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公开(公告)号：CN114235697B
公开(公告)日：2024-07-30
申请号：CN202111565236.6
申请日：2021-12-20
Applicant: 大连理工大学
Abstract: 本发明公开了一种基于蛋白酶控制释放比色检测藻类碱性磷酸酶的纸基器件与应用，属于分析检测领域。本发明通过RCA反应制备三维功能核酸，三维功能核酸结构中包含焦磷酸镁，利用碱性磷酸酶可以将焦磷酸镁水解为可溶性磷酸镁的作用特点，在数分钟内，三维功能核酸结构坍塌，释放被控的蛋白酶，在比色纸芯片加入TMB/H2O2显色底物后发生反应，产生颜色变化，显色深浅与待测物的含量成正比，整个检测过程约25min，检测成本低廉；本发明可应用于铜绿微囊藻藻液ALP活性检测，将藻液过膜处理后滴加于反应区，可通过显色深浅反映铜绿微囊藻藻液中ALP活性。本发明步骤简单、耗时短，不需大型分析仪器，可实现对待测物的快速现场定量检测。
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公开(公告)号：CN117965498A
公开(公告)日：2024-05-03
申请号：CN202410175116.2
申请日：2024-02-07
Applicant: 大连理工大学
Abstract: 本发明提供了一种可在常温常压下无铜催化叠氮炔基加成反应的链状脱氧核酶及其应用，属于脱氧核酶技术领域。本发明的脱氧核酶，由脱氧核酶基因片段JX1、JX2或JX3与N14互补得到；所述JX1的核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示，所述JX2的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示，所述JX3的核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示，所述N14的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示。本发明设计得到的脱氧核酶具有较高的催化活性，提高了叠氮炔基加成反应的产率，且不依赖铜，避免铜元素残留问题，更为安全可靠。
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公开(公告)号：CN115029348B
公开(公告)日：2024-03-12
申请号：CN202210564831.6
申请日：2022-05-23
Applicant: 大连理工大学
IPC: C12N15/113 , G01N33/569 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种可识别椰毒假单胞菌的链状脱氧核酶探针及应用，属于脱氧核酶探针技术领域。将磷酸化的底物链、文库酶链和连接链混合后连接，构建链状DNA文库，进行反向筛选，分离纯化未切割底物RNA位点的DNA条带，所得的DNA条带构建链状DNA文库，进行正向筛选，分离纯化切割底物RNA位点的DNA条带，进行PCR扩增，回收正义链，进行重复筛选，得到链状脱氧核酶探针，该探针能够高特异性检测椰毒假单胞菌，具有在生物传感应用方面发挥优势的潜力。
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公开(公告)号：CN113670991B
公开(公告)日：2024-01-30
申请号：CN202111050323.8
申请日：2021-09-08
Applicant: 大连理工大学
IPC: G01N27/12
Abstract: 本发明公开了一种暴露高能晶面的赤铁矿基单晶室温气敏材料及其制备方法与应用，属于气敏传感器领域。所述制备方法包括如下步骤：步骤1.将铁盐搅拌溶解到乙二醇溶剂中；步骤2.向步骤1制得的溶液中加入氨水溶液，搅拌溶解；步骤3.将步骤2制得的溶液进行水热反应；步骤4.将反应后的混合物离心清洗，获得沉淀物；步骤5.沉淀物干燥，得粉末；步骤6.将干燥后的粉末置于马弗炉中煅烧，得到暴露高能晶面的赤铁矿单晶室温气敏材料。以该材料作为敏感材料制成的平面叉指电极气敏元件，在室温工作时，元件对500ppm甲醛的响应和恢复时间均不大于1s，并且该元件在相同工作条件下对甲苯和丙酮气
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公开(公告)号：CN114107295A
公开(公告)日：2022-03-01
申请号：CN202111364446.9
申请日：2021-11-17
Applicant: 大连理工大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/10 , C12Q1/00
Abstract: 本发明公开了一种金属离子响应型环状脱氧核酶探针，属于脱氧核酶探针技术领域。将磷酸化的底物链、文库酶链和连接链I混合后连接，构建线状DNA文库，进行反向筛选，分离纯化未切割底物RNA位点的DNA条带，所得的DNA条带通过连接链II进行成环，构建环状DNA文库，进行正向筛选，分离纯化切割底物RNA位点的DNA条带，进行PCR扩增，回收正义链，进行重复筛选，得到环状脱氧核酶探针，该探针在线状时催化效率较低，但在环状时催化效率较高，本发明的脱氧核酶探针具有优异的稳定性，可以在生物传感应用方面发挥优势。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113774054A
公开(公告)日：2021-12-10
申请号：CN202111138207.1
申请日：2021-09-27
Applicant: 大连理工大学
IPC: C12N15/11 , C12N15/10 , C12Q1/6806 , C12Q1/6844
Abstract: 本发明公开了一种可利用DNA连接酶促进分子内环化的最适DNA底物及应用，属于DNA合成技术领域。通过使用体外选择技术(SELEX)，从一个随机序列的DNA库中，定向进化出针对T4DNA连接酶的最适DNA分子，能够采用结构安排，有利于分子内环化。本发明成功进化出一条最适底物，允许以极高的收率和选择性，在顺式和反式反应中大规模合成DNA环。此外，反式作用的模板有助于构建连锁DNA双环，可作为滚环扩增的自由模板。与传统的检测方法相比，本发明解决了传统成环过程中因没有明显熵差异不可避免得生成线性连接产物等问题，实现了环状核酸得高产率和高特异性制备。
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公开(公告)号：CN112852924A
公开(公告)日：2021-05-28
申请号：CN202110048082.7
申请日：2021-01-14
Applicant: 大连理工大学
IPC: C12Q1/6825 , G01N33/68 , G01N33/535 , G01N21/78
Abstract: 本发明公开了一种用于蛋白酶控制释放的材料及其制备方法与应用，属于分析检测领域。本发明首先通过RCA反应制备三维功能核酸(3D DNA)，3D DNA结构中包含可与待测物质碱基互补配对的核苷酸序列或者可与待测物质特异性结合的适配体，利用待测物质与核苷酸序列或者适配体结合过程中3D DNA结构尺度的微小变化，在数分钟内，释放被控的蛋白酶，在比色纸芯片加入TMB/H2O2显色底物后发生反应，产生颜色变化，显色深浅与待测物的含量成正比，整个检测过程约16min，检测成本低廉；与现有技术相比，本发明步骤简单、耗时短，可实现对待测物的快速现场定量检测。
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公开(公告)号：CN119662784A
公开(公告)日：2025-03-21
申请号：CN202411939582.X
申请日：2024-12-26
Applicant: 大连理工大学
Abstract: 本发明公开一种基于多重细菌同时检测的多模态呈现检测方法，属于分析检测技术领域。本发明首先制备细菌靶标；然后制备细菌响应型探针的功能化磁珠，将细菌靶标中加入制备的细菌响应型探针的功能化磁珠进行孵育，细菌响应型探针识别靶标，切割RNA位点释放RCA扩增引物，加入环状模板、phi 29DNA聚合酶、dNTPs、T4多核苷酸激酶进行RCA扩增反应，得到RCA产物，加入分子信标，通过荧光光谱仪、倒置荧光显微镜或智能手机拍照进行检测。该检测方法对大肠杆菌、椰毒假单胞菌、金黄色葡萄球菌均具有良好的特异性，具有便携、简单、结果可靠性准确性高、成本低廉等优点，有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN117844950A
公开(公告)日：2024-04-09
申请号：CN202410031879.X
申请日：2024-01-09
Applicant: 大连理工大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6825 , C12Q1/682 , C12N15/113 , C12N15/11 , C12N15/55 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种基于脱氧核酶联合CRISPR/Cas12a生物传感系统及其应用，属于分析检测技术领域。本发明首次提出通过结合基于脱氧核酶和CRISPR/Cas12a的生物传感系统，所述生物传感系统包括Cas12a蛋白、环状crRNA、RNA裂解的脱氧核酶的底部部分FS1、RNA裂解的脱氧核酶的脱氧核酶部分5’short、靶标、FQ‑ssDNA探针。本发明构建的基于脱氧核酶联合CRISPR/Cas12a生物传感系统具有高特异性，能够区分多种菌属的CIM，并在60分钟内获得实验结果，具有快速响应的特点。此外，本发明构建的基于脱氧核酶联合CRISPR/Cas12a生物传感系统具有高通量检测的优势，利用酶标仪96孔板，可同时检测多个样本，有望用于临床样本快速检测的潜力。
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公开(公告)号：CN114231530B
公开(公告)日：2024-03-15
申请号：CN202111567086.2
申请日：2021-12-20
Applicant: 大连理工大学
IPC: C12N15/113 , C12N9/22 , C12Q1/10 , G01N21/64
Abstract: 本发明公开了一种基于核酸核酶与环状向导RNA调控的Cas12a‑CcrRNA系统及其应用，属于分析检测技术领域。本发明首次发现酶促连接反应合成的CcrRNA可以降低Cas12a对双链DNA特异性切割(顺式)和对单链DNA非特异性切割(反式)的活性，当核酸酶(NAzyme)对CcrRNA进行切割时，释放出的LcrRNA可恢复Cas12a的活性，构建了核酸核酶激活的Cas12‑CcrRNA系统(NA3C)，本发明还设计了一种用于ATP和致病菌(大肠杆菌和肺炎克雷伯氏菌)的高特异性检测方法，其检出限分别低至500nM和102CFU/mL；进一步将构建的NA3C系统用于大肠杆菌临床评估，结果显示其诊断灵敏度可达100％，特异性为90％，表明NA3C具有用于临床诊断的潜力。
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