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公开(公告)号：CN116640749A
公开(公告)日：2023-08-25
申请号：CN202210140362.5
申请日：2022-02-16
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于基因编辑技术领域，涉及胞苷脱氨酶突变体及基于胞苷脱氨酶突变体构建的碱基编辑器。本发明通过在胞苷脱氨酶LjCDA1中引入不同突变，开发了新的胞苷脱氨酶突变体，通过将胞苷脱氨酶突变体融合于SpCas9为代表的突变型核酸酶的不同位点，得到的新融合蛋白，即碱基编辑器CBE，能对位于前间隔序列不同位置的胞嘧啶实现有效的C‑T碱基突变。本发明所获得的CBE变体具有多样化C‑T编辑碱基偏好性和活性窗口，相关的CBE变体其Cas非依赖的DNA脱靶效应和RNA脱靶效应均处于低水平甚至被清除。本发明可实现更广范围、更精细且安全性更高的C‑T单碱基替换，能有效拓宽单碱基编辑工具的应用，具有很高的应用价值。
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公开(公告)号：CN116355885A
公开(公告)日：2023-06-30
申请号：CN202111623313.9
申请日：2021-12-28
Applicant: 复旦大学
IPC: C12N9/78 , C12N9/22 , C12N15/55 , C12N15/62 , C12N15/113
Abstract: 本发明属于基因编辑技术领域，涉及脱氨酶突变体及基于脱氨酶突变体构建的碱基编辑器。本发明开发了新的胞苷脱氨酶突变体，通过将胞苷脱氨酶突变体融合于SpCas9为代表的突变型核酸酶的不同位点，得到的新融合蛋白能对位于前间隔序列不同位置的胞嘧啶实现有效的C‑T碱基突变。通过所述方法获得的融合蛋白，其Cas非依赖的DNA脱靶效应接近本底水平，且具有多样化的编辑活性窗口。本发明的碱基编辑器具有非常低水平的DNA/RNA脱靶效应，且活性窗口多样化，可实现更广范围、更精细且安全性更高的C‑T单碱基替换，能有效拓宽单碱基编辑工具的应用，具有很高的应用价值。
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公开(公告)号：CN116355100A
公开(公告)日：2023-06-30
申请号：CN202111622218.7
申请日：2021-12-28
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明涉及基因编辑技术领域，涉及一种碱基编辑器及其构建方法与应用。本发明通过将胞苷脱氨酶及其突变体融合于Cas12f1为代表的突变型核酸酶的不同位点，得到的新融合蛋白能对位于前间隔序列不同位置的胞嘧啶实现有效的C‑T碱基突变，通过将脱氧腺苷脱氨酶及变体融合于Cas12f1为代表的突变型核酸酶的不同位点，得到的新融合蛋白能对位于前间隔序列不同位置的腺嘌呤和/或胞嘧啶实现有效的A‑G和/或C‑T碱基突变。通过本发明的方法获得的不同的插入位点为基础的融合蛋白，其可突变范围各有差异。本发明的碱基编辑器体积更小，且活性窗口多样化，可实现更广范围、更精细且安全性更高的C‑T单碱基替换和A‑G单碱基替换，能有效拓宽单碱基编辑工具的应用。
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