基于具有电催化活性的类蛋白质纳米线构建电化学生物传感器用于过氧化氢及葡萄糖检测

    公开(公告)号:CN108061750B

    公开(公告)日:2021-02-19

    申请号:CN201711373507.1

    申请日:2017-11-30

    Applicant: 宁波大学

    Abstract: 本发明公开了具有电催化活性的类蛋白质纳米线的电化学生物传感器用于过氧化氢及葡萄糖检测,具体步骤如下:(1)将石墨烯溶于醋酸缓冲液中,于超声清洗器中超声分散得到石墨烯分散液;(2)将石墨烯电沉积到裸玻碳电极,然后将GSH‑Ag(I)CP与0.05%wt Nafion混合滴涂于GO/GCE上,得到电化学传感器CP/GO/GCE。利用CP/GO/GCE这一体系对不同浓度过氧化氢的不同的电化学响应,以及在葡萄糖氧化酶的作用下葡萄糖被氧化产生过氧化氢的反应,得到CP/GO/GCE体系对不同浓度葡萄糖的电化学响应,从而用于检测过氧化氢和葡萄糖的浓度,优点是特异性好、灵敏度高、检测速度快、结果准确可靠、成本低且可用人体血液葡萄糖含量检测。

    一种检测核酸外切酶I的荧光传感方法

    公开(公告)号:CN107192697A

    公开(公告)日:2017-09-22

    申请号:CN201710363009.2

    申请日:2017-05-08

    Applicant: 宁波大学

    Abstract: 本发明公开了一种检测核酸外切酶I(Exo I)的荧光传感方法,特点是具体步骤如下:(1)将阳离子共轭聚合物(CCP)与铱配合物混合,然后加入Exo I缓冲液,得到用于检测Exo I的基于CCP与铱配合物荧光共振能量转移(FRET)效应的荧光传感器体系。检测荧光强度;(2)加入单链DNA(ssDNA)到步骤(1)中的体系,检测荧光强度的变化;(3)不同浓度的Exo I加入到步骤(2)中,检测样品中Exo I的活性,优点是第一次发明了一种特异性好、灵敏度高、检测速度快,结果准确可靠的分析传感方法用于Exo I的检测。

    基于具有电催化活性的多肽模拟物的电化学生物传感器用于乙酰胆碱酯酶检测

    公开(公告)号:CN108120761B

    公开(公告)日:2020-10-16

    申请号:CN201711373506.7

    申请日:2017-11-30

    Applicant: 宁波大学

    Abstract: 本发明公开了基于具有电催化活性的多肽模拟物的电化学生物传感器用于乙酰胆碱酯酶检测,特点是具体步骤如下:(1)将硝酸银、L‑半胱氨酸和二次蒸馏水于搅拌器上剧烈搅拌混合均匀,然后振荡器中孵育;(2)利用电化学方法将石墨烯电沉积到裸玻碳电极上,再用0.05%wt Nafion溶液与(1)所得溶液混合滴涂于GO/GCE上,得到基于具有电催化活性的多肽模拟物的电化学生物传感器(CP/GO/GCE);(3)乙酰胆碱酯酶活性检测,乙酰胆碱一步催化生成H2O2,将乙酰胆碱、AChE和胆碱氧化酶混合均匀,孵育生成H2O2,(2)中制得传感器对该溶液检测,特异性好、灵敏度高、检测速度快,结果准确可靠;(4)AChE抑制剂马拉硫磷检测,将乙酰胆碱、AChE、马拉硫磷和胆碱氧化酶混合均匀,孵育,(2)中制得传感器对该溶液检测,优点是特异性好、灵敏度高、检测速度快,结果准确可靠。

    基于腺嘌呤/Au(III)复合物的多功能电化学传感器的构建方法及应用

    公开(公告)号:CN108398478B

    公开(公告)日:2020-08-11

    申请号:CN201810147900.7

    申请日:2018-02-02

    Applicant: 宁波大学

    Abstract: 本发明公开了基于腺嘌呤/Au(III)复合物的多功能电化学传感器的构建方法及应用,特点是包括以下步骤:(1)将腺嘌呤水溶液与HAuCl4水溶液剧烈振荡混合,温育,离心并用水洗涤,制备腺嘌呤/Au(III)聚合物;(2)将预处理后的Au电极浸入捕获探针(DNA)的缓冲液中室温孵育。接着在MCH中除去电极表面非特异性DNA,记为电极1。然后,通过TdT扩增获得富T DNA长链,标记为电极2。最后,将腺嘌呤/Au(III)复合物溶液置于上述电极上,通过氢键作用和碱基互补配对原则发生特异性杂交吸附作用,获得电极3。修饰电极用超纯水冲洗,氮气流下干燥;(4)最后,将制备的传感器应用于DNA相关酶活性及其小分子抑制剂检测。

    一种检测组蛋白乙酰转移酶的电化学发光法拉第笼免疫传感器

    公开(公告)号:CN108562738B

    公开(公告)日:2020-07-21

    申请号:CN201810323247.5

    申请日:2018-04-03

    Applicant: 宁波大学

    Abstract: 本发明公开了一种检测组蛋白乙酰转移酶的电化学发光法拉第笼免疫传感器,特点是包括以下步骤:(1)制备捕获单元:合成磁性氧化石墨烯,依次用EDC/NHS溶液、HCl处理,随后与捕获抗体Ab1结合,常温孵育,最后加入BSA封闭GO表面的非特异性结合位点获得捕获单元Ab1‑nanoFe3O4@GO;(2)制备信号单元:识别抗体Ab2连接DNA四面体中,合成四面体‑Ab2;再合成纳米金(AuNPs),使之与氧化石墨烯形成复合物GO@AuNPs,随后与四面体‑Ab2结合,再加入Ru发光体,制得信号单元;(3)制备法拉第笼免疫传感器:取Ab1‑nanoFe3O4@GO溶液滴涂于MGCE表面,得Ab1‑nanoFe3O4@GO/MGCE,记为电极a;取p300溶液滴涂于Ab1‑nanoFe3O4@GO/MGCE,得p300/Ab1‑nanoFe3O4@GO/MGCE,记为电极b;最后,取Ru‑GO@AuNPs‑四面体‑Ab2溶液滴涂于p300/Ab1‑nanoFe3O4@GO/MGCE,得Ru‑GO@AuNPs‑四面体‑Ab2/p300/Ab1‑nanoFe3O4@GO/MGCE,记为电极c,即为电化学发光法拉第笼免疫传感器。

    基于类核酸辅酶A-Cu(II)配位聚合物的焦磷酸酶电化学生物传感器的制备方法及应用

    公开(公告)号:CN108267494A

    公开(公告)日:2018-07-10

    申请号:CN201711373508.6

    申请日:2017-11-30

    Applicant: 宁波大学

    Abstract: 本发明公开了基于类核酸辅酶A-Cu(II)配位聚合物的焦磷酸酶电化学生物传感器的制备方法及应用,具体步骤如下:(1)取Cu2+溶液,辅酶A水溶液,剧烈振荡得CoA-Cu(II)CP;(2)依次取PPi溶液,Cu2+溶液,Mg2+溶液,Tris-HCl缓冲液(pH 7.4),PPase于EP管中,剧烈振荡混合均匀,加入CoA;(3)取PPase于EP管中,加入NaF,剧烈震荡混合均匀,再加入PPi溶液,Cu2+溶液,Mg2+溶液,Tris-HCl缓冲液(pH 7.4),剧烈振荡混合均匀,加入CoA;(4)石墨烯分散于醋酸缓冲液中,用循环伏安法将石墨烯电沉积到裸玻碳电极得到GO/GCE,取(1)或(2)或(3)中的溶液滴涂于GO/GCE上,室温静置即得电化学传感器CP/GO/GCE。用于检测PPase活性及其小分子抑制剂,优点是特异性好、灵敏度高、检测速度快、结果准确可靠、成本低。

    基于FRET辨别DNA碱基长度及检测单链DNA结合蛋白的生物传感方法

    公开(公告)号:CN107179304B

    公开(公告)日:2019-09-27

    申请号:CN201710363117.X

    申请日:2017-05-08

    Applicant: 宁波大学

    Abstract: 本发明公开了基于荧光共振能量转移(FRET)辨别DNA碱基长度并检测单链DNA结合蛋白(SSB)的荧光传感方法,具体步骤如下:(1)阳离子共轭聚合物(CCP)与铱配合物混合,然后加入PBS缓冲溶液,得到用于检测SSB的基于CCP与铱配合物FRET效应的荧光传感器体系。检测荧光强度,计算CCP(415nm)的荧光强度与铱配合物(530nm)的荧光强度比值;(2)加入不同长度的DNA或发卡DNA到步骤(1)中的体系,检测荧光强度的变化;(3)不同浓度的SSB加入到步骤(2)中,然后加入缓冲溶液,检测荧光强度的变化,获得一系列不同浓度的SSB对应的荧光强度比值,建立荧光强度比值I530/I415与SSB浓度之间的定量关系;根据定量关系可以辨别DNA碱基长度并检测样品中SSB的未知浓度。

    基于具有电催化活性的类蛋白质纳米线构建电化学生物传感器用于过氧化氢及葡萄糖检测

    公开(公告)号:CN108061750A

    公开(公告)日:2018-05-22

    申请号:CN201711373507.1

    申请日:2017-11-30

    Applicant: 宁波大学

    CPC classification number: G01N27/48

    Abstract: 本发明公开了具有电催化活性的类蛋白质纳米线的电化学生物传感器用于过氧化氢及葡萄糖检测,具体步骤如下:(1)将石墨烯溶于醋酸缓冲液中,于超声清洗器中超声分散得到石墨烯分散液;(2)将石墨烯电沉积到裸玻碳电极,然后将GSH‑Ag(I)CP与0.05%wt Nafion混合滴涂于GO/GCE上,得到电化学传感器CP/GO/GCE。利用CP/GO/GCE这一体系对不同浓度过氧化氢的不同的电化学响应,以及在葡萄糖氧化酶的作用下葡萄糖被氧化产生过氧化氢的反应,得到CP/GO/GCE体系对不同浓度葡萄糖的电化学响应,从而用于检测过氧化氢和葡萄糖的浓度,优点是特异性好、灵敏度高、检测速度快、结果准确可靠、成本低且可用人体血液葡萄糖含量检测。

    基于FRET辨别DNA碱基长度及检测单链DNA结合蛋白的生物传感方法

    公开(公告)号:CN107179304A

    公开(公告)日:2017-09-19

    申请号:CN201710363117.X

    申请日:2017-05-08

    Applicant: 宁波大学

    Abstract: 本发明公开了基于荧光共振能量转移(FRET)辨别DNA碱基长度并检测单链DNA结合蛋白(SSB)的荧光传感方法,具体步骤如下:(1)阳离子共轭聚合物(CCP)与铱配合物混合,然后加入PBS缓冲溶液,得到用于检测SSB的基于CCP与铱配合物FRET效应的荧光传感器体系。检测荧光强度,计算CCP(415nm)的荧光强度与铱配合物(530nm)的荧光强度比值;(2)加入不同长度的DNA或发卡DNA到步骤(1)中的体系,检测荧光强度的变化;(3)不同浓度的SSB加入到步骤(2)中,然后加入缓冲溶液,检测荧光强度的变化,获得一系列不同浓度的SSB对应的荧光强度比值,建立荧光强度比值I530/I415与SSB浓度之间的定量关系;根据定量关系可以辨别DNA碱基长度并检测样品中SSB的未知浓度。

    基于类核酸辅酶A-Cu(II)配位聚合物的焦磷酸酶电化学生物传感器的制备方法及应用

    公开(公告)号:CN108267494B

    公开(公告)日:2020-05-19

    申请号:CN201711373508.6

    申请日:2017-11-30

    Applicant: 宁波大学

    Abstract: 本发明公开了基于类核酸辅酶A‑Cu(II)配位聚合物的焦磷酸酶电化学生物传感器的制备方法及应用,具体步骤如下:(1)取Cu2+溶液,辅酶A水溶液,剧烈振荡得CoA‑Cu(II)CP;(2)依次取PPi溶液,Cu2+溶液,Mg2+溶液,Tris‑HCl缓冲液(pH 7.4),PPase于EP管中,剧烈振荡混合均匀,加入CoA;(3)取PPase于EP管中,加入NaF,剧烈震荡混合均匀,再加入PPi溶液,Cu2+溶液,Mg2+溶液,Tris‑HCl缓冲液(pH 7.4),剧烈振荡混合均匀,加入CoA;(4)石墨烯分散于醋酸缓冲液中,用循环伏安法将石墨烯电沉积到裸玻碳电极得到GO/GCE,取(1)或(2)或(3)中的溶液滴涂于GO/GCE上,室温静置即得电化学传感器CP/GO/GCE。用于检测PPase活性及其小分子抑制剂,优点是特异性好、灵敏度高、检测速度快、结果准确可靠、成本低。

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