公开(公告)号：CN101974489B

公开(公告)日：2012-12-12

申请号：CN201010216388.0

申请日：2010-06-30

Applicant: 复旦大学

Inventor： 居丽雯 ,  姜庆五 ,  蒋露芳 ,  吕锡宏

IPC: C12N7/00 ,  G01N33/569 ,  A61K39/145 ,  A61P31/16 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明属于微生物病毒领域，提供了一种甲型H1N1流感病毒。该病毒含有HA、NA、NP、PB1、PB2、PA、NS、M共8个片段，其核苷酸序列如说明书核苷酸序列表所示。本发明通过患者咽拭标本分离培养和DIF、RT-PCR鉴定，以及病毒的8个基因全序列测序比对，获得并证明所分离的病毒为甲型H1N1流感病毒毒株，命名为A/shanghai/570/2009(H1N1)，保藏号：CCTCC NO：V201015。本发明的毒株补充了我国甲型流感病毒的极有价值的遗传信息，对该病原引起感染监测体系的完善有重要作用，还可用于制备甲型H1N1病毒感染的快速诊断试剂和疫苗研究。

公开(公告)号：CN101974489A

公开(公告)日：2011-02-16

申请号：CN201010216388.0

申请日：2010-06-30

Applicant: 复旦大学

Inventor： 居丽雯 ,  姜庆五 ,  蒋露芳 ,  吕锡宏

IPC: C12N7/00 ,  G01N33/569 ,  A61K39/145 ,  A61P31/16 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明属于微生物病毒领域，提供了一种甲型H1N1流感病毒。该病毒含有HA、NA、NP、PB1、PB2、PA、NS、M共8个片段，其核苷酸序列如说明书核苷酸序列表所示。本发明通过患者咽拭标本分离培养和DIF、RT-PCR鉴定，以及病毒的8个基因全序列测序比对，获得并证明所分离的病毒为甲型H1N1流感病毒毒株，命名为A/shanghai/570/2009(H1N1)，保藏号：CCTCC No：V201015。本发明的毒株补充了我国甲型流感病毒的极有价值的遗传信息，对该病原引起感染监测体系的完善有重要作用，还可用于制备甲型H1N1病毒感染的快速诊断试剂和疫苗研究。

公开(公告)号：CN103160476A

公开(公告)日：2013-06-19

申请号：CN201110426494.6

申请日：2011-12-18

Applicant: 复旦大学

Inventor： 居丽雯 ,  蒋露芳 ,  汪千力 ,  朱雯 ,  姜庆五

IPC: C12N7/00 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明属生物技术领域，涉及一种分离培养多种病毒的方法。尤其是用于分离培养多种病毒的MHV混合细胞液氮保存方法；本方法中，采用MEM冻存液，通过T75细胞瓶制备混合细胞MHV单层细胞，经EDTA-胰酶消化，直接悬浮于冷冻保存液中，在液氮中保存4个月后，细胞复苏后存活率达到99.20％～99.60％。本发明方法能克服现有技术中MHV混和细胞在分离培养多种病毒时的缺陷，可为临床病毒性疾病的快速诊断、实验室病毒性监测中多种病毒病原的分离培养提供切实的可操作性，尤其适用于呼吸道流感病毒、腺病毒和人肠道病毒EV71分离培养。能解决目前传染性疾病爆发疫情的公共卫生应急的需求，和临床实验室的病毒性传染性疾病的检测。

公开(公告)号：CN102154219B

公开(公告)日：2013-02-27

申请号：CN201010216403.1

申请日：2010-06-30

Applicant: 复旦大学

Inventor： 居丽雯 ,  蒋露芳 ,  姜庆五

IPC: C12N7/00 ,  G01N33/569 ,  A61K39/145 ,  A61P31/16 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明属于微生物病毒领域，提供了猪源甲型H1N1流感病毒。该病毒含有HA、NA、NP、PB1、PB2、PA、NS、M共8个片段，其核苷酸序列依次分别如说明书的核苷酸序列表中序列1-8所示。本发明通过健康猪只鼻咽拭标本分离培养和DIF、RT-PCR鉴定，以及病毒的8个基因全序列测序比对，获得并证实所分离的病毒为猪甲型H1N1流感病毒毒株，命名为A/swine/zhejiang/26/2009(H1N1)，保藏号：CCTCC NO：V201016。本发明的毒株补充了我国猪只甲型流感病毒的极有价值的遗传信息，对该病原引起感染监测体系的完善有重要作用，还可用于制备甲型H1N1病毒感染的快速诊断试剂。

公开(公告)号：CN102337249A

公开(公告)日：2012-02-01

申请号：CN201010236929.6

申请日：2010-07-23

Applicant: 复旦大学

Inventor： 居丽雯 ,  蒋露芳 ,  高颖阳 ,  姜晨彦 ,  姜庆五

IPC: C12N7/00

Abstract: 本发明属生物技术领域，涉及一种MHV混合细胞分离培养多种病毒的培养方法，其通过T75细胞瓶制备MDCK、HEP-2、Vero单层细胞，经EDTA-胰酶消化，分别对所述细胞悬液计数后混合，制成细胞数为1.5×105/ml的细胞悬液，加入培养小瓶制成混合细胞培养瓶。本发明的混合细胞培养瓶可用于分离培养多种病毒，如甲型、乙型流感病毒；腺病毒；肠道病毒EV71。本发明方法通过三种细胞制成混合细胞瓶分离培养鉴定多种病毒病原，较现有技术分离培养效果好，克服传统分离培养病毒主要是用一种细胞系，通过推测可能感染的病毒来选取敏感细胞系的缺陷，既提高了病毒诊断的特异性和敏感性，又能比较快速的出结果。

公开(公告)号：CN102154219A

公开(公告)日：2011-08-17

申请号：CN201010216403.1

申请日：2010-06-30

Applicant: 复旦大学

Inventor： 居丽雯 ,  蒋露芳 ,  姜庆五

IPC: C12N7/00 ,  G01N33/569 ,  A61K39/145 ,  A61P31/16 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明属于微生物病毒领域，提供了猪源甲型H1N1流感病毒。该病毒含有HA、NA、NP、PB1、PB2、PA、NS、M共8个片段，其核苷酸序列依次分别如说明书的核苷酸序列表中序列1-8所示。本发明通过健康猪只鼻咽拭标本分离培养和DIF、RT-PCR鉴定，以及病毒的8个基因全序列测序比对，获得并证实所分离的病毒为猪甲型H1N1流感病毒毒株，命名为A/swine/zhejiang/26/2009(H1N1)，保藏号：CCTCC NO：V201016。本发明的毒株补充了我国猪只甲型流感病毒的极有价值的遗传信息，对该病原引起感染监测体系的完善有重要作用，还可用于制备甲型H1N1病毒感染的快速诊断试剂。