公开(公告)号：CN111208306A

公开(公告)日：2020-05-29

申请号：CN202010232528.7

申请日：2020-03-28

Applicant: 安徽大学 ,  国家烟草质量监督检验中心

Inventor： 程皖燕 ,  付亚宁 ,  陈欢 ,  王安 ,  刘勇 ,  侯宏卫 ,  胡清源

IPC: G01N33/68

Abstract: 本发明属于生命科学研究领域，具体涉及一种检测大鼠外周血淋巴细胞中烟碱乙酰胆碱受体（nicotine acetylcholine receptors,nAChRs）表达量的方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：1）大鼠外周血淋巴细胞的分离；2）细胞总蛋白的获取、浓度测定及样品制备；3）蛋白免疫印迹（western blot,WB）实验检测淋巴细胞中nAChRs的表达量。本发明通过对外周血淋巴细胞中蛋白的测定能够实现实时动物外周血中蛋白表达的检测，对烟碱成瘾生物标志物的研究具有重要意义。

公开(公告)号：CN111856031A

公开(公告)日：2020-10-30

申请号：CN202010704372.8

申请日：2020-07-21

Applicant: 国家烟草质量监督检验中心

Inventor： 侯宏卫 ,  程皖燕 ,  陈欢 ,  张森 ,  付亚宁 ,  王红娟 ,  韩书磊 ,  胡清源

IPC: G01N33/68 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明公开了一种通过测定外周血中性粒细胞中蛋白的表达来鉴定烟碱暴露的潜在生物标志物的方法，所述方法包括：基于条件性位置偏爱(CPP)装置建立大鼠烟碱CPP获得模型，最终获得无烟碱摄入大鼠和烟碱依赖大鼠；分别从获得的两组大鼠中提取外周血，提取外周血中性粒细胞的总蛋白；通过Western Blotting分别检测获得的两组总蛋白中特定蛋白的表达；通过统计学分析检测得到的特定蛋白的表达在两组之间是否具有显著性差异，当具有显著性差异时，所述蛋白被鉴定为烟碱暴露的潜在生物标志物。本方法可模拟吸烟依赖和不吸烟的两种吸烟状态，对外周血中性粒细胞中蛋白水平进行测定，对于烟碱暴露生物标志物的相关研究具有较高应用价值。

公开(公告)号：CN111856031B

公开(公告)日：2023-04-28

申请号：CN202010704372.8

申请日：2020-07-21

Applicant: 国家烟草质量监督检验中心

Inventor： 侯宏卫 ,  程皖燕 ,  陈欢 ,  张森 ,  付亚宁 ,  王红娟 ,  韩书磊 ,  胡清源

IPC: G01N33/68 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明公开了一种通过测定外周血中性粒细胞中蛋白的表达来鉴定烟碱暴露的潜在生物标志物的方法，所述方法包括：基于条件性位置偏爱(CPP)装置建立大鼠烟碱CPP获得模型，最终获得无烟碱摄入大鼠和烟碱依赖大鼠；分别从获得的两组大鼠中提取外周血，提取外周血中性粒细胞的总蛋白；通过Western Blotting分别检测获得的两组总蛋白中特定蛋白的表达；通过统计学分析检测得到的特定蛋白的表达在两组之间是否具有显著性差异，当具有显著性差异时，所述蛋白被鉴定为烟碱暴露的潜在生物标志物。本方法可模拟吸烟依赖和不吸烟的两种吸烟状态，对外周血中性粒细胞中蛋白水平进行测定，对于烟碱暴露生物标志物的相关研究具有较高应用价值。