公开(公告)号：CN107880134A

公开(公告)日：2018-04-06

申请号：CN201711126059.5

申请日：2017-11-15

Applicant: 扬州大学

Inventor： 张新跃 ,  张智萍 ,  何妍之 ,  黄岳 ,  陈磊 ,  丁笠 ,  刘雅娴

IPC: C07K19/00 ,  C12N9/02 ,  C12N9/10 ,  C12N15/70 ,  C12P17/06

CPC classification number: C12N9/0071 ,  C07K2319/21 ,  C07K2319/35 ,  C12N9/1029 ,  C12N15/62 ,  C12N15/70 ,  C12P17/06 ,  C12Y114/11009 ,  C12Y203/01041

Abstract: 本发明公开了一种酶促合成山奈酚的方法，其中涉及两种融合蛋白TrxA-His-F3H、TrxA-His-FLS1的制备及酶活性检测，并设计缓冲液体系，反应缓冲液为0.1M Tris-HCl（pH7.2），100μL反应体系中含有0.4%抗坏血酸、10%甘油、8.2 mMα-酮戊二酸、0.01 mM硫酸亚铁、0.5 mM柚皮素、3.3μg TrxA-His-F3H、1.8μg TrxA-His-FLS1；并通过优化反应体系pH值、反应时间和温度，在体外建立一步高效合成山奈酚的方法。CCK-8法检测合成的山奈酚对肿瘤细胞生长的抑制作用。

公开(公告)号：CN107880134B

公开(公告)日：2021-03-23

申请号：CN201711126059.5

申请日：2017-11-15

Applicant: 扬州大学

Inventor： 张新跃 ,  张智萍 ,  何妍之 ,  黄岳 ,  陈磊 ,  丁笠 ,  刘雅娴

IPC: C07K19/00 ,  C12N9/02 ,  C12N9/10 ,  C12N15/70 ,  C12P17/06

Abstract: 本发明公开了一种酶促合成山奈酚的方法，其中涉及两种融合蛋白TrxA‑His‑F3H、TrxA‑His‑FLS1的制备及酶活性检测，并设计缓冲液体系，反应缓冲液为0.1 M Tris‑HCl（pH7.2），100μL反应体系中含有0.4%抗坏血酸、10%甘油、8.2 mMα‑酮戊二酸、0.01 mM硫酸亚铁、0.5 mM柚皮素、3.3μg TrxA‑His‑F3H、1.8μg TrxA‑His‑FLS1；并通过优化反应体系pH值、反应时间和温度，在体外建立一步高效合成山奈酚的方法。CCK‑8法检测合成的山奈酚对肿瘤细胞生长的抑制作用。