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公开(公告)号:CN111748525A
公开(公告)日:2020-10-09
申请号:CN202010564286.1
申请日:2020-06-19
Applicant: 复旦大学附属妇产科医院
Abstract: 本发明公开了绒毛膜癌耐药细胞株的建立方法及其应用,该方法包括:人绒毛膜癌细胞JAR株,复苏后用PRMI-1640培养液于37℃、5%CO2条件下培养;取对数生长期JAR细胞,换新鲜培养液,加入VP16,使其作用浓度为0.1μg/ml药物浓度直至存活细胞能在此浓度稳定生长、传代;适当增加VP16的作用浓度,在37℃、5%CO2条件下继续培养,适时换液,维持药物浓度直至存活细胞能在此浓度稳定生长、传代;重复步骤三直到获得能在3μg/ml VP16中稳定生长、传代及复苏的JAR/VP16细胞株;稳定耐药后,及时冻存该浓度耐药细胞于液氮中。本发明选择药物浓度递增法,特点在于细胞培养的外环境逐渐改变,细胞较易耐受,状态较好,细胞状态较易控制,耐药性能稳定。