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公开(公告)号：CN111850070A
公开(公告)日：2020-10-30
申请号：CN202010737763.X
申请日：2020-07-28
Applicant: 暨南大学
Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域，公开了一种用磷酸钠和过氧化氢预处理甘蔗渣的方法，包括如下步骤：将甘蔗渣风干后进行粉碎，筛选密封干燥保存；将处理好的甘蔗渣放入磷酸钠和过氧化氢混合溶液中进行一步或分步预处理；待反应结束后，冷却至室温，进行固液分离，固体部分用热水洗至中性，收集固体残渣，烘干至恒重；过氧化氢与磷酸钠组成的预处理液，能够显著提高酶解效率和木质素去除率，且混合预处理液中过氧化氢的负载量更低，加入过氧化氢不会明显降低体系的pH，能更好的改变甘蔗渣的表面形态。
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公开(公告)号：CN110305892A
公开(公告)日：2019-10-08
申请号：CN201910633361.2
申请日：2019-07-12
Applicant: 广东利世康低碳科技有限公司 , 广州利世康工业科技有限公司 , 暨南大学
Abstract: 验证CRISPR-Cas9系统介导目标基因插入产朊假丝酵母的可行性的方法，步骤：S1、构建包含Cas9片段的产朊假丝酵母表达载体；S2、扩增tRNAGlu基因、sgRNA下游表达单元，并重叠PCR连接并引入酶切位点，连接后与产朊假丝酵母载体结合得sgRNA初步重组质粒；S3、选定预插入和靶点序列，在靶点及互补序列5’端加粘性末端，退火成双链片段，与酶切后的初步重组质粒连接得sgRNA成熟重组质粒；S4、构建含有预插入序列左右同源臂的重组供体片段；S5、sgRNA重组质粒和重组供体片段转化携带Cas9的产朊假丝酵母；通过鉴定供体片段表达，验证了Cas9系统介导目标基因插入产朊假丝酵母是否可行。
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公开(公告)号：CN110305891A
公开(公告)日：2019-10-08
申请号：CN201910633290.6
申请日：2019-07-12
Applicant: 广东利世康低碳科技有限公司 , 广州利世康工业科技有限公司 , 暨南大学
Abstract: 验证CRISPR-Cas9系统敲除产朊假丝酵母目标基因的可行性的方法，步骤：S1、测定产朊假丝酵母染色体倍数；S2、构建带Cas9片段的产朊假丝酵母表达载体；S3、构建含tRNAGlu基因、sgRNA下游表达单元的sgRNA初步质粒；S3、选定预敲除和靶点序列，在靶点及互补序列5’端加粘性末端，退火成双链，与初步质粒结合成sgRNA成熟重组质粒；S5、构建含敲除序列的重组供体片段；S6、sgRNA成熟重组质粒转化带Cas9片段的产朊假丝酵母；S7、成熟重组质粒和供体转化携带Cas9的产朊假丝酵母；检测敲除或敲除并引入外源基因的基因表达变化或表型变化验证Cas9介导产阮假丝酵母基因敲除是否可行。
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公开(公告)号：CN103103139B
公开(公告)日：2015-06-17
申请号：CN201310033518.0
申请日：2013-01-29
Applicant: 广州分子生物技术有限公司 , 暨南大学
CPC classification number: Y02E50/16
Abstract: 本发明涉及遗传工程和发酵工程领域，公开了一种能降解无定形纤维素的基因重组酿酒酵母。该基因重组酿酒酵母是将内切β-1,4-葡聚糖酶（EG）基因和β-葡萄糖苷酶（BGL）基因通过酿酒酵母表达载体同时转入酿酒酵母并获得正确的分泌表达而构建成的。该基因重组酿酒酵母可利用无定形纤维素做原料生产乙醇且具有操作简便、节能降耗、绿色环保的特点，在新一代石油替代产品——纤维素燃料乙醇的研制方面具有积极的推动作用。
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公开(公告)号：CN1167799C
公开(公告)日：2004-09-22
申请号：CN00114010.8
申请日：2000-01-07
Applicant: 广州暨南大学医药生物技术研究开发中心 , 上海万兴生物制药有限公司
Abstract: 本发明涉及生产酸性成纤维细胞生长因子的方法，特别是涉及利用分子伴侣与人酸性成纤维细胞生长因子在原核生物体内的共表达，以生产可溶性酸性成纤维细胞生长因子蛋白的方法。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103382444B
公开(公告)日：2015-03-25
申请号：CN201310033477.5
申请日：2013-01-29
Applicant: 广州分子生物技术有限公司 , 暨南大学
Abstract: 本发明涉及遗传工程和发酵工程领域，具体公开了一种能降解结晶纤维素的基因重组酿酒酵母。该基因重组酿酒酵母是将内切β-1,4-葡聚糖酶基因、外切β-1,4-葡聚糖酶基因和β-葡萄糖苷酶基因按照1:3:2的比例通过酿酒酵母表达载体同时转入酿酒酵母并获得正确的分泌表达而构建成的。本发明将上述三种酶基因按1:3:2的比例同时转入酿酒酵母中实现分泌表达，从而使得本发明的重组酵母能够按1:3:2的最佳协同作用比例同时分泌EG、CBH、BGL三种纤维素酶，因此能够较高效地降解结晶纤维素，进一步提高了纤维素-乙醇的转化效率。
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公开(公告)号：CN102181468A
公开(公告)日：2011-09-14
申请号：CN201110028345.4
申请日：2011-01-26
Applicant: 暨南大学
IPC: C12N15/70 , C07K14/395 , C07K1/22 , C12R1/865
Abstract: 本发明公开了酿酒酵母金属硫蛋白成熟肽的高效表达纯化方法。本发明方法是将酿酒酵母金属硫蛋白成熟肽的编码序列通过原核表达质粒pTWIN1转入到大肠杆菌中，构建得到的重组大肠杆菌可以通过IPTG诱导表达可溶性融合蛋白CBD-intrin1-MT。该融合蛋白中的CBD结构与能与几丁质柱结合，内含肽与金属硫蛋白成熟肽连接处发生自剪切作用，获得游离的酿酒酵母金属硫蛋白成熟肽。本发明方法生产的酿酒酵母金属硫蛋白成熟肽与酿酒酵母的天然产物具有完全相同的氨基酸结构，安全可靠，具有清除自由基和吸附重金属的能力，在医药、食品、化妆品或重金属污染治理等领域有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN101319225B
公开(公告)日：2011-04-20
申请号：CN200810029630.6
申请日：2008-07-22
Applicant: 暨南大学
Abstract: 本发明公开一种酿酒酵母多基因表达载体及其构建方法与应用，该表达载体是将酿酒酵母基因组rDNA的1.8kb片段、磷酸甘油激酶启动子和磷酸甘油激酶终止子三个表达元件插入到大肠杆菌-酿酒酵母穿梭表达载体中，并在启动子上游和终止子下游设计了两个同尾酶的酶切位点而构建成的。本发明的酿酒酵母多基因表达载体具有同时表达多个外源基因的特点，其载体上的同尾酶设计可以使得多个外源基因以串联表达盒的方式连接到该载体上获得同时表达。本发明的表达载体由于采用了来源于宿主酿酒酵母自身的三个表达元件，有利于外源基因在宿主中稳定、高效的表达。
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公开(公告)号：CN101319196A
公开(公告)日：2008-12-10
申请号：CN200810029631.0
申请日：2008-07-22
Applicant: 暨南大学
CPC classification number: Y02E50/16
Abstract: 本发明公开一种降解纤维素合成乙醇的转基因酿酒酵母菌及其构建方法，该转基因酿酒酵母菌是将纤维素酶系的三种酶即内切β－1，4－葡聚糖酶、外切β－1，4－葡聚糖酶和纤维二糖酶的基因通过酿酒酵母表达载体共同导入到酿酒酵母菌中，构建所得的转基因酿酒酵母可以同时高效大量表达三种纤维素酶，降解纤维素成为葡萄糖，再结合酿酒酵母本身能利用葡萄糖合成乙醇的能力，因此本发明的转基因酿酒酵母菌具有利用纤维素发酵生产乙醇的能力，可利用富含纤维素的农业废弃物做原料生产乙醇，即解决农业废弃物带来的污染，还产生燃料乙醇，形成可持续发展的能源储备，对于缓解石油资源短缺，保障国家能源安全，改善汽车尾气污染，有着不可估量的作用。
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公开(公告)号：CN111763695A
公开(公告)日：2020-10-13
申请号：CN202010739368.5
申请日：2020-07-28
Applicant: 暨南大学
Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域，公开了一种用磷酸钠预处理甘蔗渣制备乙醇燃料的方法，包括如下步骤：将甘蔗渣风干后进行粉碎，筛选密封干燥保存；将处理好的甘蔗渣放入预处理溶液中进行预处理；预处理完成的甘蔗渣加入纤维素酶进行酶解；将酶解完成的甘蔗渣进行分步或同步糖化发酵；所述预处理溶液为磷酸钠溶液；本发明采用磷酸钠作为预处理溶液，预处理过程时间短，木质素去除率高，酶解效率也得到提升，有利于提高乙醇得率，且在乙醇发酵过程中耗时也更短。
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