一种牛肠道病毒VP1基因重组腺病毒的构建方法及其应用

    公开(公告)号:CN119144654A

    公开(公告)日:2024-12-17

    申请号:CN202310702606.9

    申请日:2023-06-14

    Abstract: 本申请提供一种牛肠道病毒VP1基因重组腺病毒的构建方法及其应用,旨在构建牛肠道病毒的结构蛋白VP1的重组腺病毒rAdv‑VP1。通过本申请提供的技术方案构建的牛肠道病毒VP1基因重组腺病毒,VP1蛋白在BEV感染的细胞中成功表达且和未感染的细胞相比蛋白量显著增多且小鼠阳性血清与VP1蛋白可以成功表达反应;并且可显著提高机体血清抗体水平,引起了良好的体液及细胞免疫反应,使用rAdv‑VP1免疫小鼠能显著性抑制BEV体内复制,可以保护小鼠减少遭受BVDV的攻击。本申请提供的技术方案构建的牛肠道病毒VP1基因重组腺病毒rAdv‑VP1对BEV起到抑制作用,可为后期该疫苗的应用提供数据,为BEV病毒活载体疫苗研究提供基础。

    一种重组腺病毒rAdv-E2及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN116987737A

    公开(公告)日:2023-11-03

    申请号:CN202310427713.5

    申请日:2023-04-20

    Abstract: 本发明提供了一种重组腺病毒rAdv‑E2及其构建方法和应用,属于基因生物工程技术领域。本发明利用AdMax系统构建得到表达BVDV囊膜蛋白E2的重组腺病毒rAdv‑E2,将其接种于293LP细胞中大量扩繁,同时检测目的基因的表达。结果显示:使用本发明的方法能够成功构建重组腺病毒rAdv‑E2,该重组腺病毒rAdv‑E2中的E2蛋白在BVDV感染的细胞中能够成功表达且和未感染的细胞相比蛋白量显著增多,能够引起了良好的体液免疫反应,细胞病变情况较少,可以有效保护BALB/c小鼠减少遭受BVDV的攻击。因此本发明中的重组腺病毒rAdv‑E2能够对BVDV起到了抑制作用,可为BVDV病毒活载体疫苗研究提供基础。

    一种牛纽布病毒可视化快速检测方法及其应用

    公开(公告)号:CN116716438A

    公开(公告)日:2023-09-08

    申请号:CN202310701802.4

    申请日:2023-06-14

    Abstract: 本发明公开了一种牛纽布病毒可视化快速检测方法及其应用,通过选用最适最佳匹配检测引物,优化检测体系;本申请提供给的检测方法检测结果为可视化荧光,BNeV的灵敏度为10copies/μL,具有良好的特异性和重复性;现有PCR检测106份腹泻样本时,BNeV阳性检出率为7.55%;而使用本申请提供的检测方法检测106份腹泻样本时,BNeV阳性检出率为9.68%,提高检出率1.28%;本申请建立的检测方法比现有PCR方法更加灵敏、高效、稳定,可用于BNeV的可视化快速检测,为犊牛腹泻的病原鉴别诊断提供了技术支持。

    一株E种BEV新强毒株及其分离方法与应用

    公开(公告)号:CN112961836B

    公开(公告)日:2023-07-04

    申请号:CN202110212912.5

    申请日:2021-02-25

    Abstract: 本发明具体提供一株新强毒株牛肠道病毒BEV新疆分离株BL311保藏号为CCTCC NO:V202098,毒株接种至MDBK细胞培养24h后可见明显的细胞变圆、碎裂、脱落等严重的致细胞病变效应;测定该毒株的滴度为1×1016.1TCID50/0.1mL;理化性质检测发现该病毒对乙醚、氯仿等有机溶剂有抵抗力,56℃处理或紫外线照射1h可使病毒失去活性;电镜观察该病毒为直径约25~30nm的球形颗粒;测序发现分离株基因组全长7412nt;遗传进化分析显示该分离株属于BEV‑E3型;感染BALB/c小鼠后,剖检表现为器官肿大出血等症状;镜检可见炎性细胞浸润、出血等变化。对于牛肠道病毒相关疾病的防治,疫苗制备以及模型动物构建等领域具有良好应用前景。

    一种调控马疱疹病毒1型复制的组合物及其应用

    公开(公告)号:CN115887699A

    公开(公告)日:2023-04-04

    申请号:CN202211731032.X

    申请日:2022-12-30

    Abstract: 本发明旨在提供一种调控马疱疹病毒1型复制的组合物,采用涉及突触小泡循环的调节、细胞凋亡、骨髓细胞分化的调节、线粒体细胞色素c释放的正调控、与弹性纤维相关的分子、神经胶质细胞迁移的负调控、周细胞分化、膜内陷的调节、染色体浓缩等过程,以及维生素消化吸收、蛋白酶体、丙酸代谢、初级胆汁酸生物合成、同源重组、脂肪酸延伸、柠檬酸循环、丁酸代谢、基础转录因子、氨酰基‑trna生物合成等通路中相关关键基因组合物,优选Plekhg5、Alox15、Slc35a2、Olfr1090、Psmc2、Arhgef38、Gpr56、Gm14548、Mrpl54、Sdk1基因中的一种或多种的混合物,通过应用,能够改变与病毒存活密切相关的宿主蛋白的表达水平,进而来实现调节病毒复制的目的,对于预防和控制马疱疹病毒1型的流行具有重要意义。

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