一种湖羊精液常温保存的稀释液配方及其稀释方法

    公开(公告)号:CN110959607A

    公开(公告)日:2020-04-07

    申请号:CN201911343515.0

    申请日:2019-12-24

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供了一种湖羊精液常温保存的稀释液配方及其稀释方法,使用五种稀释液对湖羊精液进行常温保存,采用计算机精子辅助分析仪(CASA)、考马斯亮蓝染色和低渗试验等方法对精液保存期间的活率、活力、质膜完整率、顶体完整率、存活时间以及一些运动参数进行检测,本发明筛选得到的稀释液配方,在精液保存期间其活率、活力缓慢平稳下降,活力在0.6以上的时间可以达到3天以上,其总存活时间可以达到17天以上。本发明旨在客观的评价并筛选出一种湖羊精液常温保存效果最好的稀释液配方,以期为湖羊精液保存技术在生产中的推广应用提供参考,进一步提高湖羊的养殖规模。

    一种适用于羔羊卵母细胞体外成熟培养的方法及培养液

    公开(公告)号:CN105255823A

    公开(公告)日:2016-01-20

    申请号:CN201510859271.7

    申请日:2015-11-30

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明属于生物学领域,具体涉及一种适用于羔羊卵母细胞体外成熟培养的方法及培养液。所述的培养液是在TCM199成熟基础液中分别添加5.0μg/mL的FSH和5.0μg/mL LH。该培养液用于羔羊卵母细胞体外成熟培养,结果显示羔羊卵母细胞成熟率明显高于其他,提高了羔羊卵母细胞的成熟效果,为后续的胚胎培养实验奠定基础。

    一种可提高绵羊精液冷冻保存效果的稀释液及精液保存方法

    公开(公告)号:CN118202996A

    公开(公告)日:2024-06-18

    申请号:CN202410276913.X

    申请日:2024-03-12

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种可提高绵羊精液冷冻保存效果的稀释液及精液冷冻保存方法,属于生物工程技术领域。本发明通过该稀释液并结合相应的降温方式和时间以及适当的平衡时间对绵羊精液进行冷冻保存,解冻后的精子活率达到68%,解冻后的精子活力达到52%,解冻精子质膜完整率达到35%,解冻精子顶体完整率达到80%。表明采用本发明稀释液和降温方式得到的绵羊冻精在精子活率、活力、质膜完整率和顶体完整率等指标上得到了显著提升,为完善绵羊精液超低温冷冻保存程序和人工授精技术具有重要意义。

    一种绵羊精液常温保存的稀释液的制备方法

    公开(公告)号:CN111226907A

    公开(公告)日:2020-06-05

    申请号:CN202010068814.4

    申请日:2020-01-21

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种绵羊精液常温保存的稀释液的制备方法,包括以下步骤:步骤1)、将30.2~31.2gTris、15.9~16.9g柠檬酸、19.5~20.5g果糖、0.3~0.4g青霉素钠、0.6~0.7g链霉素硫酸盐溶解于1000mL灭菌的超纯水中,得到基础稀释液;步骤2)、当取95mL基础稀释液,向95mL基础稀释液中添加5mL的卵黄,得到第一稀释液;当取85mL基础稀释液,向85mL基础稀释液中添加15mL的卵黄,得到第二稀释液;当取80mL基础稀释液,向80mL基础稀释液中添加20mL的卵黄,得到第三稀释液;将第一稀释液、第二稀释液、第三稀释液放入冰箱使其充分溶解,然后10000r/min、4℃条件下离心20min,离心后取出上清液,即得到浓度为5%卵黄稀释液、浓度为15%卵黄稀释液、浓度为20%卵黄稀释液。通过发明提供的稀释液,提高了精液保存效果。

    组织块法培养长江三角洲白山羊毛囊干细胞的方法

    公开(公告)号:CN109880794A

    公开(公告)日:2019-06-14

    申请号:CN201910203247.6

    申请日:2019-03-18

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供了组织块法培养长江三角洲白山羊毛囊干细胞的方法,采用该方法分离细胞系生长分裂状态良好,呈现典型的铺路石状,原代细胞爬出组织块的速度较快,第三天就可以观察到有细胞爬出组织块生长,第四天就可以在显微镜视野中观察到每块组织块周围都有较多的细胞爬出组织块,第五天就可以在显微镜视野下观察到大片的的细胞团围绕在组织块周围,此时进行第一次传代培养。所构建的长江三角洲白山羊毛囊干细胞系活力旺盛、毛囊干细胞标记物阳性率高,可为研究皮肤细胞基因表达与通路调控,皮肤附属结构的生长与分化机制,尤其是皮肤主要细胞间的相互作用机制研究提供良好的实用模型。

    一种适用于兔精子体外获能方法及培养液配方

    公开(公告)号:CN104059878A

    公开(公告)日:2014-09-24

    申请号:CN201410287368.0

    申请日:2014-06-23

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种适用于兔精子体外获能方法及培养液配方。本发明在BO获能液中添加10μmol/L EGCG,用于精子体外获能处理,且在BO获能液中添加10μmol/L EGCG,BO获能液配方为:NaCl 6.5453mg/mL,KCl 0.2997mg/mL,NaH2PO4·H2O 0.1145mg/mL,MgCl2·6H2O 0.1057mg/mL,CaCl2·2H2O 0.330mg/mL,葡萄糖2.518mg/mL,0.2%酚红4%,100IU/mL青霉素,100IU/mL链霉素,NaHCO33.1080mg/mL,丙酮酸钠0.1380mg/mL,肝素20μg/mL,BSA20mg/mL。本发明克服了现有的精子体外获能过程中,由于精子密度较大,精子自身代谢产生的氧自由基积累较多的缺陷。本发明利用成年新西兰白兔公免,对其采精后,在BO获能液中添加不同浓度EGCG(0μM、10μM、15μM、20μM、25μM),研究其对兔精子获能效果的影响,得出最佳EGCG添加浓度,建立一种高效的兔体外获能培养体系。

    一种山羊朊病毒基因敲除方法

    公开(公告)号:CN102277356A

    公开(公告)日:2011-12-14

    申请号:CN201110213801.2

    申请日:2011-07-28

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明属于生物学领域,具体涉及一种山羊朊病毒siRNA以及一种山羊朊病毒基因敲除方法。所说的山羊朊病毒siRNA,其正义链序列如SEQIDNO.1所示,反义链序列如SEQIDNO.2所示。所说的山羊朊病毒基因敲除方法,是将所述山羊朊病毒siRNA通过载体导入靶细胞内表达,降低山羊朊病毒mRNA水平。本发明为后续的抗朊病毒转基因山羊育种材料的获得提供了技术支撑。

    一种湖羊精液冷冻解冻方法及其稀释液

    公开(公告)号:CN118160714A

    公开(公告)日:2024-06-11

    申请号:CN202410291059.4

    申请日:2024-03-14

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种湖羊精液冷冻解冻方法及其稀释液;属于动物繁殖领域,所述湖羊精液冷冻稀释液包括冷冻基础稀释液、冷冻Ⅰ液和冷冻Ⅱ液;冷冻基础稀释液包括Tris、柠檬酸及葡萄糖;冷冻Ⅰ液包括冷冻基础稀释液和卵黄;冷冻Ⅱ液包括冷冻Ⅰ液和甘油;其操作步骤:将湖羊精液与冷冻Ⅰ液冷藏后再与冷冻Ⅱ液二次冷藏;将冷藏的湖羊精液灌装到细管中封口、液氮熏蒸;将细管投入至水浴锅中晃动解冻后剪开;将含有冷冻基础稀释液的离心管预热,将湖羊精液释放至离心管中进行孵育,得到解冻后的湖羊精液。本发明提供的湖羊精液冷冻稀释液和解冻方法显著提高了解冻后的精子活率、活力、质膜完整性以及顶体完整性,有利于湖羊精液的冷冻保存以及种质资源保护。

    羊类精液稀释液及其制备方法

    公开(公告)号:CN114788516A

    公开(公告)日:2022-07-26

    申请号:CN202210378603.X

    申请日:2022-04-08

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明属于羊类繁殖技术领域,涉及羊类精液稀释液,包括以下质量份数的组分:柠檬酸1~2份、果糖1.5~2.5份、Tris2~4份、卵黄5~18份、青霉素钠0.1~0.4份、硫酸链霉素0.1~0.4份和超纯水100份。本发明有效的延长了羊类精液的保存时间,保持精子运动性能的缓慢稳定下降,减缓了对精子结构如质膜和顶体的损伤。即本发明提供了适合羊类精液保存的稀释液,显著地提高了精液保存质量。

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