制备两端带有限制性内切酶粘性末端的目的DNA片段的方法

    公开(公告)号:CN102181430A

    公开(公告)日:2011-09-14

    申请号:CN201110047644.2

    申请日:2011-02-28

    Abstract: 本发明公开了一种制备两端带有限制性内切酶粘性末端的目的DNA片段的方法。本发明中,根据骨架载体上预期插入的多克隆位点设计两对引物,以含有目的基因的DNA为模板,分别用两对引物进行PCR扩增,得到两种PCR扩增产物,将两种PCR扩增产物混合后依次进行变性和退火,得到目的DNA片段(两端带有相应限制性内切酶的粘性末端,中间为目的基因),目的DNA片段可以定向克隆至骨架载体的预期多克隆位点。与传统PCR产物克隆方法相比,本发明所提供的克隆方法简单易行,成本低,效率高,通用性好,可以广泛应用于PCR产物的快速定向克隆。

    一种文竹中期染色体的荧光原位杂交方法

    公开(公告)号:CN106399499A

    公开(公告)日:2017-02-15

    申请号:CN201610826372.9

    申请日:2016-09-18

    CPC classification number: C12Q1/6895 C12Q1/6841 C12Q2563/107

    Abstract: 本发明提供了一种文竹中期染色体的荧光原位杂交方法,其采用酶解滴片法制备文竹中期染色体标本,该方法能够获得高质量的文竹染色体制片;在此基础上,采用荧光素标记45S rDNA或/和5S rDNA探针;最后进行染色体荧光原位杂交;探针杂交染色体后,荧光信号可被直接检测,从而确定目的DNA片段在染色体上的拷贝数及位置。采用本发明的制片及荧光原位杂交方法所获得的文竹染色体形态完好,杂交特异性高,重复性好,操作步骤简单,可节约大量的时间,能够用于文竹染色体鉴定和结构研究,为天门冬属的进化研究等提供了新的途径。

    一种测定化妆品中激素残留量的方法

    公开(公告)号:CN103901126A

    公开(公告)日:2014-07-02

    申请号:CN201410013942.3

    申请日:2014-01-14

    Abstract: 本发明建立一种高效液相色谱-串联质谱同时测定化妆品中雌二醇、雌三醇、雌酮残留量的分析方法。不同品种的化妆品样品以甲醇为提取溶剂,超声提取30min,样品提取液经12000r/min的速度离心20min。选择乙腈和水(40∶60体积比)为流动相进行等梯度洗脱,流速为0.2mL/min,柱温为25℃,采用EclipseXDB-C18(2.1mm*150mm,5μm粒径)色谱柱进行分离。结果表明:三种激素的线性回归方程相关系数R在0.9983~0.9998之间,回收率在95.21%~106.19%之间。精密度在1.70%~4.82%之间。该方法简便,灵敏,快速,可靠,重现性好,适用于化妆品中激素的含量分析检测。

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