公开(公告)号：CN106754831A

公开(公告)日：2017-05-31

申请号：CN201611238728.3

申请日：2016-12-28

Applicant: 复旦大学

Inventor： 李继喜 ,  申彦芳 ,  梅谱成

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/56 ,  C12N15/70

Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体为一种深海细菌木糖苷酶CmXynB1及其表达纯化、晶体结构和应用。本发明涉及木糖苷酶基因CmXynB1来自深海细菌E4A9T，其含有485个氨基酸，分子量为53.35kDa，核苷酸序列如SEQ.ID.NO.1所示，其氨基酸序列如SEQ.ID.NO.2所示；在表达菌株中高度可溶性表达，并且表现出良好的耐盐、耐酸的性质。所述木糖苷酶CmXynB1的晶体结构分辨率达到1.8Å。该结构由22个β折叠和10个α螺旋组成，其活性中心是典型的(β/α)8桶型结构，但是在其碳末端由10个β折叠构成缩短的发夹结构，该发夹结构与其底物的作用密切相关。与水解酶家族GH39的结构相比，该木糖苷酶CmXynB1的三维结构可在糖苷类药物制备、工业酶制剂中底物改造及提高酶活方面具有广泛的应用前景。

公开(公告)号：CN106754831B

公开(公告)日：2020-07-28

申请号：CN201611238728.3

申请日：2016-12-28

Applicant: 复旦大学

Inventor： 李继喜 ,  申彦芳 ,  梅谱成

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/56 ,  C12N15/70

Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体为一种深海细菌木糖苷酶CmXynB1及其表达纯化、晶体结构和应用。本发明涉及木糖苷酶基因CmXynB1来自深海细菌E4A9T，其含有485个氨基酸，分子量为53.35kDa，核苷酸序列如SEQ.ID.NO.1所示，其氨基酸序列如SEQ.ID.NO.2所示；在表达菌株中高度可溶性表达，并且表现出良好的耐盐、耐酸的性质。所述木糖苷酶CmXynB1的晶体结构分辨率达到1.8Å。该结构由22个β折叠和10个α螺旋组成，其活性中心是典型的(β/α)8桶型结构，但是在其碳末端由10个β折叠构成缩短的发夹结构，该发夹结构与其底物的作用密切相关。与水解酶家族GH39的结构相比，该木糖苷酶CmXynB1的三维结构可在糖苷类药物制备、工业酶制剂中底物改造及提高酶活方面具有广泛的应用前景。