公开(公告)号：CN102329381A

公开(公告)日：2012-01-25

申请号：CN201110268917.6

申请日：2011-09-13

Applicant: 暨南大学

Inventor： 陈填烽 ,  郑文杰 ,  蒋洁 ,  杨芳 ,  黄家兴

IPC: C07K14/405 ,  C07K1/36 ,  C07K1/34 ,  C07K1/30 ,  C07K1/16

Abstract: 本发明公开一种同时分离高纯度的藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白的方法与应用。本发明将螺旋藻干粉反复冻融，超声破碎，离心，上清为藻胆蛋白粗提液；接着加入硫酸铵，饱和度为25～35％时取上清；再加入硫酸铵，饱和度为60～70％时取沉淀，透析沉淀，得到初步纯化的藻胆蛋白提取液，将其上样到羟基磷灰石柱子；收集含0.1～0.2M氯化钠的pH6.5～7.2、0.02～0.03M磷酸盐缓冲溶液和含0.1～0.2M氯化钠的pH6.5～7.2、0.1～0.12M磷酸盐缓冲溶液，前者为藻蓝蛋白，后者为别藻蓝蛋白。该制备方法能同时获得纯化因子达到4.5的藻蓝蛋白和3的别藻蓝蛋白及其含硒、碲类似物，并对其纯化规模进行放大，一次层析可获得克级的高纯度蛋白，大大降低纯化成本，能用于生产藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白。

公开(公告)号：CN102329381B

公开(公告)日：2013-08-21

申请号：CN201110268917.6

申请日：2011-09-13

Applicant: 暨南大学

Inventor： 陈填烽 ,  郑文杰 ,  蒋洁 ,  杨芳 ,  黄家兴

IPC: C07K14/405 ,  C07K1/36 ,  C07K1/34 ,  C07K1/30 ,  C07K1/16

Abstract: 本发明公开一种同时分离高纯度的藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白的方法与应用。本发明将螺旋藻干粉反复冻融，超声破碎，离心，上清为藻胆蛋白粗提液；接着加入硫酸铵，饱和度为25～35％时取上清；再加入硫酸铵，饱和度为60～70％时取沉淀，透析沉淀，得到初步纯化的藻胆蛋白提取液，将其上样到羟基磷灰石柱子；收集含0.1～0.2M氯化钠的pH6.5～7.2、0.02～0.03M磷酸盐缓冲溶液和含0.1～0.2M氯化钠的pH6.5～7.2、0.1～0.12M磷酸盐缓冲溶液，前者为藻蓝蛋白，后者为别藻蓝蛋白。该制备方法能同时获得纯化因子达到4.5的藻蓝蛋白和3的别藻蓝蛋白及其含硒、碲类似物，并对其纯化规模进行放大，一次层析可获得克级的高纯度蛋白，大大降低纯化成本，能用于生产藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白。