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公开(公告)号：CN114605518A
公开(公告)日：2022-06-10
申请号：CN202210299196.3
申请日：2022-03-25
Applicant: 华南农业大学 , 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: C07K14/45 , C12N15/30 , C12N15/70 , C12N15/66 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种弓形虫ROP17重组蛋白及其制备方法与应用，本发明首先对弓形虫ROP17基因进行特异性引物设计，然后以弓形虫DNA为模板扩增ROP17片段，经双酶切后连接到pET‑28a(+)表达载体中，并转化至克隆感受态细胞，提取质粒后再转化原核表达感受态细胞构建得到原核表达载体，对构建的原核表达载体诱导，纯化后制备得到弓形虫ROP17重组蛋白。本发明的融合蛋白ROP17具有较好的抗原性，可高效、高密度的捕获目标分子，达到快速、高灵敏检测弓形虫血清的目的，可适用于间接ELISA、夹心ELISA等检测方法，可准确快速地检测到弓形虫的感染，敏感性高、特异性强。
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公开(公告)号：CN117551812A
公开(公告)日：2024-02-13
申请号：CN202311346518.6
申请日：2023-10-17
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明属于病毒检测技术领域，公开了用于检测PaBV 2型、4型和5型的组合物及其试剂盒与应用。具体公开了一种试剂，包括引物组和/或探针组。本发明提供的试剂可用于对PaBV高度保守的P基因片段进行检测，可同时快速检测鉴定导致鹦鹉腺胃扩张症的博尔纳病毒2型、4型和5型三种基因型，且具备极高的检测敏感性与特异性，检测结果准确可靠。实现了在一管反应中只进行1次PCR扩增即可对鹦鹉博尔纳病毒3种基因型的病原进行检测。
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公开(公告)号：CN117660695A
公开(公告)日：2024-03-08
申请号：CN202311635346.4
申请日：2023-11-30
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于生物检测领域，具体涉及一种用于检测猪圆环病毒3型的等温扩增试剂盒。本发明提供了一种猪圆环病毒3型(Porcine circovirus 3，PCV3)等温扩增检测引物组，包括一对外引物(LOF与LOR)和一对内引物(LIF与LIR)，根据猪圆环病毒3型的保守序列设计得到。该引物组设计难度低，且保持与其他等温扩增反应如环介导等温扩增方法等相近的敏感性和特异性，可以适用于GC含量更高以及200bp以下的靶标序列，没有变性、退火过程，适合于现场检测，具有较大的应用潜力。
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公开(公告)号：CN119710091A
公开(公告)日：2025-03-28
申请号：CN202411966910.5
申请日：2024-12-30
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于病毒检测技术领域，具体公开了鹦鹉博尔纳病毒4型RNA荧光恒温扩增现场快速检测的方法和引物。本发明提供的引物和探针组合用于对鹦鹉博尔纳病毒4型保守的M基因片段进行检测，具有极高的特异性和灵敏度。本发明还提供用于检测鹦鹉博尔纳病毒4型的试剂盒，可用于非实验室条件下的鹦鹉博尔纳病毒4型的现场快速检测。
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公开(公告)号：CN117867034A
公开(公告)日：2024-04-12
申请号：CN202410052015.6
申请日：2024-01-15
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所 , 广东省农业科学院动物科学研究所 , 清远市清城区清远鸡研究院
IPC: C12P1/02 , C12P1/04 , C12P39/00 , C12M1/02 , C12M1/38 , C12M1/36 , C12M1/00 , H02J7/35 , H02K7/116 , H02K7/14
Abstract: 本发明提供了一种鬼针草发酵装置及方法，所述发酵方法包括：步骤一，将鬼针草放入粉碎机粉碎，粒度≥20目；步骤二，在发酵装置中质量比投入65％的鬼针草、34％的基质和1％的高温复合菌种，发酵7‑9天；发酵条件为，水分40‑45％，碳氮比(30‑35):1，温度40‑42℃，转速15r/min；所述装置包括发酵罐、储存罐、搅拌装置、太阳能板和控制系统；所述搅拌装置包括电机、行星齿轮系统和中心轴体；本发明的发酵装置可以通过行星齿轮系统自转与公转相结合的方式使物料搅拌的更加均匀。
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公开(公告)号：CN117701639A
公开(公告)日：2024-03-15
申请号：CN202311544593.3
申请日：2023-11-17
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明属于分子生物学技术领域，公开了利用慢病毒载体表达非洲猪瘟B119L基因及其构建方法和应用，具体公开了一种重组慢病毒载体。本发明提供了一种可表达B119L蛋白的重组慢病毒载体，将该重组慢病毒载体与慢病毒四质粒系统共转染至人胚胎肾上皮细胞(HEK‑293T)进行慢病毒包装，可稳定表达B119L蛋白。通过稳转HEK‑293T细胞系，收集上清液，纯化后得到B119L蛋白，其蛋白的表达时间和水平可以人为的控制，纯化便捷，且该B119L蛋白具有良好的免疫原性，可以为进一步开展研究非洲猪瘟慢病毒载体疫苗提供可靠平台。
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公开(公告)号：CN114438113A
公开(公告)日：2022-05-06
申请号：CN202210199555.8
申请日：2022-03-01
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: C12N15/74 , C12N15/66 , A61K39/205 , A61P31/14
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种重组狂犬病毒糖蛋白乳酸乳球菌载体及其构建方法和应用，为利用NICE表达系统和pgsA基因使狂犬病毒G蛋白表达在乳酸乳球菌中，本发明公开了一种重组狂犬病毒糖蛋白乳酸乳球菌载体的构建方法，利用枯草芽孢杆菌pgsA锚定蛋白的特性，将枯草芽孢杆菌pgsA基因与RABV的G基因连接到pNZ8149表达载体上进行融合性表达，使RABV的G蛋白表达在乳酸乳球菌的外表面，为跨膜表达体系的建立和新型狂犬病毒口服基因工程疫苗的研制奠定基础。
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公开(公告)号：CN114214268A
公开(公告)日：2022-03-22
申请号：CN202111517166.7
申请日：2021-12-13
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: C12N5/071 , C12N5/10 , C12N15/85 , C07K14/705
Abstract: 本发明属于基因重组与蛋白表达技术领域，具体涉及一种稳定表达SLAM蛋白的非洲绿猴肾细胞系及其构建方法和应用，本发明的细胞系为非洲绿猴肾细胞Vero‑E6‑SLAM，于2021年11月11日送往广东省微生物菌种保藏中心保藏，保藏编号为GDMCCNo:62054。通过构建pAAVS1‑Donor‑SLAM过表达质粒，再与pCas‑Guide‑AAVS1共转染至Vero‑E6细胞得到。该细胞系可以将外源基因整合入基因组内已知的安全位点，实现转入基因的正常表达而又不影响细胞的正常生理功能，克隆准确度高，可以应用于高产SLAM蛋白，为犬瘟热病毒的分离和致病机制研究提供平台。
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公开(公告)号：CN116200427A
公开(公告)日：2023-06-02
申请号：CN202211269735.5
申请日：2022-10-18
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明属于生物技术与细胞工程技术领域，具体涉及一种将hTERT基因定向敲入猪原代肺泡巨噬细胞获得永生化细胞系的方法及应用。本发明通过将目的基因hTERT导入到猪基因组的ROSA26安全位点，所得细胞系可以将外源基因整合入基因组内已知的安全位点，实现转入基因的正常表达而又不影响细胞的正常生理功能，所得细胞系能够稳定且正确的表达hTERT蛋白，并且在一定程度上具备了永生化的潜能。为构建高效、稳定增殖的永生化PAM细胞系奠定了实验基础，也可为非洲猪瘟病毒的分离、增殖特性、致病性及致病机制研究等提供参考。
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公开(公告)号：CN117721246A
公开(公告)日：2024-03-19
申请号：CN202311473311.5
申请日：2023-11-07
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明属于病毒检测技术领域，公开了用于检测野生鸟类γ和δ属冠状病毒的组合物及其试剂盒和应用。具体公开了一种试剂，包括引物组和/或探针组。本发明提供的试剂可用于对δ、γ属冠状病毒进行检测，可同时快速检测鉴定禽鸟中γ冠状病毒属和δ冠状病毒属，且具备极高的检测敏感性与特异性，检测结果准确可靠。实现了在一管反应中只进行1次荧光定量PCR扩增即可对冠状病毒属的病原进行检测。
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