一种基于核酸和铂纳米材料的自组装体系检测核酸浓度的方法

    公开(公告)号:CN106520972A

    公开(公告)日:2017-03-22

    申请号:CN201611054084.2

    申请日:2016-11-25

    Abstract: 本发明涉及一种基于核酸和铂纳米材料的自组装体系检测核酸浓度的方法,包括如下步骤:引发核酸探针之间的杂交链式反应,留取杂交链式反应的上清液;在上清液中,制备核酸铂纳米复合材料;制备显色底物;把显色底物引入核酸铂纳米复合材料进行显色反应以进行核酸浓度的检测。与现有技术相比,本发明阐明了基于核酸铂纳米材料的自组装体系的核酸浓度的检测机理,本发明所述的检测核酸浓度的方法,实现目标核酸的比色检测,大大缩短了检测时间,同时可采用紫外吸光度的测量,进行核酸浓度的精确检测,提高了检测灵敏度,其对于目标核酸具有很好的选择性和特异性,设计和操作过程都十分简便、成本低廉、又兼顾较好的灵敏度,具有良好的应用前景。

    一种特异性检测肿瘤标志物mucin1的LAMP方法

    公开(公告)号:CN104862309A

    公开(公告)日:2015-08-26

    申请号:CN201510195404.5

    申请日:2015-04-22

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明属于蛋白质组学和分子生物学技术领域,具体为一种特异性检测肿瘤标志物黏蛋白(Mucin 1)的LAMP方法。本发明利用mucin 1适配体(mucin 1 aptamer)能特异性结合黏蛋白的性质,把mucin 1 aptamer作为LAMP反应中的F3引物,使其特异性结合Mucin 1黏蛋白,从而根据F3参与LAMP扩增反应后荧光强度来间接检测糖蛋白Mucin 1的含量;其中,本发明设计七组引物,用于LAMP扩增反应;并筛选出一组优化引物,用于对黏蛋白进行灵敏度检测。本发明方法操作简便、特异性高、灵敏度高,通过LAMP核酸扩增方法高灵敏的检测低丰度蛋白含量。

    一种基于核酸和铂纳米材料的自组装体系检测核酸浓度的方法

    公开(公告)号:CN106520972B

    公开(公告)日:2020-11-10

    申请号:CN201611054084.2

    申请日:2016-11-25

    Abstract: 本发明涉及一种基于核酸和铂纳米材料的自组装体系检测核酸浓度的方法,包括如下步骤:引发核酸探针之间的杂交链式反应,留取杂交链式反应的上清液;在上清液中,制备核酸铂纳米复合材料;制备显色底物;把显色底物引入核酸铂纳米复合材料进行显色反应以进行核酸浓度的检测。与现有技术相比,本发明阐明了基于核酸铂纳米材料的自组装体系的核酸浓度的检测机理,本发明所述的检测核酸浓度的方法,实现目标核酸的比色检测,大大缩短了检测时间,同时可采用紫外吸光度的测量,进行核酸浓度的精确检测,提高了检测灵敏度,其对于目标核酸具有很好的选择性和特异性,设计和操作过程都十分简便、成本低廉、又兼顾较好的灵敏度,具有良好的应用前景。

    一种利用纸芯片比色分析装置检测核酸浓度的方法

    公开(公告)号:CN106442516A

    公开(公告)日:2017-02-22

    申请号:CN201611054753.6

    申请日:2016-11-25

    CPC classification number: G01N21/78 G01N21/82

    Abstract: 本发明涉及一种利用纸芯片比色分析装置检测核酸浓度的方法,所述纸芯片比色分析装置包括纸芯片、模具基底以及光纤分析设备,所述检测核酸浓度的方法包括以下步骤:将纸芯片放置在模具基底上,在纸芯片上预先滴加TMB/H2O2显色底物溶液;滴加核酸铂纳米复合材料至纸芯片上,与显色底物溶液混合后反应3-4分钟;观测并记录纸芯片的比色结果,显色颜色从无色变化至蓝色,颜色深度与核酸浓度成反比;将纸芯片放置于光纤分析设备中,进一步数值化精确读取纸芯片的颜色强度。与现有技术相比,本发明所述的核酸浓度定量检测方法具有很大的优势,其操作简单,便携性强,能够实现对0.0075uM目标核酸浓度的检测,且成本较低,具有十分优异的经济效益,具有良好的应用前景。

    一种利用纸芯片比色分析装置检测核酸浓度的方法

    公开(公告)号:CN106442516B

    公开(公告)日:2019-06-18

    申请号:CN201611054753.6

    申请日:2016-11-25

    Abstract: 本发明涉及一种利用纸芯片比色分析装置检测核酸浓度的方法,所述纸芯片比色分析装置包括纸芯片、模具基底以及光纤分析设备,所述检测核酸浓度的方法包括以下步骤:将纸芯片放置在模具基底上,在纸芯片上预先滴加TMB/H2O2显色底物溶液;滴加核酸铂纳米复合材料至纸芯片上,与显色底物溶液混合后反应3‑4分钟;观测并记录纸芯片的比色结果,显色颜色从无色变化至蓝色,颜色深度与核酸浓度成反比;将纸芯片放置于光纤分析设备中,进一步数值化精确读取纸芯片的颜色强度。与现有技术相比,本发明所述的核酸浓度定量检测方法具有很大的优势,其操作简单,便携性强,能够实现对0.0075uM目标核酸浓度的检测,且成本较低,具有十分优异的经济效益,具有良好的应用前景。

    转基因大豆MON89788及其衍生品种的LAMP检测引物组、检测试剂盒和检测方法

    公开(公告)号:CN104513861B

    公开(公告)日:2019-03-12

    申请号:CN201510018179.8

    申请日:2015-01-14

    Abstract: 本发明公开了一种转基因大豆MON89788及其衍生品种的LAMP检测引物组、检测试剂盒和检测方法。检测引物组包括四条特异性引物;检测试剂盒包括引物液、反应液、DNA聚合酶和对照;试剂盒还可以有显色剂或荧光指示剂;其检测方法是通过提取待检大豆品种的DNA、采用四条特异性引物及一种具有链置换活性的DNA聚合酶,在60~65℃对样品DNA模板进行扩增,短时间扩增效率可达到109~1010个拷贝,其鉴定采用反应管内沉淀的浊度变化、加入显色剂观察反应管内颜色变化、利用实时荧光检测仪观察确定待检大豆品种是否含有或为转基因大豆MON89788及其衍生品种。本发明具有快速高效、操作简便、高特异性、高灵敏度、鉴定简便、适合现场检测等优点,适于推广应用。

    一种特异性检测肿瘤标志物mucin 1的LAMP方法

    公开(公告)号:CN104862309B

    公开(公告)日:2018-08-07

    申请号:CN201510195404.5

    申请日:2015-04-22

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明属于蛋白质组学和分子生物学技术领域,具体为种特异性检测肿瘤标志物黏蛋白(Mucin 1)的LAMP方法。本发明利用mucin 1适配体(mucin 1 aptamer)能特异性结合黏蛋白的性质,把mucin 1 aptamer作为LAMP反应中的F3引物,使其特异性结合Mucin 1黏蛋白,从而根据F3参与LAMP扩增反应后荧光强度来间接检测糖蛋白Mucin 1的含量;其中,本发明设计七组引物,用于LAMP扩增反应;并筛选出组优化引物,用于对黏蛋白进行灵敏度检测。本发明方法操作简便、特异性高、灵敏度高,通过LAMP核酸扩增方法高灵敏的检测低丰度蛋白含量。

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