分层;进行密度梯度离心;取中间白膜层细胞加入含20%FBS的RPMI‑1640培养液的离心管;离心收集沉淀;加入含5%FBS的RPMI‑1640培养液进行重悬,即得分离纯化的单细胞悬液。该方法可以去除单细胞悬液中的碎片、去除死细胞、高线粒体比例的细胞,提高单细胞数据质量,在保证细胞类型稳定和细胞形态及细胞内RNA完整性的同时,显著提升回收细胞活率。

    一种新鲜组织保存液及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN114831108A

    公开(公告)日:2022-08-02

    申请号:CN202210554750.8

    申请日:2022-05-20

    Abstract: 本发明公开了一种新鲜组织保存液,属于生物样本保存技术领域,所述新鲜组织保存液中包括离子缓冲液、组织细胞合成代谢营养物质、糖类化合物、抗氧化和抗细胞凋亡剂,其中,所述离子缓冲液中阴离子包括酸根离子和氢氧根离子;所述组织细胞合成代谢营养物质包括氨基酸、核苷和/或核苷酸;所述糖类化合物为单糖、二糖和多糖中的至少一种;所述抗氧化和抗细胞凋亡剂包括维生素、维生素衍生物、谷胱甘肽和/或别嘌呤醇,所述新鲜组合保存液的pH为7.2~7.6。利用本发明的新鲜组织保存液进行生物样本保存,可以有效实现人和动物的新鲜组织的低温保存(2‑8℃)及运输,极大降低了保存及运输成本。

    一种小鼠肠腺单细胞悬液制备方法

    公开(公告)号:CN117417878A

    公开(公告)日:2024-01-19

    申请号:CN202311182398.0

    申请日:2023-09-13

    Abstract: 本发明公开了一种小鼠肠腺单细胞悬液制备方法及应用,所述方法将小鼠肠腺组织用第一酶解液,第二酶解液,第三酶解液分别消化10min,重复两次,再经过红细胞裂解以及去死细胞处理,最终得到小鼠肠腺单细胞悬液,其中,第一酶解液采用RPMI‑1640作为溶剂配制酶解液,10mL混合酶解液中包括1mg/mL CollagenaseⅤ、0.5mg/mL Dispase和0.25mg/mL DNaseⅠ;第二酶解液为1mg/mL CollagenaseⅣ;第三酶解液为1mg/mL CollagenaseⅢ。本发明的方法采用不同的酶解液,多步骤,两次重复消化,能够稳定地得到高活率且杂质低的小鼠肠腺单细胞悬液,有很高的可重复性和成功率,能很好地应用于单细胞检测。

    一种新鲜组织保存液及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN114831108B

    公开(公告)日:2023-05-12

    申请号:CN202210554750.8

    申请日:2022-05-20

    Abstract: 本发明公开了一种新鲜组织保存液,属于生物样本保存技术领域,所述新鲜组织保存液中包括离子缓冲液、组织细胞合成代谢营养物质、糖类化合物、抗氧化和抗细胞凋亡剂,其中,所述离子缓冲液中阴离子包括酸根离子和氢氧根离子;所述组织细胞合成代谢营养物质包括氨基酸、核苷和/或核苷酸;所述糖类化合物为单糖、二糖和多糖中的至少一种;所述抗氧化和抗细胞凋亡剂包括维生素、维生素衍生物、谷胱甘肽和/或别嘌呤醇,所述新鲜组合保存液的pH为7.2~7.6。利用本发明的新鲜组织保存液进行生物样本保存,可以有效实现人和动物的新鲜组织的低温保存(2‑8℃)及运输,极大降低了保存及运输成本。

Patent Agency Ranking