公开(公告)号：CN115980344A

公开(公告)日：2023-04-18

申请号：CN202210805714.4

申请日：2022-07-08

Applicant: 扬州大学

Inventor： 叶建强 ,  张辛耘 ,  高巍 ,  任丹 ,  秦爱建 ,  万志敏 ,  李拓凡 ,  谢泉 ,  邵红霞

IPC: G01N33/569 ,  G01N33/58 ,  C07K14/08 ,  C12N15/866 ,  C12N15/40 ,  C07K1/22

Abstract: 本发明涉及一种基于昆虫细胞表达产物的检测新型鹅星状病毒抗体的ELISA试剂盒，本发明的原理是将表达新型GAstV的ORF2重组蛋白的杆状病毒感染Sf9细胞，并以镍柱亲和层析法纯化感染细胞裂解液上清中的ORF2重组蛋白，将纯化的重组蛋白分别作为包被抗原组装检测新型GAstV抗体的间接ELISA试剂盒。研究结果表明，建立的检测新型GAstV抗体的间接ELISA试剂盒具有良好的特异性和灵敏性，在新型GAstV病毒流行病学调查中具有良好的应用价值。

公开(公告)号：CN114457115A

公开(公告)日：2022-05-10

申请号：CN202210220996.1

申请日：2022-03-08

Applicant: 扬州大学

Inventor： 高巍 ,  张辛耘 ,  叶建强 ,  任丹 ,  秦爱建 ,  万志敏 ,  李拓凡 ,  谢泉 ,  邵红霞

IPC: C12N15/866 ,  C12N15/40 ,  C12N7/01

Abstract: 本发明涉及一种表达新型鹅星状病毒衣壳蛋白ORF2的重组杆状病毒的构建方法，包括以下步骤：（1）构建GAstV‑ORF2基因重组杆状病毒表达载体：（2）表达重组GAstV‑ORF2蛋白的杆状病毒包装和传代：（3）将携带有GAstV‑ORF2基因的杆状病毒质粒转染进Sf9细胞，并在27℃无CO2培养箱中培养5‑7天，每天观察细胞病变情况；当细胞病变达到70%时收集细胞上清，放入‑80℃保存；进行病毒的传代，传至第3代时，作为种毒保存并扩大培养，得到表达新型鹅星状病毒衣壳蛋白ORF2的重组杆状病毒。本发明的原理是通过扩增鹅星状病毒衣壳蛋白ORF2全长片段，构建杆状病毒重组载体，转染Sf9细胞，获得能够表达衣壳蛋白ORF2的杆状病毒。