公开(公告)号：CN117925715A

公开(公告)日：2024-04-26

申请号：CN202410100055.3

申请日：2024-01-24

Applicant: 新乡医学院

Inventor： 乔梁 ,  林俊堂 ,  尚晓迪 ,  闫欣 ,  康静 ,  邵肖楠 ,  娄建行 ,  管丽红 ,  杨慈清 ,  李小英

IPC: C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  C12N15/12 ,  C12Q1/02 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR/Cas9构建Npc1及Npc1/Trem2基因敲除细胞系的方法，该细胞系采用以下步骤制备：靶点设计及sgRNA序列合成；载体构建；细胞转染；单克隆筛选；敲除细胞系鉴定后获得Npc1基因敲除成功的单克隆细胞系；在Npc1基因敲除的BV2细胞系基础上，重复上述步骤获得Npc1/Trem2双基因敲除成功的单克隆细胞系。本发明建立的Npc1及Npc1/Trem2基因敲除的BV2细胞系，将为深入研究C1型尼曼匹克病的疾病机制、基因功能及以Trem2为靶点进行干预等提供更直接有效的细胞研究和干预模型，具有较大的应用研究价值。