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公开(公告)号:CN108559727A
公开(公告)日:2018-09-21
申请号:CN201810024255.X
申请日:2018-01-10
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C12N5/0609 , C07K14/47 , C12N2510/00 , C12Q1/6888 , C12Q2600/158 , G01N33/5005
Abstract: 本发明属于生物学领域,具体涉及一种促进山羊卵泡颗粒细胞增殖的方法。该方法是特异性的增加CDC25C基因表达量以促进山羊卵泡颗粒细胞增殖。具体是目的片段CDC25C基因与pCMV-HA质粒连接,构建过表达载体pCMV-HA-CDC25C,并将阳性重组质粒导入山羊卵泡颗粒细胞内,以特异性提高CDC25C基因在山羊卵泡颗粒细胞中表达水平,并促进山羊卵泡颗粒细胞的增殖。本发明方法能促进山羊卵泡颗粒细胞的增殖;为后续卵母细胞体外培养体系的改良提供了技术支撑。
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公开(公告)号:CN109880794A
公开(公告)日:2019-06-14
申请号:CN201910203247.6
申请日:2019-03-18
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/071
Abstract: 本发明提供了组织块法培养长江三角洲白山羊毛囊干细胞的方法,采用该方法分离细胞系生长分裂状态良好,呈现典型的铺路石状,原代细胞爬出组织块的速度较快,第三天就可以观察到有细胞爬出组织块生长,第四天就可以在显微镜视野中观察到每块组织块周围都有较多的细胞爬出组织块,第五天就可以在显微镜视野下观察到大片的的细胞团围绕在组织块周围,此时进行第一次传代培养。所构建的长江三角洲白山羊毛囊干细胞系活力旺盛、毛囊干细胞标记物阳性率高,可为研究皮肤细胞基因表达与通路调控,皮肤附属结构的生长与分化机制,尤其是皮肤主要细胞间的相互作用机制研究提供良好的实用模型。
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公开(公告)号:CN107630019A
公开(公告)日:2018-01-26
申请号:CN201710999970.0
申请日:2017-10-24
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/87 , C12N5/10
Abstract: 本发明属于生物学领域,具体涉及一种特异性降低山羊卵泡颗粒细胞CPEB1基因和蛋白表达水平的siRNA及方法。所述的siRNA的序列如SEQ ID No.9和SEQ ID No.10所示。所述的特异性降低山羊卵泡颗粒细胞CPEB1基因和蛋白表达水平的方法,是将SEQ ID No.9和SEQ ID No.10所示序列与转染试剂混合加入山羊卵泡颗粒细胞培养液中培养卵泡颗粒细胞,降低CPEB1基因和蛋白表达水平。采用本发明的方法,可以特异性降低山羊卵泡颗粒细胞CPEB1基因和蛋白表达水平。
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公开(公告)号:CN110157736B
公开(公告)日:2021-06-04
申请号:CN201910474606.1
申请日:2019-06-03
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/861
Abstract: 本发明涉及一种促进山羊毛囊干细胞增殖的方法,提供了一段可以特异性的降低山羊毛囊干细胞中CMTM3基因mRNA的表达水平的shRNA,该片段与载体pDC316‑ZsGreen‑shRNA连接组成干扰载体pDC316‑ZsGreen‑shRNA‑CMTM3,将该干扰载体导入到山羊毛囊干细胞中可以降低基因CMTM3 mRNA的表达水平,从而促进毛囊干细胞增殖。在培养基中添加生理浓度的雄激素也能增加细胞活力,促进毛囊干细胞增殖,减少细胞凋亡率。当二者同时作用时在所有处理组中促增殖效果最明显,二者作用相互协同。本发明的shRNA为后续转基因山羊育种材料的获得提供了技术支撑。
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公开(公告)号:CN110157736A
公开(公告)日:2019-08-23
申请号:CN201910474606.1
申请日:2019-06-03
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/861
Abstract: 本发明涉及一种促进山羊毛囊干细胞增殖的方法,提供了一段可以特异性的降低山羊毛囊干细胞中CMTM3基因mRNA的表达水平的shRNA,该片段与载体pDC316-ZsGreen-shRNA连接组成干扰载体pDC316-ZsGreen-shRNA-CMTM3,将该干扰载体导入到山羊毛囊干细胞中可以降低基因CMTM3 mRNA的表达水平,从而促进毛囊干细胞增殖。在培养基中添加生理浓度的雄激素也能增加细胞活力,促进毛囊干细胞增殖,减少细胞凋亡率。当二者同时作用时在所有处理组中促增殖效果最明显,二者作用相互协同。本发明的shRNA为后续转基因山羊育种材料的获得提供了技术支撑。
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公开(公告)号:CN109355255A
公开(公告)日:2019-02-19
申请号:CN201810931060.3
申请日:2018-08-15
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/0775 , A01N1/02
Abstract: 本发明提供了长江三角洲白山羊毛囊干细胞分离培养方法,采用该方法分离细胞系生长分裂状态良好且可以获得较纯的毛囊干细胞,呈现典型的铺路石状,原代细胞生长速度较快,第三天就可以观察到细胞出现聚集性生长,第四天就可以看到较多呈现聚集性生长的细胞团块,第五天就可以长满培养皿的60%-70%,且毛囊干细胞标记物阳性率达到90%以上。经细胞染色体分析、毛囊干细胞标记物检测,以及细胞活力检测等结果表明,所构建的长江三角洲白山羊毛囊干细胞系活力旺盛、毛囊干细胞标记物阳性率高,可为研究皮肤细胞基因表达与通路调控,皮肤附属结构的生长与分化机制,尤其是皮肤主要细胞间的相互作用机制研究提供良好的实用模型。
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公开(公告)号:CN108018287A
公开(公告)日:2018-05-11
申请号:CN201810023079.8
申请日:2018-01-10
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/113 , C12N5/10
Abstract: 本发明属于生物学领域,具体涉及一种在山羊卵泡颗粒细胞中特异性地降低CDC25C基因表达量以抑制山羊卵泡颗粒细胞的增殖的特异siRNA及方法。所述的抑制山羊卵泡颗粒细胞增殖的特异siRNA,其序列如SEQ ID No.7和8所示。将所述的特异的siRNA与转染试剂混合加入山羊卵泡颗粒细胞培养液中培养卵泡颗粒细胞一段时间后,检测山羊卵泡颗粒细胞内CDC25C基因表达水平以及细胞周期的变化情况。结果表明siCDC25C‑2能特异性地降低山羊卵泡颗粒细胞中CDC25C的表达量,从而抑制山羊卵泡颗粒细胞的增殖,为后续卵母细胞体外培养体系的改良提供了技术支撑。
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公开(公告)号:CN209019051U
公开(公告)日:2019-06-25
申请号:CN201820404488.8
申请日:2018-03-24
Applicant: 扬州大学
IPC: A61D19/02
Abstract: 一种新型兔用采精器,属于畜牧养殖技术领域。包括硬质塑料外壳、橡胶内胎、加热装置、温控芯片、离心管,硬质塑料外壳底部设有连接细管,硬质塑料外壳与橡胶内胎之间形成注水空腔,离心管与连接细管底部相连,所述硬质塑料外壳的侧壁设有注水口以及USB线,加热装置置于硬质塑料外壳内侧壁,温控芯片分别连接USB线、加热装置。本实用新型既能操作简便,同时又能保证采精所需适当压力和温度的采精装置,可以满足生产和实验上连续操作,易于清洗要求的采精装置。
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