公开(公告)号：CN103525923A

公开(公告)日：2014-01-22

申请号：CN201310455553.1

申请日：2013-09-30

Applicant: 新疆农业大学

Inventor： 罗明 ,  韩剑 ,  徐金红 ,  王同仁 ,  张祥林

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/11 ,  C12Q1/06

Abstract: 本发明属于植物检疫技术领域，涉及用于对枣疯病植原体进行定性、定量检测的引物、探针及其检测方法。本发明根据枣疯病植原体与其它植原体在16S rDNA基因序列上的差异，设计了特异性检测枣疯病植原体的引物对JWB Primer-F：5’-TGGTGAGGTAAAGGCTTA-3’/JWB Primer-R：5’-CTCCCGTAGGAGTTT GG-3’和TapMan探针JWB-Probe：5’-FAM-AATGTGGCTGTTCAACCTCTCA-TAMRA-3’，通过建立的枣疯病植原体的实时荧光定量PCR检测方法测定Ct值，依据实时荧光定量PCR检测结果的阳性判定标准，即可实现对枣疯病植原体的定性；再由预先建立的荧光定量PCR标准曲线方程计算出检测样品中枣疯病植原体16S rDNA基因片段拷贝浓度，据此得到样品中枣疯病植原体的数量，从而实现定量检测。本发明具有灵敏度高、特异性强、重复性好、高通量等优点，可广泛应用于植物检疫、植物保护、科研等领域。

公开(公告)号：CN103525923B

公开(公告)日：2015-04-08

申请号：CN201310455553.1

申请日：2013-09-30

Applicant: 新疆农业大学

Inventor： 罗明 ,  韩剑 ,  徐金红 ,  王同仁 ,  张祥林

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/11 ,  C12Q1/06

Abstract: 本发明属于植物检疫技术领域，涉及用于对枣疯病植原体进行定性、定量检测的引物、探针及其检测方法。本发明根据枣疯病植原体与其它植原体在16S rDNA基因序列上的差异，设计了特异性检测枣疯病植原体的引物对JWB Primer-F：5’-TGGTGAGGTAAAGGCTTA-3’/JWB Primer-R：5’-CTCCCGTAGGAGTTT GG-3’和TapMan探针JWB-Probe：5’-FAM-AATGTGGCTGTTCAACCTCTCA-TAMRA-3’，通过建立的枣疯病植原体的实时荧光定量PCR检测方法测定Ct值，依据实时荧光定量PCR检测结果的阳性判定标准，即可实现对枣疯病植原体的定性；再由预先建立的荧光定量PCR标准曲线方程计算出检测样品中枣疯病植原体16S rDNA基因片段拷贝浓度，据此得到样品中枣疯病植原体的数量，从而实现定量检测。本发明具有灵敏度高、特异性强、重复性好、高通量等优点，可广泛应用于植物检疫、植物保护、科研等领域。