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公开(公告)号：CN113355347A
公开(公告)日：2021-09-07
申请号：CN202110642739.2
申请日：2021-06-09
Applicant: 安徽大学
Abstract: 本发明公开了在少孢节丛孢菌中建立了一种新的遗传转化筛选体系，将有利于该真菌遗传转化体系的多层次应用。该方法包括如下步骤：首先将G418编码的对应氨基酸序列根据少孢节丛孢菌密码子偏好性进行密码子优化；将优化后的DNA序列在5’加上Ptef，3’加上Ttef，接着连接在pUC57载体上进行合成，获得Ptef‑G418‑Ttef的DNA模板；在使用时根据实验要求设计特异性引物进行PCR合成使用；使用同源重组‑原生质体转化法将G418导入少孢节丛孢菌。本发明为少孢节丛孢菌增加了一种新的抗性选择标记，可使原来对G418敏感的少孢节丛孢菌对其产生抗性，可对少孢节丛孢菌进行遗传基因操作，为研究少孢节丛孢菌的基因功能带来了巨大方便，而且费用低廉。
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公开(公告)号：CN111197010A
公开(公告)日：2020-05-26
申请号：CN202010117171.8
申请日：2020-02-25
Applicant: 安徽大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，本发明公开了一种丝状真菌外泌体的提取方法；该方法包括如下步骤：用LNAAM培养基发酵丝状真菌，得到含有此丝状真菌外泌体的发酵液；将此发酵液去除菌丝，然后进行高速离心去除不溶性杂质，保留上清；接着使用超滤离心管进行低温超滤浓缩，使用适量PBS溶液清洗浓缩液三次；然后使用外泌体纯化柱进行纯化；最后使用0.22μm过滤器进行过滤除菌即得到真菌外泌体；该方法可快速高效地从丝状真菌发酵液中提取到高纯度、高浓度的外泌体；同时，本发明还公开了一种丝状真菌外泌体在线虫生物防治领域的应用。
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