细胞培养载体组件及生物反应器

    公开(公告)号:CN115369036A

    公开(公告)日:2022-11-22

    申请号:CN202211290024.6

    申请日:2022-10-21

    Abstract: 本发明公开了一种细胞培养载体组件及生物反应器,细胞培养载体组件包括:外筒体、内筒体和多个载板。内筒体设在外筒体内,内筒体的上端设有上通口且下端设有下通口。多个载板位于外筒体内,包括相邻的第一板体和第二板体。第一板体和第二板体沿上下方向间隔排布,第一板体和第二板体位于内筒体的外侧,第一板体和第二板体低于上通口且高于下通口,第一板体和第二板体之间形成板间流道,第一板体的外边缘与外筒体之间形成外间隙,第二板体的内边缘与内筒体之间形成内间隙,内间隙和外间隙均连通板间流道。本申请的细胞培养载体组件,在保证细胞培养效果的同时,便于细胞转移和扩增,在细胞需要大规范生产时可以提高生产效率。

    口蹄疫抗原146S浓缩纯化方法

    公开(公告)号:CN107266537A

    公开(公告)日:2017-10-20

    申请号:CN201710648061.2

    申请日:2017-08-01

    Abstract: 本发明公开了口蹄疫抗原146S浓缩纯化方法,包括:先将口蹄疫病毒培养液离心至澄清,在无菌条件下加二氯甲烷,搅拌均匀,在低温下沉降,过夜,取上清液;过大、小孔径的中空纤维,然后层析,按照浓度为7-10%的比例加入PEG,搅拌;静置;提取上清液并弃去,将沉淀后的抗原搅拌均匀,无菌下灌装至离心桶内,沉降离心;弃上清液,沉淀物用pH值为7.6±0.2的PBS缓冲液稀释,重悬;重悬液用分散机充分匀浆;纯化离心,收集上清液,上清液为纯化抗原;纯化抗原用0.22μm孔径滤器过滤除菌,然后用适量PBS液冲洗滤器和管路。本发明采用二氯甲烷浓缩纯化口蹄疫抗原,比传统的氯仿安全性更好,并且纯化后杂蛋白含量较低。采用二氯甲烷把较大的杂蛋白除去,中控纤维去除特定大小的蛋白颗粒,Sephawse 6FF层析、TOYOPEARL、TSKgel离子交换层析进一步去除特定大小蛋白进一步提高目标蛋白纯度,PEG只抓取目标物(口蹄疫抗原),相当于再次除去杂蛋白结构,使得口蹄疫抗原浓缩纯化的效果更好。

    用于BHK21细胞悬浮培养的血清替代物、培养液及制备方法

    公开(公告)号:CN117106694A

    公开(公告)日:2023-11-24

    申请号:CN202210530461.4

    申请日:2022-05-16

    Abstract: 本发明提供一种用于BHK21细胞悬浮培养的血清替代物、培养液及制备方法,血清替代物包括组分:氯化钾、甘氨酸、亚硒酸钠、五水硫酸铜、二氯化锰、偏钒酸钠、溴化钾、氯化铬、氯化钴、氯化铷、氯化镉、乙酸钡、氧氯化锆、氟化钠、钼酸铵、氯化铜、氯化铝、氯化锂、硫酸镍、硝酸银、氢化可的松、乙醇胺、亚油酸、硫辛酸、胆固醇、维生素E醋酸酯、肉豆蔻酸、油酸、棕榈酸、硬脂酸、重组人胰岛素、羟乙基哌嗪乙磺酸、辅助物。通过上述组分可以取代血清,上述组分可以通过精确地配制获得,使得每个批次的取代物完全相同,避免由于血清的不同导致的细胞培养过程中产生的差异,使得细胞培养过程中具有一致性,提高细胞的培养效果。

    提高口蹄疫病毒表达水平的方法

    公开(公告)号:CN111979201B

    公开(公告)日:2023-05-16

    申请号:CN202010858051.3

    申请日:2020-08-24

    Abstract: 本发明提供一种提高口蹄疫病毒表达水平的方法,包括:步骤1,在反应器中培养待接种病毒的细胞,并获得细胞悬液;步骤2,将所述细胞悬液的培养温度调整为25‑36℃;步骤3,在所述细胞悬液的温度稳定后,接种口蹄疫病毒,并维持2.5‑9小时;步骤4,在所述口蹄疫病毒完成感染后,将所述反应器的温度控制为36℃以上;步骤5,收获口蹄疫病毒。根据本发明的提高口蹄疫病毒表达水平的方法,能够促进口蹄疫病毒感染细胞、提高病毒的表达水平,并且对之后的纯化、病毒效价没有不良影响。

    一种载体和生物反应器
    8.
    发明公开

    公开(公告)号:CN115537336A

    公开(公告)日:2022-12-30

    申请号:CN202110727054.8

    申请日:2021-06-29

    Abstract: 本发明提供一种载体和生物反应器,载体包括:第一板体,第一板体上设有第一开孔与第一通孔;第二板体,第一板体与第二板体平行间隔开设置,第二板体上与第一开孔对应的位置设有第二开孔,第二板体上与第一通孔对应的位置设有第二通孔;管体,管体的第一端穿设在第一通孔中,管体的第二端穿设在对应的第二通孔中。在细胞生长过程中,可以将载体置于培养液中,细胞可以在管体的内侧壁和外侧壁生长细胞,通过第一开孔与第二开孔可以使得培养液能够在管体之间充分均匀地流动,使得细胞可以获得充分的营养,细胞培养的效果好,反复使用效果佳,消化放大操作程序简单,有利于消化细胞并逐级放大。

    口蹄疫抗原146S浓缩纯化方法

    公开(公告)号:CN107266537B

    公开(公告)日:2020-12-01

    申请号:CN201710648061.2

    申请日:2017-08-01

    Abstract: 本发明公开了口蹄疫抗原146S浓缩纯化方法,包括:先将口蹄疫病毒培养液离心至澄清,在无菌条件下加二氯甲烷,搅拌均匀,在低温下沉降,过夜,取上清液;过大、小孔径的中空纤维,然后层析,按照浓度为7‑10%的比例加入PEG,搅拌;静置;提取上清液并弃去,将沉淀后的抗原搅拌均匀,无菌下灌装至离心桶内,沉降离心;弃上清液,沉淀物用pH值为7.6±0.2的PBS缓冲液稀释,重悬;重悬液用分散机充分匀浆;纯化离心,收集上清液,上清液为纯化抗原;纯化抗原用0.22μm孔径滤器过滤除菌,然后用适量PBS液冲洗滤器和管路。本发明采用二氯甲烷浓缩纯化口蹄疫抗原,比传统的氯仿安全性更好,并且纯化后杂蛋白含量较低。采用二氯甲烷把较大的杂蛋白除去,中控纤维去除特定大小的蛋白颗粒,Sephawse 6FF层析、TOYOPEARL、TSKgel离子交换层析进一步去除特定大小蛋白进一步提高目标蛋白纯度,PEG只抓取目标物(口蹄疫抗原),相当于再次除去杂蛋白结构,使得口蹄疫抗原浓缩纯化的效果更好。

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