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公开(公告)号:CN110894536B
公开(公告)日:2023-06-06
申请号:CN201911391529.X
申请日:2019-12-30
Applicant: 新疆农业大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6851 , C12Q1/06 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于植物检疫技术领域,涉及用于杏褪绿卷叶植原体新疆分离物的定性、定量检测方法。本发明根据杏褪绿卷叶植原体与其它植原体在16S rDNA基因序列上的差异,设计了特异性检测杏褪绿卷叶植原体的引物对ACLR‑F1/ACLR‑R1和探针ACLR‑Probe,通过建立的杏褪绿卷叶植原体的实时荧光定量PCR检测方法测定Ct值,依据实时荧光定量PCR检测结果的阳性判定标准,即可实现对杏褪绿卷叶植原体的定性;再由预先建立的荧光定量PCR标准曲线方程计算出检测样品中杏褪绿卷叶植原体16S rDNA基因片段拷贝浓度,据此得到样品中杏褪绿卷叶植原体的数量,从而实现定量检测。本发明具有灵敏度高、特异性强、重复性好、高通量等优点,可广泛应用于植物检疫、植物保护、科研等领域。
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公开(公告)号:CN110894536A
公开(公告)日:2020-03-20
申请号:CN201911391529.X
申请日:2019-12-30
Applicant: 新疆农业大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6851 , C12Q1/06 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于植物检疫技术领域,涉及用于杏褪绿卷叶植原体新疆分离物的定性、定量检测方法。本发明根据杏褪绿卷叶植原体与其它植原体在16S rDNA基因序列上的差异,设计了特异性检测杏褪绿卷叶植原体的引物对ACLR-F1/ACLR-R1和探针ACLR-Probe,通过建立的杏褪绿卷叶植原体的实时荧光定量PCR检测方法测定Ct值,依据实时荧光定量PCR检测结果的阳性判定标准,即可实现对杏褪绿卷叶植原体的定性;再由预先建立的荧光定量PCR标准曲线方程计算出检测样品中杏褪绿卷叶植原体16S rDNA基因片段拷贝浓度,据此得到样品中杏褪绿卷叶植原体的数量,从而实现定量检测。本发明具有灵敏度高、特异性强、重复性好、高通量等优点,可广泛应用于植物检疫、植物保护、科研等领域。
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