一种鱼类高脂存储肝细胞分离和培养方法

    公开(公告)号:CN111849862A

    公开(公告)日:2020-10-30

    申请号:CN202010590409.9

    申请日:2020-06-24

    Abstract: 本发明公开了一种鱼类高脂存储肝细胞分离和培养方法。a、选取45-55d虾虎鱼幼鱼,在无菌条件下获得其肝脏组织,将肝脏组织分散成块,获得组织块;b、将孔径20μm的细胞筛置于胰蛋白酶终止液中,在孔径20μm的细胞筛上方设置有孔径50μm的细胞筛;c、将组织块置于孔径50μm的细胞筛中,持续添加胰蛋白酶液于孔径50μm的细胞筛中消化组织块,流动持续消化,收集位于孔径20μm的细胞筛上的细胞,用10%FBS清洗,获得高脂存储肝细胞;d、将高脂存储肝细胞接种到培养基中培养。本发明的高脂存储肝细胞能贴壁后稳定一周,脂肪细胞可存活1个月左右,期间可用于细胞水平的实验,从而解决鱼类成熟脂肪细胞分离和培养困难的问题。

    一种利用斑马鱼睡眠觉醒频次筛选促进睡眠药物的方法

    公开(公告)号:CN119524164A

    公开(公告)日:2025-02-28

    申请号:CN202411351941.X

    申请日:2024-09-26

    Abstract: 本发明属于药物筛选技术领域,公开了一种利用斑马鱼睡眠觉醒频次筛选促进睡眠药物的方法,具体公开了一种筛选改善睡眠药物的方法,包括以下步骤:以斑马鱼为模型生物,以斑马鱼睡眠和/或觉醒频次作为评价指标,筛选可促进睡眠的药物。本发明利用斑马鱼睡眠和/或觉醒频次筛选改善睡眠药物的方法特别适合用于改善睡眠药物的快速筛选。所使用的斑马鱼是国际通用脊椎模式动物,背景清晰、易于获取、质量稳定可控,实验结果可信度高、重复性好,便于大规模推广应用。

    一种基于实验鱼胚胎和基因表达快速筛选脂代谢药物的方法

    公开(公告)号:CN111647639B

    公开(公告)日:2023-12-05

    申请号:CN202010597906.1

    申请日:2020-06-28

    Abstract: 本发明公开了一种基于实验鱼胚胎和基因表达快速筛选脂代谢药物的方法。以诸氏鲻虾虎鱼(Mugilogobius chulae)的胚胎作为实验材料,用待测药物浸泡胚胎,检测药物是否对诸氏鲻虾虎鱼胚胎的脂代谢产生影响,进而筛选脂代谢药物。本发明能有效降低检测成本,较传统检测方法节省成本60%以上;同时在保证实验数据准确、可重复的基础上,针对取材和基因检测关键环节减少了时间点,为高效快速的批量检测方(56)对比文件辛胜昌;赵艳秋;李松;林硕;仲寒冰.斑马鱼模型在药物筛选中的应用.遗传.2012,(第09期),第1145页右栏第3段,第1147页2.2.卢晶;吴谦;谢荣荣;仇海燕;程呈;杨金奎.β位淀粉样前体蛋白裂解酶2基因敲除斑马鱼动物模型的构建及其初步应用.首都医科大学学报.2015,(第06期),第839-843页.和兴萍;罗燕;李雪;陈朝银;赵声兰.几种降脂减肥实验动物模型的建立与比较.中华中医药学刊.2017,(第07期),第117-121页.

    一种鉴别虾虎鱼性别的方法

    公开(公告)号:CN111763744B

    公开(公告)日:2023-01-31

    申请号:CN202010590772.0

    申请日:2020-06-24

    Abstract: 本发明公开了一种鉴别虾虎鱼性别的方法。本发明的鉴别虾虎鱼性别的鉴别引物,具体如下:上游引物:5’‑CAGATGCCTCATAGTGATGGACG‑3’,具体如SEQ ID NO:1所示;下游引物:5’‑GCTGCTGTTGTTGCTGCTGTG‑3’,具体如SEQ ID NO:2所示。本发明利用鉴别虾虎鱼性别的鉴别引物,按照本发明的方法可以快速,准确的鉴别出虾虎鱼的性别。与传统利用形态学鉴别雌雄的方法相比,利用分子生物学层次的手段,可克服因性腺未发育成熟或无明显第二性征等无法鉴别雌雄的问题;与利用组织学切片方法鉴别雌雄的技术相比,本发明方法可明显增加检测时效,并降低检测成本。本方法是对当前虾虎鱼科鱼类性别鉴别技术的重大提升和补充。

    一种鱼类高脂存储肝细胞分离和培养方法

    公开(公告)号:CN111849862B

    公开(公告)日:2022-06-07

    申请号:CN202010590409.9

    申请日:2020-06-24

    Abstract: 本发明公开了一种鱼类高脂存储肝细胞分离和培养方法。a、选取45‑55d虾虎鱼幼鱼,在无菌条件下获得其肝脏组织,将肝脏组织分散成块,获得组织块;b、将孔径20μm的细胞筛置于胰蛋白酶终止液中,在孔径20μm的细胞筛上方设置有孔径50μm的细胞筛;c、将组织块置于孔径50μm的细胞筛中,持续添加胰蛋白酶液于孔径50μm的细胞筛中消化组织块,流动持续消化,收集位于孔径20μm的细胞筛上的细胞,用10%FBS清洗,获得高脂存储肝细胞;d、将高脂存储肝细胞接种到培养基中培养。本发明的高脂存储肝细胞能贴壁后稳定一周,脂肪细胞可存活1个月左右,期间可用于细胞水平的实验,从而解决鱼类成熟脂肪细胞分离和培养困难的问题。

    一种鉴别虾虎鱼性别的方法

    公开(公告)号:CN111763744A

    公开(公告)日:2020-10-13

    申请号:CN202010590772.0

    申请日:2020-06-24

    Abstract: 本发明公开了一种鉴别虾虎鱼性别的方法。本发明的鉴别虾虎鱼性别的鉴别引物,具体如下:上游引物:5’-CAGATGCCTCATAGTGATGGACG-3’,具体如SEQ ID NO:1所示;下游引物:5’-GCTGCTGTTGTTGCTGCTGTG-3’,具体如SEQ ID NO:2所示。本发明利用鉴别虾虎鱼性别的鉴别引物,按照本发明的方法可以快速,准确的鉴别出虾虎鱼的性别。与传统利用形态学鉴别雌雄的方法相比,利用分子生物学层次的手段,可克服因性腺未发育成熟或无明显第二性征等无法鉴别雌雄的问题;与利用组织学切片方法鉴别雌雄的技术相比,本发明方法可明显增加检测时效,并降低检测成本。本方法是对当前虾虎鱼科鱼类性别鉴别技术的重大提升和补充。

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