公开(公告)号：CN117987445A

公开(公告)日：2024-05-07

申请号：CN202410072195.4

申请日：2024-01-18

Applicant: 安徽大学

Inventor： 张楠楠 ,  孙燕霞 ,  葛宏华 ,  李杰 ,  聂梦雪 ,  屠心悦 ,  陶炫颖 ,  张萍萍 ,  何永兴 ,  王华丙

IPC: C12N15/78 ,  C12N15/31 ,  C07K14/21 ,  C12R1/39

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体的，本发明涉及一种荧光假单胞菌高丝氨酸内酯受体的表达和纯化方法。本发明通过构建不同的表达质粒，通过筛选分析，结果显示含中低拷贝BBR 1复制子的表达质粒及高丝氨酸内酯受体编码基因自身启动子驱动的表达质粒能获得更高活性的高丝氨酸内酯受体，且无需诱导剂诱导；随后通过离子交换层析和分子排阻层析，获得了纯度高的蛋白，凝胶阻滞实验表明通过该方法纯化的高丝氨酸内酯受体能很好的与其靶探针结合。本发明提供的这种方法可以解决高丝氨酸内酯受体在大肠杆菌中包涵体表达的问题，为细菌群体感应抑制剂筛选、开展高丝氨酸内酯受体结构研究提供物质基础。