公开(公告)号：CN111748525A

公开(公告)日：2020-10-09

申请号：CN202010564286.1

申请日：2020-06-19

Applicant: 复旦大学附属妇产科医院

Inventor： 赵洪波 ,  杜琰 ,  吴静 ,  冯璇

IPC: C12N5/09 ,  C12N1/36 ,  C12Q1/02

Abstract: 本发明公开了绒毛膜癌耐药细胞株的建立方法及其应用，该方法包括：人绒毛膜癌细胞JAR株，复苏后用PRMI-1640培养液于37℃、5％CO2条件下培养；取对数生长期JAR细胞，换新鲜培养液，加入VP16，使其作用浓度为0.1μg/ml药物浓度直至存活细胞能在此浓度稳定生长、传代；适当增加VP16的作用浓度，在37℃、5％CO2条件下继续培养，适时换液，维持药物浓度直至存活细胞能在此浓度稳定生长、传代；重复步骤三直到获得能在3μg/ml VP16中稳定生长、传代及复苏的JAR/VP16细胞株；稳定耐药后，及时冻存该浓度耐药细胞于液氮中。本发明选择药物浓度递增法，特点在于细胞培养的外环境逐渐改变，细胞较易耐受，状态较好，细胞状态较易控制，耐药性能稳定。

公开(公告)号：CN113528430A

公开(公告)日：2021-10-22

申请号：CN202110570694.2

申请日：2021-05-25

Applicant: 复旦大学附属妇产科医院

Inventor： 赵洪波 ,  杜琰 ,  张赛 ,  干建峰

IPC: C12N5/073

Abstract: 本发明属于肿瘤生物学技术领域，公开了一种PSTT病灶肿瘤相关间质细胞株、构建方法及应用，获取PSTT新鲜组织标本；对获取的PSTT新鲜组织标本进行剪切、胰酶消化，去除混杂细胞，获得CAFs原代培养细胞株；对构建的CAFs原代培养细胞株进行免疫荧光检测α‑SMA，FAP，FSP1及其他标志蛋白表达验证构建的CAFs原代培养细胞株。鉴于肿瘤相关间质细胞的异质性，利用流式细胞分选技术分选出高表达EGR1的PSTT相关间质细胞(EGR+PSTT CAFs)。本发明有助于对于分析PSTT对化疗药物耐药的分子机制研究提供良好的细胞模型，有助于筛选并发现新的导致PSTT耐药的新靶点。