一种人动脉组织单细胞悬液制备用酶解液、试剂盒、方法及其应用

    公开(公告)号:CN117384825B

    公开(公告)日:2025-03-25

    申请号:CN202311585205.6

    申请日:2023-11-24

    Abstract: 本发明公开了一种人动脉组织单细胞悬液制备用酶解液、试剂盒、方法及其应用,所述酶解液,包括第一酶解液、第二酶解液,其中,第一酶解液包括80‑120U/ml透明质酸酶和30‑80U/ml链霉蛋白酶;第二酶解液包括1‑3mg/ml胶原酶II、0.3‑0.8mg/ml分散酶和0.05‑0.1mg/ml弹性蛋白酶;以及利用酶解液制备的试剂盒以及酶解方法,酶解液中包含的胶原酶均为常用的解离酶,获得方便,酶解液配比适用于人动脉组织的单细胞解离,试剂组分相容性较好,无有害成分,安全环保;使用本发明提供的解离方案可以获得高质量的单细胞悬液,可以大幅提升单细胞测序在动脉组织中应用的可行性。

    一种小鼠肠腺单细胞悬液制备方法

    公开(公告)号:CN117417878A

    公开(公告)日:2024-01-19

    申请号:CN202311182398.0

    申请日:2023-09-13

    Abstract: 本发明公开了一种小鼠肠腺单细胞悬液制备方法及应用,所述方法将小鼠肠腺组织用第一酶解液,第二酶解液,第三酶解液分别消化10min,重复两次,再经过红细胞裂解以及去死细胞处理,最终得到小鼠肠腺单细胞悬液,其中,第一酶解液采用RPMI‑1640作为溶剂配制酶解液,10mL混合酶解液中包括1mg/mL CollagenaseⅤ、0.5mg/mL Dispase和0.25mg/mL DNaseⅠ;第二酶解液为1mg/mL CollagenaseⅣ;第三酶解液为1mg/mL CollagenaseⅢ。本发明的方法采用不同的酶解液,多步骤,两次重复消化,能够稳定地得到高活率且杂质低的小鼠肠腺单细胞悬液,有很高的可重复性和成功率,能很好地应用于单细胞检测。

    一种人动脉组织单细胞悬液制备用酶解液、试剂盒、方法及其应用

    公开(公告)号:CN117384825A

    公开(公告)日:2024-01-12

    申请号:CN202311585205.6

    申请日:2023-11-24

    Abstract: 本发明公开了一种人动脉组织单细胞悬液制备用酶解液、试剂盒、方法及其应用,所述酶解液,包括第一酶解液、第二酶解液,其中,第一酶解液包括80‑120U/ml透明质酸酶和30‑80U/ml链霉蛋白酶;第二酶解液包括1‑3mg/ml胶原酶II、0.3‑0.8mg/ml分散酶和0.05‑0.1mg/ml弹性蛋白酶;以及利用酶解液制备的试剂盒以及酶解方法,酶解液中包含的胶原酶均为常用的解离酶,获得方便,酶解液配比适用于人动脉组织的单细胞解离,试剂组分相容性较好,无有害成分,安全环保;使用本发明提供的解离方案可以获得高质量的单细胞悬液,可以大幅提升单细胞测序在动脉组织中应用的可行性。

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