Patent search ap:("扬州大学") AND inv:"周琦琦" Page 1

1.

发明公开
一种NAMPT基因修饰的人脐带间充质干细胞外泌体的制备方法无效

公开(公告)号：CN113234759A

公开(公告)日：2021-08-10

申请号：CN202110552148.6

申请日：2021-05-20

Applicant: 扬州大学

Inventor： 周琦琦 , 崔恒宓 , 刘洋洋

IPC: C12N15/85 , C12N5/10 , C12N15/54

Abstract: 本发明涉及一种NAMPT基因修饰的人脐带间充质干细胞外泌体的制备方法，包括以下步骤：1）、针对人AAVS1位点设计sgRNA并构建sgRNA‑CAG‑hCas9载体；2）、将sgRNA‑CAG‑hCas9载体转染至293T细胞验证sgRNA切割效率；3）、构建含NAMPT基因、抗性基因neo、转录终止序列BGH polyA、启动子EF‑1A重组载体；4）、将步骤2）中切割效率好的sgRNA‑CAG‑hCas9载体与步骤3）中构建的重组载体共转染间充质干细胞，G418筛选得到稳转细胞系；5）、收集高表达NAMPT稳转细胞系培养基，利用外泌体试剂盒提取，得到高表达NAMPT基因的人脐带间充质干细胞外泌体。通过本发明，较于慢病毒构建方法更加安全。

Patent Agency Ranking