-
公开(公告)号:CN119552877A
公开(公告)日:2025-03-04
申请号:CN202411785925.1
申请日:2024-12-06
Applicant: 新乡医学院
IPC: C12N15/12 , C12N15/113 , C12N15/85 , C12N5/10 , C07K14/765 , C07K16/24
Abstract: 本发明涉及重组蛋白表达及细胞培养技术领域。本发明提供了ANXA1基因作为重组蛋白表达调控靶点的应用以及调控该基因核酸片段、质粒和制备获得的CHO细胞系。本发明通过沉默/抑制CHO细胞ANXA1基因表达,调控细胞增殖能力,提升重组蛋白产量;具体将靶向ANXA1基因的shRNA片段插入整合到piggyBac转座子载体中,构建shRNA转座子载体;通过PBase持续高效催化shRNA转座子载体整合到CHO细胞的基因组中,实现CHO细胞中该基因的持续干扰效果。本发明构建的CHO细胞系能够显著降低ANXA1的mRNA和蛋白表达水平,作为重组蛋白表达用宿主细胞,成倍提升重组蛋白表达量。
-
公开(公告)号:CN115786240A
公开(公告)日:2023-03-14
申请号:CN202211614585.7
申请日:2022-12-15
Applicant: 新乡医学院
IPC: C12N5/071 , C12P21/02 , C07K14/765
Abstract: 本发明提供了一种中国仓鼠卵巢细胞外泌体的提取方法及其应用,属于基因工程技术领域。本发明采用差速超速离心法提取中国仓鼠卵巢细胞的外泌体,通过简单操作可以获得高产量、高纯度的外泌体,将该外泌体作为细胞培养基补充添加剂,能够提高重组蛋白的表达水平,提高重组蛋白药物的生产效率和经济效益。
-
公开(公告)号:CN118240768A
公开(公告)日:2024-06-25
申请号:CN202410479968.0
申请日:2024-04-22
Applicant: 新乡医学院
Abstract: 本发明涉及重组蛋白表达及细胞培养技术领域,具体涉及一种表达重组蛋白的细胞系培养用添加剂、培养基、应用。本发明添加剂,其有效成分抑制细胞系表达LSD1和HDAC,具体选用LSD1/HDAC双靶点小分子抑制剂作为添加剂,添加应用在重组蛋白表达细胞系悬浮培养,最大单抗滴度特异性单抗产量成倍增加,最优使用浓度添加下单抗滴度增加2.64±0.28倍,特异性单抗产量增加2.97±0.15倍。本发明添加剂通过显著增加LSD1相关底物H3K4me2以及HDAC相关底物Ac‑H3K9、Ac‑H3K27的蛋白表达水平,从而增加重组单抗的产量,为应用表观调控策略提高重组蛋白的表达提供了一种有效的途径。
-
-