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公开(公告)号:CN117721246A
公开(公告)日:2024-03-19
申请号:CN202311473311.5
申请日:2023-11-07
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明属于病毒检测技术领域,公开了用于检测野生鸟类γ和δ属冠状病毒的组合物及其试剂盒和应用。具体公开了一种试剂,包括引物组和/或探针组。本发明提供的试剂可用于对δ、γ属冠状病毒进行检测,可同时快速检测鉴定禽鸟中γ冠状病毒属和δ冠状病毒属,且具备极高的检测敏感性与特异性,检测结果准确可靠。实现了在一管反应中只进行1次荧光定量PCR扩增即可对冠状病毒属的病原进行检测。
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公开(公告)号:CN114605518A
公开(公告)日:2022-06-10
申请号:CN202210299196.3
申请日:2022-03-25
Applicant: 华南农业大学 , 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: C07K14/45 , C12N15/30 , C12N15/70 , C12N15/66 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种弓形虫ROP17重组蛋白及其制备方法与应用,本发明首先对弓形虫ROP17基因进行特异性引物设计,然后以弓形虫DNA为模板扩增ROP17片段,经双酶切后连接到pET‑28a(+)表达载体中,并转化至克隆感受态细胞,提取质粒后再转化原核表达感受态细胞构建得到原核表达载体,对构建的原核表达载体诱导,纯化后制备得到弓形虫ROP17重组蛋白。本发明的融合蛋白ROP17具有较好的抗原性,可高效、高密度的捕获目标分子,达到快速、高灵敏检测弓形虫血清的目的,可适用于间接ELISA、夹心ELISA等检测方法,可准确快速地检测到弓形虫的感染,敏感性高、特异性强。
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公开(公告)号:CN114591995A
公开(公告)日:2022-06-07
申请号:CN202210197668.4
申请日:2022-03-01
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: C12N15/74 , C12N15/66 , C07K14/145 , C07K19/00 , A61K39/205 , A61P31/14 , C12R1/01
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种重组牛流行热病毒糖蛋白乳酸乳球菌载体及其构建方法和应用,本发明首先将pgsA基因连接至NICE表达系统中构建得到pgsA重组质粒,然后将牛流行热病毒的G基因连接至上述的pgsA重组质粒中,最后转化至乳酸乳球菌感受态细胞中构建得到重组牛流行热病毒糖蛋白乳酸乳球菌载体。本发明构建的重组牛流行热病毒糖蛋白乳酸乳球菌载体利用pgsA锚定蛋白的特性,将牛流行热病毒糖蛋白融合表达,使牛流行热病毒糖蛋白表达在乳酸乳球菌的外表面,不仅可以用于制备牛流行热病毒的重组G蛋白,而且可以为跨膜表达体系的建立和新型口服基因工程疫苗的研制奠定基础。
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公开(公告)号:CN114107176A
公开(公告)日:2022-03-01
申请号:CN202111525599.7
申请日:2021-12-14
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明属于细胞重组与蛋白表达技术领域,具体涉及一种稳定表达非洲猪瘟CD2v蛋白的CHO细胞系及其构建方法和应用,本发明公开了一种稳定表达非洲猪瘟CD2v蛋白的CHO细胞系,所述细胞系为中国仓鼠卵巢细胞CHO‑CD2v,于2021年11月11日送往广东省微生物菌种保藏中心保藏,保藏编号为GDMCC No:62052。本发明的细胞系是将外源基因CD2v整合入中国仓鼠基因组内已知的安全位点,从而实现转入基因的正常表达而又不影响细胞的正常生理功能,其构建过程简单,克隆准确度高。该细胞系可以用于高产CD2v蛋白,非洲猪瘟药效筛选、疫苗生产等方面,对于非洲猪瘟的诊断和疫苗生产具有非常重要的意义。
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公开(公告)号:CN109655610A
公开(公告)日:2019-04-19
申请号:CN201811424706.5
申请日:2018-11-27
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: G01N33/569 , G01N33/535 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种伪狂犬病病毒的间接ELISA检测试剂盒。包括抗原重组蛋白的制备、间接ELISA方法的建立、判定标准和临床血清学应用。所述的抗原重组蛋白的制备方法为,人工合成如SEQ ID NO:2所示的序列,构建质粒表达载体,在大肠杆菌中进行原核表达,最终用镍柱亲和纯化获得。该试剂盒用于检测伪狂犬病病毒抗体,对伪狂犬病病毒2001年以后的流行病毒具有更准确的检测效果,其准确性具体表现为,其检验结果与基于流行毒株的微量血清抗体中和试验具有更好的符合率,因此更符合临床实际的抗体保护力水平。
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公开(公告)号:CN104450781A
公开(公告)日:2015-03-25
申请号:CN201410547146.8
申请日:2014-10-15
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种过表达CIAPIN1蛋白的细胞系及其制备方法和应用;该细胞系名称为BHK-21CIAPIN1+,保藏编号为CCTCCC2014149,其表达CIAPIN1蛋白的量是正常BHK-21细胞的10倍;该细胞系的制备方法为将CIAPIN1的cDNA序列插入真核表达质粒pIRESneo中,再转染BHK-21细胞;经含G418培养液筛选后细胞经极限稀释法获得阳性单克隆细胞,即为永生化过表达CIAPIN1蛋白的细胞系。本发明细胞系培养狂犬病病毒可显著影响病毒增值滴度,对该病毒的高效培养及其灭活疫苗的生产意义重大,本发明细胞系在狂犬病病毒的培养中具有很好的应用前景。
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公开(公告)号:CN112522205A
公开(公告)日:2021-03-19
申请号:CN202011475931.9
申请日:2020-12-15
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种血管紧张素转换酶2过表达稳转细胞系及其制备方法与应用。其中,该细胞系具体为非洲绿猴肾细胞VERO‑E6‑ACE2+,于2020年9月24日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:C2020191。该细胞系可以将外源基因整合入基因组内已知的安全位点,实现转入基因的正常表达而又不影响细胞的正常生理功能。其构建过程简单,可重复性好,效率高,克隆准确度高,能高效确保正确克隆的获取。
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公开(公告)号:CN104450781B
公开(公告)日:2018-01-23
申请号:CN201410547146.8
申请日:2014-10-15
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种过表达CIAPIN1蛋白的细胞系及其制备方法和应用;该细胞系名称为BHK‑21 CIAPIN1+,保藏编号为CCTCC C2014149,其表达CIAPIN1蛋白的量是正常BHK‑21细胞的10倍;该细胞系的制备方法为将CIAPIN1的cDNA序列插入真核表达质粒pIRESneo中,再转染BHK‑21细胞;经含G418培养液筛选后细胞经极限稀释法获得阳性单克隆细胞,即为永生化过表达CIAPIN1蛋白的细胞系。本发明细胞系培养狂犬病病毒可显著影响病毒增值滴度,对该病毒的高效培养及其灭活疫苗的生产意义重大,本发明细胞系在狂犬病病毒的培养中具有很好的应用前景。
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公开(公告)号:CN117660695A
公开(公告)日:2024-03-08
申请号:CN202311635346.4
申请日:2023-11-30
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于生物检测领域,具体涉及一种用于检测猪圆环病毒3型的等温扩增试剂盒。本发明提供了一种猪圆环病毒3型(Porcine circovirus 3,PCV3)等温扩增检测引物组,包括一对外引物(LOF与LOR)和一对内引物(LIF与LIR),根据猪圆环病毒3型的保守序列设计得到。该引物组设计难度低,且保持与其他等温扩增反应如环介导等温扩增方法等相近的敏感性和特异性,可以适用于GC含量更高以及200bp以下的靶标序列,没有变性、退火过程,适合于现场检测,具有较大的应用潜力。
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公开(公告)号:CN112522205B
公开(公告)日:2023-06-02
申请号:CN202011475931.9
申请日:2020-12-15
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种血管紧张素转换酶2过表达稳转细胞系及其制备方法与应用。其中,该细胞系具体为非洲绿猴肾细胞VERO‑E6‑ACE2+,于2020年9月24日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:C2020191。该细胞系可以将外源基因整合入基因组内已知的安全位点,实现转入基因的正常表达而又不影响细胞的正常生理功能。其构建过程简单,可重复性好,效率高,克隆准确度高,能高效确保正确克隆的获取。
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