公开(公告)号：CN119464347A

公开(公告)日：2025-02-18

申请号：CN202411703022.4

申请日：2024-11-26

Applicant: 扬州大学

Inventor： 李求春 ,  曹颖倩 ,  李扬 ,  焦新安 ,  赵昌彬 ,  陈昕海

IPC: C12N15/74 ,  C12N15/65 ,  C12N15/64 ,  C12N15/90 ,  C12N1/21 ,  C12N9/22 ,  C12N15/55 ,  C12N15/113 ,  C12R1/445

Abstract: 本发明公开了基于CRISPR‑Cas9系统的噬菌体基因组编辑载体及其编辑方法和应用。本发明成功构建含有cas9基因及sgRNA元件的质粒，针对编辑位点设计特定引物，获得pTarget质粒；将供体DNA序列构建至载体上，获得pEdit质粒。将噬菌体感染含有pEdit质粒宿主菌后，通过pTarget质粒反向筛选突变噬菌体，实现对噬菌体基因组高效快速的基因编辑，包括基因缺失突变，单核苷酸替换突变以及插入突变。本发明操作简单，基因编辑效率高，促进了金黄色葡萄球菌噬菌体基因组结构解析和功能研究的发展，并为工程噬菌体的改造提供了新策略，具有广阔的应用前景和市场价值。